MIER3在结直肠癌中的表达及其相关蛋白的生物信息学分析

目的构建基因真核表达载体并探讨MIER3对结直肠癌细胞生物学特性的影响,应用生物信息学方法对MIER3及其相互作用蛋白进行预测分析。方法应用Real-time PCR及Western blot方法检测MIER3在8例结肠癌及相应癌旁正常组织中mRNA和蛋白表达水平的差异表达;通过构建真核表达载体pcDNA3-MIER3,应用CCK8增殖实验、Transwell侵袭实验检测过表达MIER3对结直肠癌细胞株生物学特性的影响,进一步应用生物信息学方法对MIER3及其相互作用蛋白进行预测和分析。结果 MIER3在8例结肠癌组织中其mRNA及蛋白水平的表达明显低于相应正常癌旁组织;酶切及测序结果显示成功克隆构建pcDNA3-MIER3真核表达载体;CCK8增殖实验、Transwell侵袭实验结果显示过表达MIER3可明显抑制结直肠癌细胞株的增殖及侵袭能力;应用模式生物果蝇相互作用蛋白数据库DIP和基于保守的蛋白相互作用分析方法,预测NAT9可能是MIER3的潜在相互作用蛋白,提示MIER3可能与肿瘤的易感性相关。结论 MIER3与结直肠癌增殖、侵袭密切相关,为进一步深入阐明MIER3在结直肠癌发生发展中的作用奠定基础。