MICM分型在弥漫大B细胞淋巴瘤中的作用研究进展

弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)是常见的淋巴造血系统恶性肿瘤之一,具有高度异质性,也是非霍奇金淋巴瘤(NHL)中最常见的病理类型。随着基因组学、诊断技术和靶向治疗的发展,淋巴瘤的诊断分型不再局限于病理形态学和免疫表型,细胞遗传学和分子生物学逐渐在其中发挥越来越重要的作用,新出现的各种生物标志物也为深入了解淋巴瘤的发生与发展机制、优化治疗及评估预后奠定了基础。形态学、免疫学、细胞遗传学和分子学分型一起构成了淋巴瘤诊疗的MICM分型。现就MICM分型在DLBCL诊断、分型、分期、治疗及预后方面的作用进行综述。

MICM分型诊断在鉴别M_2和M_3型急性髓性白血病中的意义

目的:探讨形态学、免疫学、细胞遗传学和分子生物学(MICM)分型诊断在鉴别M2、M3 型急性髓性白血病(AML)中的意义。方法:对10 例按FAB方案难以区分M2、M3 型的AML及2 例在基层医院诊断为M3b,用全反式维甲酸(ATRA)治疗未获缓解的患者应用常规细胞遗传学(CC)进行核型分析;以筑巢式逆转录聚合酶链反应(nested RT PCR)技术检测PML/RARa及AML1/ETO融合基因转录本;以流式细胞术检测白血病细胞免疫表型。对2例在基层医院诊断为M3b 而用ATRA治疗效果不好的病例用间期双色FISH 技术检测AML1/ETO融和基因。结果:12例患者中,4例有t(8;21),AML1/ETO融合基因转录本阳性,确诊为M2;2 例有t(15;17),PML/RARa融合基因转录本阳性,确诊为M3;其他6例患者为正常核型,其中,3例AML1/ETO阳性,确诊为M2;1 例PML/RARa阳性,确诊为M3;2 例PML/RARa及AML1/ETO均为阴性,1 例免疫表型为CD13+、CD33+、CD34+、CD19-,最后诊断为M2,另1 例免疫表型为CD13+、CD33+、CD34-、CD19-,最后诊断为M3。2例行FISH检测的患者AML1/ETO融和基因均为阳性。结论:对形态学无法鉴别M2、M3 的AML进一步进行细胞遗传学、分子生物学及免疫学检测,可提高确诊率,并为治疗提供可靠的依据。

96例初诊急性白血病MICM分型的诊断分析

目的探讨急性白血病FAB分型和MICM分型的吻合性。方法对96例初诊急性白血病骨髓细胞形态及组织化学染色分析作FAB分型诊断;短期培养法与直接法G显带染色体组型分析。结果显示FAB分型的62例急性髓系白血病(AML)中,免疫分型初诊单纯型AML 45例,变异型AML17例;27例急性淋巴细胞白血病(ALL)中,免疫分型单纯型ALL 13例(B型76.9%,T型23.1%),变异型ALL 14例;双表型6例(TB双表型16.7%,B混合型5.0%,T混合型33.3%);未分化型2例。应用24 h培养G显带染色体组型分析,核型异常检出率61.4%,其中结构异常37例(38.5%),数量异常22例(22.9%)。RT-PCR检测43种常见融合基因,有42例(59.4%)检测到克隆性染色体异常。结论骨髓细胞形态学分析是急性白血病确诊的基础,联合应用免疫学、细胞遗传学及分子生物学可提高诊断的正确性与精确性。

白血病MICM分型的临床和实验研究

从形态学、免疫学、细胞遗传学及分子生物学特性 (MICM )探讨白血病与临床疗效的关系 .用骨髓细胞形态及组织化学染色分析作FAB分型诊断 ;流式细胞术 (FCM)单克隆抗体直接免疫标记技术检测白血病细胞分化抗原 .短期培养法与直接法G显带染色体组型分析 .双色荧光原位杂交技术检测bcr/abl融合基因 .结果 :共检测出异常抗原表达急性白血病 7例 . 47例FAB分型的急性髓细胞性白血病 (AML)中 5例伴有淋系相关抗原表达 . 15例FAB分型的急性淋巴细胞性白血病 (ALL)中 2例伴有髓系相关抗原表达 ,2例ALL呈T ,B相关抗原混合表达 .急性白血病中检出 46 ,XY ,t (8;2 1)等染色体畸变和bcr/abl融合基因 . 2 0例慢性髓细胞性白血病 (CML)中Ph染色体阳性 16例 ,7例伴有复杂染色体核型变异 ,5例检出bcr/abl融合基因 ,Ph染色体阴性的CML中 ,1例检测出bcr/abl融合基因 ,3例为复杂染色体核型变异 .伴有异常抗原表达的急性白血病化疗一疗程完全缓解 (CR)率和二疗程总CR率均低于呈单系相关抗原表达的急性白血病 (P <0 0 5 ) ,伴复杂核型变异的CML急变时间短于Ph阳性的CML (P <0 0 5 ) .结论 :白血病的MICM分型与临床疗效密切相关 .

急性白血病MICM分型诊断

由于急性白血病(AL)的白血病细胞起源、分化和生物学行为不同,构成白血病的高度异质性.因此对AL作全面、正确分型诊断是临床准确、及时治疗的前提. AL分型诊断基本经历3个阶段:法国、美国、英国协作组(FAB)1976年单纯以形态学(M)为依据,制定了AL的FAB分型法.1986年该协作组提出了MIC分型法,即形态学(M)、免疫学(I)、细胞遗传学(C),该分型法以形态学为基础,以免疫学和细胞遗传学作补充,相互结合,使分型更趋精确.随着分子遗传学和分子生物学(M)研究的不断拓宽,显示染色体核型变化与基因异常密切相关,并在AL发病机制的研究及新型治疗手段(靶向疗法)等方面呈现令人瞩目的前景.国际血液学及血液病理学专家于2001年3月在里昂会议上公布了造血和淋巴组织肿瘤的WHO分类法.该分类法综合应用了MICM分型技术,力求反映疾病的本质,成为国际上一种新的分型诊断标准.

骨髓MICM分型在儿童EBV+NK/T细胞淋巴增生性疾病中的临床意义

目的探讨骨髓MICM分型在EBV+NK/T细胞淋巴增生性疾病的临床意义探讨。方法收集5例曾于外院诊断为EBV相关噬血细胞综合征、慢性活动性EBV感染的病例,回顾患儿的临床资料、实验室、血清学及骨髓MICM分型及随访结果,修正诊断为恶性淋巴瘤(白血病)及EBV+NK/T细胞淋巴增生性疾病。对应用MICM分型在EBV+NK/T细胞淋巴增生性疾病的诊断中的应用做初步总结。结果 5例中有3例明确诊断为淋巴造血系统恶性疾病,而不是停留在噬血细胞综合征的诊断。结论 EBV检测及MICM分型有助于EBV+NK/T细胞淋巴增生性疾病的诊断。对于EBV感染淋巴增生性疾病,骨髓MICM分型具有很重要的诊断意义。

40例儿童T淋巴细胞白血病MICM分型及其治疗与预后分析

目的 小儿T淋巴细胞白血病MICM分型与治疗及预后关系。方法 分别采用活细胞间接荧光标记、培养法、套式逆转录聚合酶链反应等方法检测免疫分型、染色体及融合基因等。结果 临床表现与形态学无明显特别,但染色体克隆性异常与异位种类多,无TEL-AML阳性者,81.8％有PCR阳性,总缓解率92.5％,治疗CR中24％复发,1例t(4:11)易位者CCR近三年。结论 TCR_δ为儿童T系急淋的克隆性标志。儿童T系急淋缓解率高,但复发率亦高。其治疗效果与预后是与多因素有关的。

71例急性早幼粒细胞白血病的MICM分型研究

本文对７１例形态学（Ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ）诊断为急性早幼粒细胞白血病（ＡＰＬ）的初发患者骨髓标本同时进行了免疫学（Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ）、细胞遗传学（Ｃｙｔｏｇｅｎｅｔｉｃｓ）和分子生物学（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒｂｉｏｌｏｇｙ）（简称ＭＩＣＭ）的分型研究。典型的ＡＰＬ免疫学粒细胞抗体中ＣＤ３３、ＣＤ１３有很高的表达；染色体核型为ｔ（１５；１７）（ｑ２２；ｑ１１～２１）；ＲＴ／ＰＣＲ检测可见ＰＭＬ／ＲＡＲα融合基因。这种ＡＰＬ占本组病例的９５．８％。另二例有其他的染色体易位和基因的异常。提示ＡＰＬ是不均一性疾病。

MICM分型在急性早幼粒细胞白血病诊断中的应用

目的探讨MICM分型在急性早幼粒细胞白血病(APL,M3)诊断中的价值。方法形态学采用Wright染色,细胞化学过氧化物酶(POX)、糖原染色(PAS)、非特异性酯酶加氟化钠抑制试验(NSE+NaF)、特异性酯酶(CE)染色按常规方法;应用免疫酶标记技术和流式细胞术进行免疫学分型;用24h短期培养法G带方法进行染色核型分析;用RT-PCR检测PML/RARa融合基因。结果 61例APL中粗颗粒型17例、细颗粒型12例、混合颗粒型30例、变异型2例,POX、NSE、NSE+NaF、PAS、CE阳性率分别为99.7%、82.4%、71%、97%、99.6%;33例免疫学分型:CD13 90.8%、CD14 91.8%、CD33 96.6%、CD68 86%、MPO96.6%、HLA-DR 28.7%、CD19 15%、CD10 12%、CD3不表达;31例染色体分析中21例具有t(15;17),其中1例还具有额外累及17号染色体异常,6例正常核型,4例培养无分裂象;24例APL中17例PML/RARa融合基因转录本阳性,4例阴性,3例失败。结论 MICM分型使APL的诊断更准确,便于临床更好地选择治疗方案和判断预后。

经人工显微镜、MICM分型技术检查确诊的6例APL患者血细胞分析仪异常散点图特点

目的对6例患者血细胞分析仪分析显示的异常散点图作分析,总结这些散点图的特点,为散点图异常的早幼粒细胞白血病(APL)患者提供诊断信息。方法对人工显微镜、MICM分型技术检查确诊的6例APL患者出现的异常散点图信息进行回顾性分析。结果6例患者血细胞分析仪散点图均提示中性粒细胞区域向上延伸至幼稚细胞(IG)区域且有IG present、Left shift?报警信息,人工显微镜复检血标本中含有10%~76%的早幼粒细胞,MICM分型技术确诊为APL。结论APL患者血细胞分析仪异常的散点图显示中性粒细胞区域向上延伸至幼稚粒细胞(IG)区域,且有IG present、Left shift?报警信息。

儿童急性巨核细胞白血病MICM分型诊断

目的分析2例急性巨核细胞白血病(AMKL)患儿的诊断过程,探讨儿童AMKL的MICM分型诊断方法。方法细胞形态学按急性白血病FAB标准诊断分型;免疫表型检测应用流式细胞仪;细胞遗传学检测采用G显带技术分析核型;白血病融合基因采用多重巢式RT-PCR方法。结果 2例AMKL患儿均为男性,婴幼儿期发病,以出血、发热和贫血为主要表现,血小板和血红蛋白减少,骨髓原始巨核细胞异常增生超过30%;免疫分型表达CD41a、CD42b、CD61;复杂染色体核型;1例融合基因阴性,1例EVI1融合基因阳性。结论儿童AMKL较为少见,完善相关检查明确MICM分型诊断,有利于治疗及改善预后。

急性淋巴细胞白血病MICM分型分析

目的探讨急性淋巴细胞白血病(ALL)患者的骨髓细胞形态学(M)、细胞免疫学(I)、细胞遗传学(C)和分子生物学(M),即MICM的关系及其临床意义。方法采用细胞形态学检查、染色体R带核型分析、流式细胞仪细胞免疫表型检测和套式逆转录酶链反应(RT-PCR)检测bcr/abl融合基因等方法。结果以FAB分型为基础的形态学诊断L1型ALL占25.0%,L2型ALL占71.88%,L3型ALL占3.12%;免疫表型检测出B-ALL 25例(78.13%),T-ALL 3例(9.38%),还有4例患者同时表达髓系和B系,为急性杂合性白血病(HAL),占12.49%;染色体异常患者中,以t(9;22)(q34;q11)频率最高(87.50%)。bcr/abl融合基因检测,有9例(28.13%)阳性。结论在形态学基础上结合免疫表型、细胞遗传学特征及融合基因表达可以对ALL进行准确的分型,对治疗方案的选择及预后的判断均具有临床价值。

1例急性粒单核细胞白血病M4C的MICM分型

目的报道1例急性粒单核细胞白血病M4C的MICM分型,以提高对M4C的认识。方法回顾性分析我院收治的1例M4C的病历资料,并对其进行骨髓细胞形态学、细胞化学染色、骨髓活检、免疫表型、染色体核型、融合基因、二代测序等检查分析。结果患者骨髓细胞形态示:骨髓增生明显活跃,粒单核细胞占85.6%。细胞化学染色示:过氧化物酶(POX)染色部分弱阳性;特异性酯酶(AS-DCE)染色部分阳性;非特异性酯酶(α-NBE)染色部分阳性,且被氟化钠抑制;非特异性酯酶(AS-DAE)染色部分阳性,且部分被氟化钠抑制。骨髓活检示:骨髓增生极活跃,幼稚细胞弥漫性增生。免疫表型结果示:异常细胞群表达CD11B、CD64、CD56、cMPO、CD33、CD41、CD61、CD38和CD58,不表达CD13、CD34、CD117、CD7、CD123、HLA-DR、CD10、CD19、CD20、CD2、CD14、CD235、CD15、CD303、CD304、CD25、cCD79a、cCD3、cCD22、CD1a和TDT。染色体核型分析显示见克隆性异常t(9;11)(p22;q23),+mar。白血病43种融合基因筛查检出MLLT3-KMT2A融合基因阳性。二代测序检出NRAS、TET2基因突变阳性。诊断为AML(急性粒单核细胞白血病)M4C伴t(9;11)(p22;q23);MLLT3-KMT2A。结论 M4C既具有粒细胞系又具有单核细胞系的特征,细胞形态学表现复杂,其诊断必需结合MICM分型综合判断。

80例青少年急性淋巴细胞白血病MICM分型与临床预后分析

目的 探讨青少年急性淋巴细胞白血病 (ALL)的MICM分型特征及影响疗效和生存的因素。方法 对 1998年 1月～ 2 0 0 2年 12月收治的 80例 13～ 18岁初治青少年ALL的MICM分型、临床特征及治疗转归进行回顾性研究 ,应用Kaplan Meier法进行生存曲线预算、COX回归模型进行多因素预后分析。结果 80例青少年ALL中 ,B ALL与T ALL各占 6 9.12 %和 2 6 .4 7% ;Ph染色体阳性ALL(Ph+ ALL)占 18.37% (49例中有 9例 ) ;超二倍体核型为 4 .0 8% ;初诊时外周血白细胞计数 >5 0× 10 9/L者占 2 7.94 %。经VDP(L)或CODP(L)治疗 4周完全缓解 (CR)率达 91.0 3%。中位随访2 4个月 ,接受化疗 (41例 )和进行异基因造血干细胞移植 (14例 )患者的 3年预期无病生存 (DFS)率分别为 (32 .5 5± 16 .5 0 ) %和 (6 9.5 8± 8.72 ) % ,差异有显著性 (P <0 .0 5 )。COX多因素预后分析显示 ,外周血白细胞计数 >5 0× 10 9/L和Ph染色体阳性是影响本组患者长期生存的危险因素。结论 MICM分型对青少年ALL的预后评估和个体化治疗具有重要意义。

55例急性早幼粒细胞白血病形态学、细胞免疫学、细胞遗传学及分子生物学(MICM)分型的回顾性分析

为了解在已经确诊的急性早幼粒细胞白血病 (APL)患者中骨髓细胞形态学 (M )、细胞免疫学 (I)、细胞遗传学 (C)和分子生物学 (M) 4者即MICM的关系及对临床诊断的指导意义 ,对 5 5例APL患者的MICM分型检测结果进行了回顾性总结分析。结果显示 ,以FAB分型为基础的形态学确诊率可达 96 4 % ;免疫表型检测以CD33和CD13阳性共表达率为最高 ,达 96 4 % ;APL特征性染色体异常检出率为 87.3% ,其中核型为t( 15 ;17) ( q2 2 ;q2 1) 10 0 %易位者 (单纯型 )占 75 % ,其它可累及的染色体有 1,8,9,11,12 ,2 1号 ;PML/RARα基因检测阳性率达96 4 %。但MICM联合检测用于APL诊断的准确率可达 10 0 %。结论 :骨髓细胞形态学观察仍然是APL确诊的基础 ,MICM联合应用可显著提高APL的确诊率 ,减少误诊率 ;MICM联合检测 ,可能为发现APL新的亚型提供线索。

Ph染色体阳性和阴性青少年急性淋巴细胞白血病MICM分型与临床预后分析比较

目的探讨Ph染色体阳性青少年急性淋巴细胞白血病(Ph+ALL)NICM分型对临床治疗和预后的指导意义。方法采用KaplanMeier法进行生存分析,同时采用COS回归模型进行多因素预后分析。结果Ph+ALL占青少年ALL的18.37%(9/49)。与Ph-ALL患者相比,Ph+ALL患者白细胞计数高,同时伴有髓系抗原表达者明显增多,完全缓解率低,第一次缓解中位时间长。Ph+ALL的复发率高于Ph-ALL,3年预期DFS率低于Ph-ALL。结论Ph+ALL是一种预后不良的细胞遗伟学亚型,具有独特的生物学、临床和预后特征,治疗上应用别与Ph-ALL。

19例初发多发性骨髓瘤MICM分型分析

目的探讨多发性骨髓瘤(MM)患者MICM分型的特征及应用价值。方法对19例初发多发性骨髓瘤患者的MICM进行回顾性分析。结果骨髓形态学显示,幼稚+成熟浆细胞比例为2.5%~75.5%;多参数流式分析异常浆细胞比例为1.4%~32.8%。抗原阳性表达比例分别为CD138 100%,CD38 100%,CD56 63.1%,CD117 42.1%,CD130%,CD33 26.3%,CD20 5.2%,CD22 0%,CD10 0%,CD19 0%。免疫球蛋白胞浆限制性表达,其中Cκ9例,Cλ10例。免疫固定电泳显示Ig G+κ型4例,Ig A+κ型2例,Ig G+λ型4例,Ig A+λ型1例,。Ig基因重排分析IGH FR1-JH重排阳性者8例,IGH FR2-JH重排阳性者11例,IGH DH-JH重排阳性者2例,IGK Vk-Jk重排阳性者11例,IGK Vk-Kde+intron-Kde重排阳性者8例。结论 MICM分型,对患者治疗方案选择及预后的判断均具有临床价值。