METTL3在同型半胱氨酸诱导小鼠胰岛β细胞自噬中的作用

背景:高同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)血症与胰岛β细胞功能密切相关,但其具体分子机制尚不完全明确。目的:探讨METTL3在Hcy诱导小鼠胰岛β细胞自噬中的作用。方法:取第3,4代小鼠胰岛β细胞进行实验。①细胞模型建立和分组:对照组细胞不加入Hcy,Hcy组细胞加入浓度为100µmol/L Hcy干预48h;②按Lipofectamine^(TM) 2000说明书将过表达质粒Ad-METTL3及si-METTL3转染小鼠胰岛β细胞,设计3种不同干扰片段,PCR验证、筛选出干扰效率最好的干扰片段;③转染后实验分组:对照组、Hcy组、Ad-NC(阴性对照)+Hcy组、Ad-METTL3+Hcy组、si-NC(阴性对照)+Hcy组和si-METTL3+Hcy组;④采用qRT-PCR及Western blot检测细胞中METTL3及细胞自噬相关蛋白LC3Ⅱ/Ⅰ、p62的表达;ELISA法测定胰岛素水平来评价胰岛β细胞胰岛素分泌能力;分别过表达和干扰METTL3后检测细胞自噬相关蛋白及胰岛素水平。结果与结论:①与对照组相比,Hcy组自噬相关蛋白LC3Ⅱ/Ⅰ的表达水平升高(P<0.05),而p62表达明显降低(P<0.05),胰岛素分泌能力明显下降(P<0.05);②与对照组相比,Hcy组中METTL3蛋白及mRNA水平表达均降低(P<0.05);③胰岛β细胞中沉默METTL3后,Hcy进一步上调了细胞中LC3Ⅱ/Ⅰ的表达(P<0.05),而p62表达显著下降(P<0.05),细胞中胰岛素水平增加(P<0.05);过表达METTL3后,Hcy则使LC3Ⅱ/Ⅰ表达显著降低且p62表达则增高(P<0.05);④结论:METTL3参与了Hcy诱导的胰岛β细胞自噬调控,对胰岛素的分泌发挥着调控作用。

链脲佐菌素诱导小鼠B细胞可抑制MIN-6细胞分泌胰岛素并促进胰岛素自身抗体的产生

目的探讨链脲佐菌素(STZ)诱导小鼠后B淋巴细胞对自身免疫性糖尿病发展的作用。方法以低剂量STZ诱导ICR小鼠,建立小鼠自身免疫性糖尿病模型,采用放射免疫法和ELISA分别检测胰岛素和胰岛素自身抗体,判断模型的诱导情况;以CD19磁珠分选STZ诱导的小鼠以及正常小鼠外周血B淋巴细胞,通过流式细胞术检测磁珠分选情况;以PBS处理的MIN-6细胞为空白对照组(A组),以正常小鼠B细胞和MIN-6细胞共培养为B组,以经20μg/m L脂多糖(LPS)预处理的正常小鼠B细胞和MIN-6细胞共培养为C组,以STZ诱导小鼠后的B细胞与MIN-6细胞共培养为D组,通过SYBRGreen染料实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、放射免疫法分别检测处理后的胰岛素mRNA及其蛋白表达情况,并通过ELISA检测胰岛素自身抗体水平以及转化生长因子β(TGF-β)水平。结果与A组相比,STZ诱导组小鼠体质量减少、血糖升高、血清中胰岛素含量降低、胰岛素自身抗体升高;通过免疫磁珠分选,以流式细胞仪检测的结果显示,CD19+B细胞所占比例达到98%;与A组及B相比,C组和D组中MIN-6细胞胰岛素mRNA水平以及共培养上清中胰岛素水平均降低,并且胰岛素自身抗体和TGF-β的表达均增加。结论 STZ诱导的自身免疫性糖尿病小鼠模型的B淋巴细胞可能通过增加胰岛素自身抗体的产生来抑制胰岛MIN-6细胞产生胰岛素。

血清胰岛素样生长因子-1-2胰岛素样生长因子结合蛋白-3白细胞介素-6在急性淋巴细胞性白血病患者中的表达水平及意义

目的研究急性淋巴细胞性白血病(ALL)患者血清相关指标的表达水平,探讨其对ALL诊断治疗的意义。方法将122例ALL患者作为观察组,另选40名健康体检者作为对照组,检测2组血清胰岛素样生长因子-1(IGF-1)、胰岛素样生长因子-2(IGF-2)、胰岛素样生长因子结合蛋白-3(IGFBP-3)以及白细胞介素-6(IL-6)的表达水平。结果观察组患者血清的IGF-1和IGFBP-3水平显著低于对照组(P<0.05),IGF-2和IL-6水平显著高于对照组;随着病情的恶化,观察组血清的IGF-1和IGFBP-3水平显著降低(P<0.05),IGF-2和IL-6水平显著升高(P<0.05);ALL的病情与IGF-2(r=0.51,P<0.05)和IL-6呈正相关(r=0.60,P<0.05),与IGF-1(r=-0.20,P<0.05)和IGFBP-3(r=-0.50,P<0.05)呈负相关。结论与健康人相比,ALL患者血清的IGF-1和IGFBP-3的表达水平较低、IGF-2和IL-6水平较高,通过检测上述指标可以有效的反映ALL及其发病程度。

棕榈酸诱导胰岛素瘤细胞MIN6细胞凋亡

目的探讨蛋白激酶B及其磷酸化在棕榈酸诱导的胰岛素瘤细胞MIN6凋亡中的作用。方法胰岛素瘤细胞MIN6分别在含有不同棕榈酸浓度(0～0.5 mmol/L)的DMEM高糖培养基中孵育,培养基中加或不加PI3K/PKB的阻断剂LY294002;TUNEL法观察凋亡并计数凋亡率;透射电镜观察MIN6细胞超微结构;Western blot检测蛋白激酶B(PKB)及其磷酸化蛋白p-PKB(Ser473)的表达;RT-PCR法检测BAX、BCL-2mRNA的表达。结果MIN6细胞凋亡随着培养基中棕榈酸浓度的增加而增加,LY294002可增强其凋亡程度;棕榈酸抑制MIN6细胞的PKB在473位丝氨酸位点的磷酸化,抑制BCL-2mRNA的表达并促进BAXmRNA的表达。结论棕榈酸可能通过抑制PKB磷酸化的激活而诱导糖尿病时胰岛β细胞的凋亡。

L6细胞胰岛素抵抗的骨骼肌细胞模型

背景:在胰岛素抵抗的细胞模型中,以游离脂肪酸诱导3T3-L1脂肪细胞和高胰岛素诱导的HepG2肝癌细胞最为常见,对分布最为广泛靶组织骨骼肌的胰岛素抵抗模型报道较少。目的:拟使用L6细胞株建立胰岛素抵抗的骨骼肌细胞模型。设计、时间及地点:细胞学体外观察,于2007-06/2008-05在辽宁医学院生物化学与分子生物学教研室完成。材料:L6细胞株由中国协和医科大学细胞中心提供。α-MEM培养基为美国Gibco公司产品。方法:复苏后的L6细胞置于α-MEM培养基中诱导培养14d,以考马斯亮蓝染色观察肌管出现来确定L6成肌细胞株分化完成。将分化后的细胞建立胰岛素抵抗模型,按1×106/孔接种于24孔板内,用含体积分数为0.02胎牛血清的α-MEM培养,以L6细胞贴满24孔板的板底为宜。换液后,向各孔内分别加入含体积分数为0.02牛血清白蛋白的α-MEM无血清培养基饥饿培养5h。设立2组,实验组的板孔内加入含1×10-7mol/L胰岛素的HEPES缓冲液(136mmol/LNaCl,4.7mmol/LKCl,1.25mmol/LMgSO4,1.2mmol/LCaCl2,0.2%牛血清白蛋白,20mmol/LHEPES,pH7.4)孵育1h;对照组的板孔内加入不含胰岛素的HEPES缓冲液孵育1h。弃上清后用HBS缓冲液冲洗,每孔内分别加入含0.1mol/L葡萄糖的HBS缓冲液100μL,孵育10min后取出置于冰板上快速回收上清。主要观察指标:考马斯亮蓝染色观察L6细胞出现肌管结构情况,葡萄糖氧化酶法检测上清中葡萄糖浓度。结果:诱导前L6细胞未见肌性结构出现,诱导分化后L6细胞内出现肌管结构。使用α-MEM无血清培养基饥饿培养1,3h,两组上清中葡萄糖浓度基本相似(P>0.05);使用α-MEM无血清培养基饥饿培养5h后,实验组上清中葡萄糖浓度明显高于对照组(P<0.05)。结论:诱导分化成肌后的L6骨骼肌细胞经α-MEM无血清培养基饥饿培养5h,在胰岛素浓度为1×10-7mol/L的刺激下可形成胰岛素抵抗的骨骼肌细胞模型。

非酒精性脂肪性肝病患者肠道菌群变化与胰岛素抵抗指数、肿瘤坏死因子α和白细胞介素6的相关性分析

目的探讨非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)患者肠道菌群变化及其与胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)及肿瘤坏死因子(TNF)α、白细胞介素(IL)6的相关性。方法选取2013年1月-2014年9月在葫芦岛市中心医院消化内科诊治的NAFLD患者82例作为NAFLD组,同期健康体检者60例作为对照组,收集所有研究对象的新鲜粪便和空腹血清,计算肠道定植抗力(B/E值)和HOMA-IR。用ELISA法检测血清中TNFα及IL-6的水平,分析B/E值与HOMA-IR、TNFα及IL-6的相关性。计量资料两组间比较采用t检验;多组间比较采用方差分析;相关性分析采用Pearson相关分析。结果与对照组比较,NAFLD组肠道双歧杆菌和乳杆菌数量明显减少,肠杆菌和肠球菌数量明显增加,B/E值明显下降,两组间差异均有统计学意义(P值均<0.01)。NAFLD组血ALT、AST、甘油三酯、空腹血糖、空腹胰岛素水平及HOMA-IR、TNFα、IL-6较对照组明显升高(P值均<0.01)。相关性分析显示B/E值与HOMA-IR、TNFα及IL-6均呈显著负相关性(r=-0.872、-0.461、-0.523,P值均<0.01)。结论 NAFLD患者肠道菌群变化与HOMA-IR程度、血清TNFα、IL-6水平变化密切相关,说明以上因素可能相互影响、相互作用,共同参与了NAFLD的发生发展。

肥胖的2型糖尿病患者血中白细胞介素-6含量与胰岛素抵抗

目的 探讨肥胖的 2型糖尿病 (T2DM )患者血浆白细胞介素 6 (IL 6 )水平及其与胰岛素敏感性的关系。方法 受试者分为肥胖的T2DM组 (4 2例 )、非肥胖的T2DM组 (4 0例 )和正常体质量对照组 (37例 ) ;除体质量指数、腰臀比值外 ,各组间在年龄、性别、种族等方面均具有可比性 ;禁食 12～ 14小时 ,空腹静脉取血 ,测定血浆IL 6、血脂、空腹血糖 (FPG)、空腹血浆胰岛素 (FPI) ,并计算胰岛素敏感性指数 (ISI)。结果 肥胖组血浆IL 6水平 (199.10±4 2 .18)ng/L明显高于非肥胖组 (12 1.4 5± 39.4 0 )ng/L(P <0 .0 5 )和正常体质量对照组 (119.91± 34.12 )ng/L(P<0 .0 1) ;血浆IL 6水平与ISI呈显著负相关 (r =- 0 .4 8,P <0 .0 1) ;与空腹三酰甘油水平呈正相关 (r =0 .36 ,P<0 .0 5 )。结论 血浆IL 6水平可能与肥胖的T2DM发生有关 ,血浆中IL

胰岛β细胞株INS-1和MIN6有关糖毒性的比较研究

目的探讨INS-1和MIN6细胞株在有关糖毒性研究的不同表型。方法胰岛素瘤细胞株INS-1和MIN-6分别在含5和25mM糖浓度的无血浆培养基中孵育24h。MTT法测定细胞活性,细胞凋亡通过annexinV-PI双染,流式细胞仪检测分析。结果 INS-1细胞在高糖条件下细胞活性明显降低,细胞凋亡率、死亡率明显增加,而MIN6细胞在高糖环境下细胞活性增加,凋亡率下降,死亡率无明显变化。结论 MIN6细胞比INS-1细胞能耐受更高的糖毒性。

MiR-96靶向调控Sox6促进小鼠β细胞胰岛素合成与分泌

目的探索miR-96对小鼠胰岛β细胞胰岛素合成与分泌的影响及其作用机制。方法将小鼠胰岛β细胞系(MIN6细胞)分为四组,通过脂质体LipfectamineTM2000介导将miR-96 mimics、mimicsNC、miR-96 inhibitor、inhibitor NC瞬时转染至4组细胞,荧光定量PCR和ELISA方法分别检测Ins1、Ins2mRNA的表达及细胞上清液中的胰岛素浓度,生物信息学分析miR-96与Sox6 3UTR的结合关系,荧光素酶报告基因检测miR-96与Sox6的结合情况,Western blot检测Sox6蛋白水平。结果与对照组比较,miR-96 mimics能增加葡萄糖刺激下MIN6细胞胰岛素的合成与分泌(P <0.01),而miR-96 inhibitor可下调胰岛素的合成与分泌(P <0.01)。miR-96与Sox6 3UTR的553-561位点结合。过表达miR-96可显著抑制Sox6荧光素酶活性及MIN6细胞中Sox6蛋白的表达。结论 miR-96靶向沉默Sox6进而促进β细胞胰岛素的合成与分泌。

棕榈酸致大鼠L6肌细胞胰岛素抵抗与JNK1活化的关系

目的建立棕榈酸(PA)诱导的大鼠L6肌细胞胰岛素抵抗模型,初步探讨其机制与C-jun氨基末端激酶1(JNK1)活化的关系。方法不同浓度PA分别培养已分化的L6肌细胞2、4、8、12、24、36 h,用葡萄糖试剂盒分别检测各组培养液中剩余葡萄糖浓度,观察不同浓度PA对骨骼肌细胞葡萄糖摄取的影响。MTT法检测棕榈酸对L6细胞活性的影响。建立L6肌细胞胰岛素抵抗模型,Western blot检测正常组(NG组)和胰岛素抵抗组(IR组)的JNK1和p-JNK1的蛋白表达水平。结果 0.4 mmol/L的PA孵育24～36 h与0.6、0.8 mmol/L的PA孵育8～24 h后细胞上清液葡萄糖浓度明显高于NG组(P<0.05),MTT结果显示0.8、1.0 mmol/L的PA作用24、36 h时对细胞的活性有影响。Western blot结果显示:NG组JNK1和p-JNK1的表达量较低,IR组JNK1和p-JNK1的表达量上升,其中p-JNK1表达量上升较JNK1明显,但与NG组比较,IR组的JNK1表达差异无统计学意义,p-JNK1、p-JNK1/JNK1表达差异均有统计学意义(P<0.05)。结论通过一定浓度和时间的PA刺激可导致大鼠L6成肌细胞胰岛素抵抗的形成,其机制可能和JNK1的活化有一定关系。

血清颗粒蛋白前体、白细胞介素-6与多囊卵巢综合征胰岛素抵抗的相关性

目的探讨血清脂肪因子颗粒蛋白前体(Progranulin)和IL-6水平与多囊卵巢综合征(PCOS)患者胰岛素抵抗(IR)的相关性。方法选取2013年8月—2014年12月间在上海市浦东新区公利医院明确诊断为PCOS的患者46例(PCOS组)和同期健康志愿者50名(对照组),依据BMI≥25kg/m^2或<25kg/m^2将其进一步分为PCOS肥胖亚组(22例)、PCOS非肥胖亚组(24例)、对照肥胖亚组(24例)和对照非肥胖亚组(26例)。测定4组患者的血清Progranulin、IL-6、空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)水平,计算稳态模型胰岛素抵抗指数(HOMA-IR≥2.8为IR)。结果 PCOS组的FINS水平和HOMA-IR均显著高于对照组(P值均<0.01);PCOS肥胖亚组的FINS水平和HOMA-IR均显著高于PCOS非肥胖亚组和对照肥胖亚组(P值均<0.01、0.05),对照肥胖亚组的FINS水平和HOMA-IR均显著高于对照非肥胖亚组(P值均<0.05)。PCOS组的血清Progranulin和IL-6水平均显著高于对照组(P值均<0.05);PCOS肥胖亚组的血清Progranulin和IL-6水平均显著高于PCOS非肥胖亚组(P值均<0.01),PCOS肥胖亚组的血清Progranulin水平显著高于对照肥胖亚组(P<0.05),对照肥胖亚组的血清Progranulin和IL-6水平均显著高于对照非肥胖亚组(P值均<0.05)。PCOS患者的血清Progranulin水平与HOMA-IR、BMI、腰围均呈正相关(r=0.404、0.380、0.349,P值均<0.01),IL-6水平与HOMA-IR、BMI、腰围亦均呈正相关(r=0.535、0.477、0.304,P值均<0.01);Progranulin水平与IL-6水平呈正相关(r=0.318,P<0.05)。PCOS合并IR亚组的血清Progranulin和IL-6水平均显著高于PCOS未合并IR亚组(P值均<0.05)。结论血清Progranulin、IL-6水平与PCOS患者IR的发生密切相关。

细胞因子白细胞介素-6及胰岛素生长样因子-1与类风湿关节炎临床表现的关联性研究

目的研究白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)及胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factor-1,IGF-1)与类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)临床表现的关联性。方法采用酶联吸附免疫法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)测定RA患者血清IL-6及IGF-1浓度,分析其于RA临床表现的关联性。结果1.骨质疏松组IGF-1水平明显低于无骨质疏松组(P<0.05)。而男性组与女性组、RF阳性组与阴性组、ACCP阳性组与阴性组、无+轻度贫血与中度+重度贫血、白细胞减少与白细胞不减少、血小板升高与无血小板升高之间均无显著性差异(P>0.05)。2.IGF-1与ACCP滴度、RF滴度、病程、ESR、年龄、CRP均无相关性(P>0.05),与疼痛关节数及肿胀关节数呈负相关(P<0.05)。3.男性RA患者IL-6水平明显比女性RA患者水平低(P<0.05),ACCP阴性组明显比阳性组低(P<0.05),骨质疏松组明显比无骨质疏松组低(P<0.05)。而RF阳性组与阴性组、无+轻度贫血与中度+重度贫血、白细胞减少与白细胞不减少、血小板升高与无血小板升高之间均无显著性差异。(P>0.05)。4.IL-6水平与ACCP滴度、疼痛关节数及肿胀关节数呈正相关(P<0.05),与IGF-1水平呈负相关(P<0.05),与RF滴度、病程、ESR、年龄、CRP均无相关性(P>0.05)。结论IL-6及IGF-1与RA病情活动有关。女性患者Il-6高。

甲状腺功能亢进症肝损害合并糖代谢紊乱患者胰岛相关抗体及白细胞介素-6的研究

目的探讨甲状腺功能亢进症(甲亢)肝损害合并糖代谢紊乱和相关抗体及细胞因子之间的关系。方法选取甲亢性肝功能损害患者148例,其中合并糖代谢紊乱者61例(A组),无糖代谢紊乱者87例(B组),比较两组的甲状腺激素水平、胰岛素抗体(IAA)、胰岛细胞抗体(ICA)、谷氨酸脱羧酶抗体(GADA)、胰岛细胞抗原2抗体(IA-2A)、白细胞介素-6(IL-6)等指标,评估两组胰岛素抵抗指数(HOMA-IR),胰岛B细胞分泌功能指标(HOMA-B),并对结果进行比较分析。结果两组甲状腺激素水平、IAA和ICA阳性率差异无统计学意义(P>0.05);A组IL-6水平、GADA和IA-2A阳性率、HOMA-IR高于B组,HOMA-B低于B组,差异有统计学意义(P<0.05);IL-6和GADA、HOMA-IR呈正相关,和HOMA-B呈负相关。结论甲亢肝损害合并糖代谢紊乱存在更严重的胰岛素抵抗,且和机体免疫紊乱产生的胰岛相关抗体和IL-6存在一定关系。

白细胞介素6导致脂肪细胞胰岛素抵抗机制的初步探讨

目的:观察IL-6对3T3-L1脂肪细胞胰岛素敏感性的影响并初步探讨其机制。方法:用IL-6处理3T3-L1脂肪细胞48h后,观察胰岛素刺激的葡萄糖摄取,IRS-1蛋白表达和酪氨酸磷酸化以及PKB磷酸化水平。同时观察mTOR抑制剂那巴霉素对IL-6作用的影响。结果:IL-6使胰岛素刺激的葡萄糖摄取和PKB磷酸化下降约50%,同时明显降低IRS-1蛋白表达(约35%)和酪氨酸磷酸化(约40%)水平。IL-6的上述作用可被那巴霉素逆转。结论:IL-6导致的脂肪细胞胰岛素抵抗与IRS-1表达减少和酪氨酸磷酸化水平下降有关,那巴霉素可以逆转IL-6的作用,mTOR可能参与IL-6导致的胰岛素抵抗的发生。

2型糖尿病肥胖患者血清C反应蛋白、白细胞介素-6与胰岛素抵抗关系研究

目的探讨2型糖尿病肥胖患者血清C反应蛋白(CRP)、白细胞介素-6(IL-6)、IL-8水平与胰岛素抵抗的关系。方法选择初次诊断2型糖尿病合并肥胖患者180例作为观察组,同期新发诊断2型糖尿病正常体质量患者180例作为对照组。免疫散射比浊法检测2组血清CRP,酶联免疫吸附法检测IL-6、IL-8,采用全自动生化分析仪检测患者空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS)、糖化血红蛋白(Hb A1c)、低密度脂蛋白胆固醇(LDLC),采用HOMA模型公式计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。比较2组患者血清CRP、IL-6、IL-8水平、相关生化代谢指标与HOMA-IR水平的差异,Pearson相关分析患者血清CRP、IL-6、IL-8水平与HOMA-IR相关性。结果观察组血清CRP、IL-6、IL-8水平和FPG、FINS、Hb A1c、LDL-C以及HOMA-IR水平明显高于对照组(P均<0.05);Pearson相关分析显示血清CRP、IL-6、IL-8水平与HOMA-IR呈正相关(P均<0.05)。结论 2型糖尿病患者合并肥胖发生时,血清CRP、IL-6、IL-8水平可进一步升高,升高的血清CRP、IL-6、IL-8水平与胰岛素抵抗程度存在相关性,提示炎性反应参与2型糖尿病肥胖患者胰岛素释放抵抗。

NADPH氧化酶在高脂诱导的MIN6胰岛β细胞损伤中的作用

目的探讨NADPH氧化酶在高脂诱导的MIN6胰岛β细胞损伤中的作用。方法不同浓度(0.1、0.3、0.5、0.8mmol·L^(-1))高脂刺激MIN6胰岛β细胞(24、48、72、96 h),MTT法检测细胞增殖情况;免疫印迹法检测细胞内p22^(phox)、p47^(phox)、p67^(phox)以及gp91^(phox)等NADPH氧化酶亚基的表达水平及凋亡相关蛋白(Bcl-2及Bax)的表达水平。结果 0.5mmol·L^(-1)高脂刺激MIN6胰岛细胞48 h时,细胞增殖率出现明显下降;p22^(phox)、p47^(phox)、p67^(phox)以及gp91^(phox)等NADPH氧化酶亚基和Bax的表达水平明显升高(P<0.05),而Bcl-2表达水平明显降低(P<0.05);NADPH氧化酶抑制剂diphenyliodonium(DPI,10μmol·L^(-1))预处理后并高脂刺激MIN6胰岛β细胞48 h,与高脂刺激组相比,DPI处理组细胞Bcl-2表达明显上升(P<0.05),Bax表达明显下调(P<0.05)。结论 NADPH氧化酶活性对高脂引起的MIN6胰岛β细胞损伤的防治有重要意义。

胰岛素泵联合芪参补气胶囊对2型糖尿病并发呼吸道感染患者血清IL-6及TNF-α水平的影响

目的:研究胰岛素泵联合芪参补气胶囊对2型糖尿病并发呼吸道感染患者血清白细胞介素-6(IL-6)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平的影响。方法:选择2019年1月~2021年10月佳木斯市中心医院收治的80例2型糖尿病并发呼吸道感染患者随机分为观察组和对照组各40例,两组均采取化痰、抗感染、支持和平喘等相关治疗,同时对照组加用胰岛素泵治疗,观察组采用胰岛素泵联合芪参补气胶囊治疗,比较两组治疗前、后的免疫相关指标(CD4、补体C3、CD8、CD4/CD8、IgA及IgG)、炎症因子(IL-6及TNF-α)。结果:观察组治疗总有效率明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,对照组的CD4、CD4/CD8比治疗前明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);补体C3、CD8、IgA及IgG水平与治疗前差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后观察组的CD4、补体C3、CD4/CD8、IgA及IgG均比治疗前明显升高,差异有统计学意义(P<0.05),且观察组的CD4、补体C3、CD4/CD8、IgA及IgG明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后,两组的血清IL-6及TNF-α水平均明显比治疗前降低,且观察组的血清IL-6及TNF-α水平明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:胰岛素泵联合芪参补气胶囊对2型糖尿病并发呼吸道感染患者有显著的疗效,能明显降低血清IL-6及TNF-α水平,减轻炎症反应,其作用机制可能与同时增强细胞免疫、补体系统及体液免疫活性相关。

加味建瓴汤对原发性高血压患者胰岛素抵抗及血清白细胞介素-6水平的影响

目的观察加味建瓴汤对原发性高血压患者胰岛素抵抗及血清白细胞介素-6(IL-6)水平的影响,并探讨其可能的作用机制。方法选择符合纳入标准的原发性高血压伴胰岛素抵抗患者60例,采用随机、单盲、对照试验设计分为治疗组和对照组各30例。对照组给予依那普利10 mg/次,每日1次口服,治疗组在西药治疗基础上予加味建瓴汤150 mL/次,每日2次口服,疗程为3周。观察2组患者治疗前后空腹血糖、血浆胰岛素水平、中医症状、血清IL-6水平变化,并计算胰岛素敏感指数。结果治疗组较对照组经治疗后空腹血糖、空腹胰岛素水平明显降低,胰岛素敏感指数明显改善,血清IL-6水平明显下降(P<0.01或P<0.05);治疗组中医症状疗效明显优于对照组(P<0.01)。结论加味建瓴汤能显著降低血糖、血浆胰岛素水平,改善临床症状和减轻胰岛素抵抗。降低血清IL-6水平,抑制炎症反应,可能是其改善胰岛素抵抗的机制之一。

印楝素对min6细胞增殖及胰岛素分泌的影响

【目的】研究印楝素对min6细胞增殖、葡萄糖摄取及胰岛素分泌的影响,并探讨其作用机制。【方法】不同浓度印楝素处理min6细胞48 h,检测细胞增殖量。在5.5和25.0 mmol·L^(-1)葡萄糖条件下,检测印楝素处理细胞的葡萄糖摄取水平,胰岛素ELISA检测试剂盒检测细胞胰岛素的分泌。【结果】与对照组相比,在5.5和25.0mmol·L^(-1)葡萄糖条件下,印楝素均表现促进细胞增殖活性。印楝素处理下,与25.0 mmol·L^(-1)葡萄糖条件相比,5.5 mmol·L^(-1)葡萄糖表现出更显著地促进葡萄糖摄取和胰岛素分泌的作用。【结论】印楝素可能通过调控葡萄糖水平影响胰岛素的分泌。

棕榈酸对小鼠胰岛β细胞瘤MIN6细胞凋亡的影响及其机制探讨

目的观察棕榈酸对小鼠胰岛β细胞瘤MIN6细胞凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法培养于含0.5 mM棕榈酸的培养基中的MIN6细胞为实验组,仅含5%BSA的培养基培养的MIN6细胞为对照组,采用流式细胞术和原位末端转移酶标记技术(TUNEL)检测两组MIN6细胞凋亡情况。实验组于培养12(实验1组)、24(实验2组)、36(实验3组)h后,对照组于培养36 h后,采用Western blot法检测MIN6细胞中的凋亡诱导因子(AIF)及survivin。构建survivin过表达载体并转染实验组细胞,36 h后,同前法检测转染及未转染survivin过表达载体的MIN6细胞在含棕榈酸培养基中的凋亡情况。结果培养36 h后实验组MIN6细胞凋亡率为30.27%±3.15%,明显高于对照组的4.61%±0.51%(P<0.01)。实验1、2、3组MIN6细胞核中的AIF的相对表达量高于对照组,sur-vivin相对表达量低于对照组(P均<0.05)。棕榈酸培养36 h后,转染survivin过表达载体的MIN6细胞凋亡率为11.6%±2.09%,低于未转染者的31.27%±2.97%(P<0.01)。结论棕榈酸可诱导小鼠胰岛β细胞瘤MIN6细胞凋亡,可能与下调survivin表达和激活AIF凋亡信号通路有关;survivin表达上调可抑制棕榈酸诱导的MIN6细胞凋亡。