pNEgr-mIL-12真核表达载体的体外和体内生物学活性检测

肿瘤的基因 放射治疗是近年来发展起来的新技术 .分别于体外和体内检测含辐射敏感启动子和mIL 12基因的真核表达载体 (pNEgr mIL 12 )的生物学活性 .体外经酶联免疫吸附试验 (enzymelinkedimmunosorbentassay ,ELISA)法检测转染 pNEgr mIL 12重组质粒的COS 7和B16细胞可经辐射诱导mIL 12p70表达 ,于 1 5～ 2 0Gy照射后表达增高最明显 ,COS 7细胞于照后4h达峰值 ,B16细胞的表达水平随照射后时间延长而逐渐增高 ;pNEgr mIL 12重组质粒联合电离辐射治疗小鼠移植肿瘤 ,单次或多次注射pNEgr mIL 12重组质粒 ,联合局部照射能够抑制小鼠移植肿瘤生长 ,与单纯照射组比较肿瘤生长速度减慢 ,瘤重降低 ,尤以多次给予质粒治疗组效果明显 .

mIL-12基因对结肠癌细胞凋亡的诱导作用

目的探讨白细胞介素12(IL12)基因的抗结肠癌作用机制。方法鼠结肠癌动物模型建立后,待瘤体达近0.5cm时,每只瘤内注射携mIL12基因逆转录病毒载体的包装细胞(PA317mIL12)1×107,于治疗后6h处死并取肿瘤组织行透射电镜、原位末端标记法(TUNEL)及流式细胞仪(FCM)检测。FCM除分析肿瘤DNA含量、观察凋亡峰外,还同时进行AnnexinⅤ检测。结果PA317mIL12瘤内注射后6h,电镜下即可见典型的“凋亡小体”。TUNEL检测也同样显示有呈棕色染色的凋亡阳性细胞出现,癌细胞凋亡指数达37.6%。FCM检测不仅显示了清晰的凋亡峰,且AnnexinⅤ检测也为阳性。结论PA317mIL12介导结肠癌细胞(C26)凋亡可能是IL12基因抗肿瘤作用的重要机制之一。

mIL-12质粒对哮喘模型抑制性细胞因子的影响

目的研究小鼠白介素12(mIL-12)基因表达质粒对小鼠支气管哮喘模型抑制性细胞因子TGF-β、IL-10以及Th2相关细胞因子IL-4和IL-5等的影响,并探讨其可能机制。方法卵白蛋白(OVA)致敏复制小鼠哮喘模型。BALB/c小鼠48只,随机分为8组,每组6只。8组小鼠分别是哮喘模型组、正常对照组、模型对照组、阳性药对照组、空质粒预防对照组、空质粒治疗对照组、mIL-12质粒预防组和mIL-12质粒治疗组。末次雾化处理24 h后,测定所有小鼠支气管-肺泡灌洗液(BALF)中TGF-β、IL-10、IL-4、IL-5水平以及血清中TGF-β、IL-10水平。结果①哮喘模型组BALF中的TGF-β、IL-10、IL-4和IL-5等各细胞因子水平明显高于正常对照组和模型对照组(P<0.05)。而mIL-12质粒预防组和mIL-12质粒治疗组BALF中的TGF-β、IL-10、IL-4和IL-5等各细胞因子水平则明显低于哮喘模型组(P<0.05)。②血清中的TGF-β和IL-10水平各组之间差异无统计学意义。结论 TGF-β、IL-10、IL-4、IL-5等各细胞因子水平与哮喘的发病机制密切相关,推测mIL-12质粒可以抑制小鼠哮喘的发展,其对哮喘的治疗作用可能部分是通过抑制性细胞因子而发挥的。

微囊化转mIL-12基因细胞介导荷瘤小鼠T_(H1)T_(H2)的漂移

目的 观察微囊化mIL 1 2基因修饰的 (中国仓鼠卵巢 )CHO细胞皮下移植对荷瘤小鼠TH1 TH2 类细胞因子的影响 ,进一步了解外源性IL 1 2对TH1 TH2 平衡的调节作用 ,同时探讨微囊化基因工程细胞移植治疗恶性肿瘤的可行性。方法 将mIL 1 2基因转染到正常细胞CHO ,然后进行微囊化 ,移植到荷瘤小鼠的皮下。 2 0d后 ,测定小鼠血清TH1 和TH2 类细胞因子IFN γ、IL 2、IL 1 2和IL 4、IL 1 0的水平。结果 经微囊化mIL 1 2基因修饰的CHO细胞皮下移植干预治疗后 ,小鼠血清TH1 细胞因子IFN γ、IL 2、IL 1 2水平明显升高 (P <0 .0 5) ,而TH2 类细胞因子IL 4、IL 1 0则明显降低 (P <0 .0 5)。结论 外源性mIL 1 2促进荷瘤小鼠TH1 细胞的分化 ,使TH1 TH2 向着TH1 方向漂移 ;微囊化基因工程细胞的移植 ,有望替代基因工程药物 。

mIL-12重组逆转录病毒载体的构建及包装细胞系的建立

目的:构建mIL-12重组逆转录病毒载体。方法:将mIL-12 DNA克隆到载体pLEGFP,用该重组质粒转染PA317包装细胞获得重组逆转录病毒。结果:重组质粒pLEGFP-mIL12酶切及PCR产物在2 290 bp区域见强荧光条带与mIL-12基因大小相符;转染PA317细胞后的上清感染NIH3T3细胞后,经共聚焦显微镜能观察到融合蛋白的表达。结论:包装细胞上清中有含mIL-12 DNA的重组逆转录病毒,mIL-12重组逆转录病毒可感染NIH3T3细胞并在细胞中进行有效的复制。

腺病毒介导的mIL-12基因对裸鼠肝癌生长的抑制作用

目的 研究腺病毒介导的mIL - 12基因 (AdvmIL - 12 )对裸鼠肝癌生长的抑制作用。方法 用Ad vmIL - 12转染小鼠肝癌H2 2细胞作为实验组 ,以腺病毒转染的H2 2细胞和未转染的H2 2细胞为对照组。将上述细胞分别接种到裸鼠右侧前肢皮下 ,第 11天断头处死裸鼠 ,采血 ,取出瘤组织称重。用ELISA法检测体外细胞培养上清液、接种前后裸鼠血清、肝癌组织中IL - 12表达量。结果 实验组肿瘤平均重量为 (0 87± 0 16 )g ,空白对照组和载体对照组分别为 (1 6 5± 0 39)g和 (1 88± 0 14 )g ,实验组的肝癌平均重量小于对照组 (P <0 0 5 )。AdvmIL- 12 /H2 2细胞上清液中mIL - 12的含量为 (89 71± 2 2 0 5 )ng/ml,Adv/H2 2 ,H2 2细胞上清液中未检测到mIL - 12。接种前各组裸鼠血清中均未检测到mIL - 12的表达。接种后实验组裸鼠血清中仅有少量mIL - 12表达 ,对照组裸鼠血清中未检测到mIL - 12的表达。实验组肝癌组织中mIL - 12的表达量高于对照组 (P <0 0 1) ,对照组之间的mIL - 12平均表达量差异无显著性 (P >0 0 5 )。结论 转染AdvmIL - 12的小鼠肝癌H2 2细胞在裸鼠肝癌组织局部高表达mIL - 12 ,并能抑制裸鼠肝癌的生长。

增殖型腺病毒载体介导mIL-12基因对胃癌细胞的杀伤作用(英文)

目的 :观察增殖型腺病毒载体介导的 m IL - 1 2基因对胃癌细胞的杀伤作用。 方法 :利用携带 m IL - 1 2基因的增殖型腺病毒转染胃癌细胞株 SGC- 790 1 ,通过病毒增殖实验、细胞病理效应、酶链免疫反应等分别观察病毒复制能力、病毒对胃癌细胞的杀伤作用及 m IL - 1 2表达水平。结果 :携带 m IL - 1 2基因的增殖型腺病毒转染胃癌细胞株 SGC- 790 1具有肿瘤增殖型腺病毒 ONYX- 0 1 5的相似作用 ,可在肿瘤细胞内复制、增殖并杀死肿瘤细胞 ,而并不能在正常细胞内复制及增殖。该病毒在肿瘤细胞内的增殖能力是传统载体的近千倍。该载体携带的 m IL - 1 2基因的表达量明显高于传统基因治疗的腺病毒载体体系 ,是传统基因治疗表达量的百倍。 结论 :CNHK2 0 0 - m IL - 1 2能在胃癌细胞中增殖并杀死胃癌细胞 ,并提高目的基因的表达水平 。

mIL-12基因转染促进小鼠树突状细胞混合淋巴细胞反应

目的 观察mIL 12基因转染的小鼠树突状细胞(DC)功能的改变。方法 分离小鼠骨髓单个核细胞与rmGM CSF和rmIL 4培养 1周 ,对培养的细胞进行形态学观察 ,FACS检测细胞表面DEC2 0 5、CD86表达。以mIL 12重组腺病毒转染培养的DC ,ELISA测定培养上清中mIL 12的水平 ,混合淋巴细胞反应检测转染细胞的功能。结果 培养 1周后 ,得到具有典型DC形态的细胞 ,以mIL 12重组腺病毒为载体转染DC ,培养上清中可以检测到较高水平的mIL 12 ;与对照组相比转染细胞能明显地刺激混合林巴细胞反应。结论 小鼠骨髓单个核细胞经GM CSF和IL 4培养 1周 ,生成大量DC ,mIL

携带mIL-12基因的增生型腺病毒对小鼠移植胃癌的治疗作用

目的:研究携带mIL-12基因的增生型腺病毒对小鼠移植胃癌的治疗效果及其作用机制,探讨胃癌治疗的新思路及途径. 方法:以E1B55KDa缺失的增生型腺病毒ONYX-015、带有小鼠IL-12(mIL-12)基因的增生型腺病毒CNHK200- mIL-12以及非增生型腺病毒Ad-mIL-12治疗SGC-7901 BALB/C裸鼠及MFC 615小鼠胃癌移植模型,从肿瘤大小及动物生存期等方面评价治疗效果;并检测各治疗组的CD4+和CD8+淋巴细胞水平及NK和CTL细胞的杀伤活性, 探讨其免疫学作用机制. 结果:实验证实增生型腺病毒(ONYX-015,CNHK200- mIL-12)可以有效地杀伤裸鼠体内的SGC-7901胃癌细胞,但是不足以使其完全消退,仅起到延缓生长的作用. 荷瘤615小鼠在注射Ad-mIL-12后部分(3/10)肿瘤消退, 余者(7/10)生长明显减慢,肿瘤无破溃,生存期明显延长; CNHK200-mIL-12治疗组部分肿瘤(4/10)停止生长,1 wk 后开始缩小,10—14 d完全消退,其余小鼠肿瘤(6/10)生长明显减慢,肿瘤无破溃,生存期明显延长.免疫学检测发现各腺病毒治疗组的CD4+和CD8+细胞水平以及NK、CTL细胞的杀伤活性均高于对照组,尤以携带IL-12基因者明显(P<0.001). 结论:以增生型腺病毒为载体携带IL-12基因可大量杀伤肿瘤细胞并与增生型腺病毒协同发挥抗肿瘤活性.

mIL-12基因转染J558肿瘤细胞疫苗的抗瘤实验研究

目的 探讨mIL -12基因转染的肿瘤细胞疫苗的抗肿瘤作用。方法 将鼠源性mIL -12基因转染J5 5 8细胞制备工程瘤细胞后免疫 2 0只BALB/c小鼠 ,另选 2 0只小鼠为对照组 ,用ELISA法测定J5 5 8/mIL -12瘤细胞培养上清液及对照组中mIL -12水平。经工程瘤细胞免疫的小鼠淋巴结细胞与J5 5 8肿瘤细胞共同培养后用ELLSA法测定其上清液中mIFN -γ水平。用J5 5 8瘤细胞攻击免疫小鼠及对照组小鼠以观察其存活情况。结果 J5 5 8/mIL -12瘤细胞培养上清液中mIL -12水平显著高于对照组 (895 2± 2 8 4vs 6 64± 1 5 3pg/ml,P =0 0 0 0 ) ;免疫小鼠淋巴结细胞与肿瘤细胞共同培养后上清液mIFN -γ水平显著高于对照组 (997 61±116 3 6vs 6 3 6± 1 2 7pg/ml,P =0 0 0 0 ) ;CTL细胞毒实验证实免疫小鼠CTL杀伤J5 5 8肿瘤细胞为特异性杀伤 ;特异性肿瘤保护试验显示该型瘤苗具有良好的抗瘤作用。结论 mIL -12基因转染的J5 5 8肿瘤细胞疫苗具有良好的抗瘤作用。

鼠白细胞介素12(mIL-12)在昆虫细胞中的表达

人IL-12的作用具有种属特异性,无法对鼠淋巴细胞起作用。因此,为了在啮齿动物模型上研究该细胞因子的免疫学效应,并评价其临床应用前景,就很有必要获得重组鼠IL-12(mIL-12)。为此,我们首先构建了两个表达载体pVL1393-mp40和pVL1393-mp35,并分别与线性化多角体病毒基因组DNA共转染昆虫细胞株Sf9,用目视法筛选出重组病毒AcNPV-mp40和AcNPV-mp35,然后共感染昆虫细胞,使mp40和mp35在昆虫细胞中共表达。经实时BIA和Northern blot分析,表明重组mIL-12在昆虫细胞中表达成功。经还原条件下的SDS-PAGE分析,重组mp40和mp35的分子量分别为40KDa和22KDa。非还原条件下的Western blot结果显示,重组mIL-12的表观分子量为80KDa。用抗体捕获法在条件培液中测到了重组产物的生物活性,经与参照标准相比照,重组mIL-12的表达量约为10-15μg/10~6细胞。

腺病毒载体介导mIL-12基因治疗联合放射治疗小鼠肝癌的研究

目的 观察腺病毒介导白介素 12基因治疗联合放射治疗协同抗小鼠肝癌作用。方法 荷肝癌动物模型 ,肿瘤局部γ射线照射后 ,瘤内注射AdmIL 12腺病毒。取组织标本进行ELISA及CTL活性检测、免疫组化染色等分析。结果 联合治疗小鼠肿瘤生长受到抑制 ,体积明显缩小 ,并可使 5 0 %的小鼠肿瘤完全消退 ,疗效显著优于单纯照射组和瘤内注射AdmIL 12及其他对照组(P <0 0 1)。而单纯瘤内注射AdmIL 12组的疗效并不优于单纯照射组 (P >0 .0 5 )。联合治疗组小鼠血清和脾细胞的培养上清中可见IFN γ水平的显著提高 ,并诱导产生特异性的CTL活性。免疫组化结果显示 ,联合治疗组肿瘤组织中可见有大量CD4+ 、CD8+ 阳性淋巴细胞的浸润。结论 腺病毒介导白介素 12基因治疗与放射治疗的联合具有协同抗肿瘤作用 ,并诱导产生特异性抗肿瘤免疫反应。

含mIL-12基因多顺反子逆转录病毒载体构建及其在肝癌细胞中的表达

目的 构建含小鼠白细胞介素 12双亚基及新霉素磷酸转移酶基因多顺反子逆转录病毒载体 ,并观察其在小鼠肝癌细胞中的表达。方法 利用脑心肌炎病毒 (EMCV)及脊髓灰质炎 (Polio)病毒内核糖体进入位点 (IRES) ,连接mIL 12p40及p35cDNAs和筛选基因新霉素磷酸转移酶 (NeoR) ,克隆至逆转录病毒载体pGCEN中 ,使三个基因同时受逆转录病毒载体 5′端LTR启动子控制 ,转录至同一mRNA转录本上 ,通过不同机制翻译成蛋白质 ,从而构建成多顺反子逆转录病毒载体 ,即pGCEN/mIL 12。在LipofectAMINE介导下将pGCEN/mIL 12转染包装细胞PA317,G418筛选 ,直至出现阳性克隆 ,挑取抗性克隆 ,扩大培养 ,收集上清 ,用小鼠成纤维细胞NIH3T3测定病毒滴度。然后用重组转录病毒感染小鼠肝癌细胞MM45T .Li,G418筛选 ,直至出现抗性克隆 ,扩大培养 ,对阳性克隆进行鉴定。结果 由PA317包装细胞产生的重组逆转录病毒的滴度为 5× 10 5CFU/ml,将其感染小鼠肝癌细胞MM45T .Li,后经PCR及Southernblot证明 ,外源基因已整合至小鼠肝癌细胞基因组中 ,RT PCR及Northernblot分析外源基因在mRNA水平上的表达 ,并证实mIL 12p40及p35cDNA和NeoR基因转录在同一mRNA上。ELISA显示mIL 12的表达量 48h为 10ng/ 10 6细胞。并且M45 /mIL

HBx和mIL-12双基因重组腺病毒的构建

目的构建携带双基因HBx和mIL-12的重组腺病毒Ad-HBx-mIL-12。方法采用酶切、连接的方法分别将基因HBx和mIL-12连接到穿梭质粒载体pAdenoVator-CMV5。将构建正确的穿梭质粒pAdV-HBx-mIL-12经EcoRⅠ酶切线性化后,转化于含腺病毒骨架质粒pAdenoVatorΔE1/E3的BJ5183感受态细菌,实现细菌内同源重组。将鉴定正确的重组腺病毒质粒pAd-HBx-mIL-12经PacⅠ酶切线性化后,以脂质体法转染至293细胞,包装并扩增获得携带双基因HBx和mIL-12的重组腺病毒Ad-HBx-mIL-12。结果经鉴定携带HBx和mIL-12双基因的重组腺病毒构建成功,并可在293细胞中有效表达。结论成功构建了携带双基因HBx和mIL-12的重组腺病毒Ad-HBx-mIL-12,为探讨其联合抗肿瘤机制及后续基因治疗奠定了基础。

IL-2和IL-12联合基因治疗小鼠肝癌的实验研究

目的 探讨瘤内注射共表达mIL 12和hIL 2质粒DNA抗小鼠肝癌皮下移植瘤的作用。方法 构建pDC5 11hIL2 mIL12、pDC5 11mIL 12、pDC5 11hIL 2真核表达质粒载体 ;ELISA方法检测各组质粒在真核细胞的表达 ;小鼠肝癌H2 2皮下移植瘤瘤内注射各组质粒DNA后 ,检测不同时间血清中细胞因子浓度 ;观察各组小鼠存活时间 ,肿瘤大小变化 ;并检测各组小鼠脾脏细胞毒T淋巴细胞 (cytotoxicTlymphocyte ,CTL)活性。对各治疗组在质粒DNA注射后一月进行瘤体组织学观察。结果 酶切鉴定各组质粒载体 ,均示构建成功 ,并能在真核细胞内高效表达相应细胞因子。瘤内注射各组质粒载体后 ,pDChIL2 mIL12组在不同时间表达的hIL2和mIL12分别与pDC5 11hIL2组 (F =71 11,P <0 0 1)、pDC5 11mIL12组 (F =3 0 70 ,P <0 0 5 )比较有显著性差异。mIL 12基因和hIL 2基因联合治疗组 ,肿瘤生长明显受抑制 ,疗效显著优于各单独治疗组和对照组 (P <0 0 5 ) ,并且小鼠脾细胞CTL杀伤活性增强。双基因联合治疗组 ,病灶内肿瘤细胞坏死明显 ,炎性细胞广泛浸润。结论 IL 12、IL 2基因治疗可抑制小鼠肝癌H2 2皮下移植瘤的生长 ,提高机体的抗肿瘤免疫应答 ,两者联合运用可产生协同效应。

鼠白细胞介素-12双亚基共表达质粒的构建及在体内外的表达

目的 :构建双亚基共表达鼠白细胞介素 - 12 (m IL- 12 )真核表达质粒 ,并观察其在体内外的表达。方法 :将m IL - 12 p35和 p4 0全长编码 c DNA构建在 pc DN A 3.1载体上 ,然后把 p35表达单元 (CMV- p35 - BGH PA)插入pc DNA 3.1/ p4 0载体 ,使两个目的基因均受各自的启动子 CMV控制 ,构建成 m IL - 12双亚基共表达质粒 p Cm IL -12 ,并进行体内外表达。结果 :p Cm IL - 12在体外转染 COS- 7细胞后 ,经 EL ISA证实有 m IL- 12表达 ,其表达上清能在体外明显增强小鼠 NK细胞活性。小鼠皮内注射 p Cm IL - 12亦能增强小鼠 NK细胞活性。结论 :所构建的质粒在体内外均能表达有生物学活性的 m IL-

小鼠白介素12质粒对哮喘模型CD4^+CD25^+T细胞的影响

目的研究小鼠白介素12(mIL-12)基因表达质粒对小鼠支气管哮喘模型CD4+CD25+T细胞的影响,并探讨其可能机制。方法卵白蛋白(OVA)致敏建立小鼠哮喘模型。BALB/c小鼠48只,随机分为8组,即哮喘模型组、正常对照组、模型对照组、阳性药对照组、空质粒预防对照组、空质粒治疗对照组、mIL-12质粒预防组和mIL-12质粒治疗组。末次雾化攻击24 h后,测定各组小鼠脾脏、外周血中CD4+CD25+T细胞百分比。结果①哮喘模型组脾脏中CD4+CD25+T细胞比例明显高于正常对照组和模型对照组(P<0.05)。②与哮喘模型组相比,mIL-12质粒预防组和mIL-12质粒治疗组脾脏中CD4+CD25+T细胞百分比则明显下降(P<0.05)。③外周血中CD4+CD25+T细胞百分比各组之间无显著性差异。结论 CD4+CD25+T细胞与哮喘的发病机制密切相关,推测肌注mIL-12质粒可以抑制哮喘的发展,从而使该细胞百分比发生改变。

重组腺病毒AdKDR-TK联合IL-12逆转录病毒血管靶向治疗裸鼠皮下人肝癌细胞移植瘤的实验研究

目的探讨重组腺病毒AdKDR-TK联合IL-12逆转录病毒通过血管靶向治疗裸鼠皮下人肝癌细胞移植瘤的疗效及作用机制。方法 SCID小鼠腋部皮下植入1×107(0.2mL)HepG2细胞,同时腹腔注射PBL2×107(0.5mL),当瘤体达0.5cm3时,随机分成4组,分别为更昔洛韦(GCV)组(第I组)、IL-12逆转录病毒组(第Ⅱ组)、重组腺病毒AdKDR-TK组(第Ⅲ组)及重组腺病AdKDR-TK联合IL-12逆转录病毒组(第Ⅳ组)。各治疗组瘤内分别注入重组病毒液或/及重组逆转录病毒液0.1mL,第二天重复注射一次,重组腺病毒治疗在病毒给予24h后分别在腹腔内注射GCV,连续l0d;对照组腹腔内注入GCV。观察各组瘤体生长情况及免疫组化法测定肿瘤微血管密度(MVD)。结果第Ⅳ组经治疗后肿瘤的生长受到明显的抑制,其抑瘤率为62.14%,与第II组及Ⅲ组比较,后两者的抑瘤率分别为18.32%和32.73%(与第IV组比较,两者P<0.01)。肿瘤组织内的MVD,第I组为(40.1±6.7)个/mm2、第II组为(32.2±7.3)个/mm2、第III组为(27.6±7.1)个/mm2、第Ⅳ组为(7.7±4.1)个/mm2,其中第Ⅲ组与第Ⅱ组(P<0.05)、第Ⅳ组与第Ⅱ组(P<0.01)、第Ⅳ组与第Ⅲ组(P<0.01)之问的肿瘤内MVD比较均有统计学差异。结论 IL-12逆转录病毒能够增强重组腙病毒介导以KDR为启动子的胸苷激酶系统的血管靶向性地有效抑制肿瘤的生长。

人IL-12在昆虫细胞中的表达及其体外生物活性的检测

目的：建立表达具有生物活性的人 Ｉ Ｌ１２ 的杆状病毒／昆虫细胞表达系统。方法：将ｐ４０ 和ｐ３５ ｃ Ｄ Ｎ Ａ 一起构建入杆状病毒转移载体ｐ Ａｃ Ｕ Ｗ４２，然后与杆状病毒 Ａｃ Ｕ Ｗ １．ｌａｃ Ｚ Ｄ Ｎ Ａ 共同转染昆虫细胞 Ｓｆ９，使两者产生同源重组；随后利用病毒空斑实验筛选重组的杆状病毒，再由 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ 筛选及鉴定表达 Ｉ Ｌ１２ 的重组病毒，并进行 Ｗｅｓｔｅｒｎ Ｂｌｏｔｔｉｎｇ 和体外生物活性的检测。结果：经病毒空斑试验、 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ 和 Ｗｅｓｔｅｒｎ Ｂｌｏｔｔｉｎｇ 逐步阳性选择的 Ｉ Ｌ１２ 重组杆状病毒，其感染 Ｓｆ９ 细胞的上清与 Ｉ Ｌ１２标准品一样具备刺激正常人外周血 Ｔ 淋巴细胞增生的生物活性。结论：本研究建立了能表达具有体外生物活性的人重组 Ｉ Ｌ１２ 的杆状病毒／昆虫表达系统。

准分子激光屈光性角膜切削术治疗近视眼的远期效果分析

目的 :评价准分子激光屈光性角膜切削术 (PRK)治疗不同程度近视眼的远期疗效。方法 :应用 VISX 2 0 / 2 0型准分子激光机对 2 5 8只不同程度的近视眼进行 PRK治疗 ,对 3～ 5年随访结果进行统计分析 ,按术前近视度分两组 ,A组 - 1.0 0～- 6 .0 0 D(等值球镜 ,下同 ) 116只眼 ,B组 - 6 .2 5～ - 12 .0 0 D 142只眼。 结果 :经 PRK治疗后 ,A组裸眼视力≥ 1.0占86 .2 % ,≥ 0 .5占 97.4% ,剩余屈光度为 (- 0 .36± 0 .40 ) D,95 .7%角膜已完全透明。 B组裸眼视力≥ 1.0占 5 4.9% ,≥ 0 .5占86 .6 % ,剩余屈光度为 (- 0 .6 9± 0 .6 6 ) D,85 .9%角膜已完全透明。 结论 :PRK治疗轻、中度近视安全有效 ,预测性及稳定性好 ;治疗高度及超高度近视在大多数患者可获得满意效果 ,在部分患者预测性及稳定性较差 。