LncRNA MINCR靶向miR⁃223抑制LPS诱导的人肺泡上皮细胞系A549损伤和炎性反应

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)MINCR靶向调节微小RNA(miR)-223对脂多糖(LPS)诱导的肺泡上皮细胞系损伤和炎性反应的影响。方法将人肺泡上皮细胞系A549随机分为对照组、LPS组、LPS+转染组(Si NC组、Si MINCR组、miR-223 NC组、miR-223 mimic组、Si NC+miR-223 NC组、Si NC+miR-223 antagomir组、Si MINCR+miR-223 NC组、Si MINCR+miR-223 antagomir组)。RT-qPCR检测MINCR、miR-223表达水平;流式细胞仪检测细胞凋亡率;ELISA测定血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)水平;生物信息学预测和双荧光素酶报告基因验证MINCR与miR-223的靶向关系;Western blot检测细胞中活化的半胱天冬氨酸蛋白酶-3(cleaved caspase-3)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)蛋白表达水平。结果MINCR和miR-223存在靶向关系。LPS组与对照组比较,细胞凋亡率、TNF-α、IL-6水平、MINCR、cleaved caspase-3蛋白表达均显著增加(P<0.05),miR-223、Bcl-2蛋白表达显著降低(P<0.05)。与Si NC组相比,Si MINCR组细胞凋亡率、TNF-α和IL-6水平、MINCR和cleaved caspase-3蛋白表达均显著降低(P<0.05),Bcl-2蛋白表达显著升高(P<0.05);与miR-223 NC相比,miR-223 mimic组细胞凋亡率、TNF-α和IL-6水平、cleaved caspase-3蛋白表达均显著降低(P<0.05),miR-223、Bcl-2蛋白表达显著升高(P<0.05)。miR-223 antagomir可逆转Si MINCR发挥的作用(P<0.05)。结论沉默lncRNA MINCR的表达可能通过靶向激活miR-223表达,抑制A549细胞凋亡以及炎性反应,减少LPS诱导的A549细胞损伤。

长链非编码RNA MINCR靶向微小RNA-876-5p调控膀胱癌细胞生物学行为的分子机制研究

目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)MINCR靶向微小RNA(miR)-876-5p调控膀胱癌细胞增殖、迁移、侵袭及凋亡的分子机制。方法体外培养人正常膀胱上皮细胞SV-HUC-1与膀胱癌细胞系T24、RT4、UM-UC-3,采用反转录与荧光定量聚合酶链反应法检测LncRNA MINCR和miR-876-5p的表达量;将si-NC、si-MINCR、miR-NC、miR-876-5p mimics、anti-miR-NC、anti-miR-876-5p、si-MINCR+anti-miR-NC、si-MINCR+anti-miR-876-5p转染入T24细胞,分别记为si-NC组、si-MINCR组、miR-NC组、miR-876-5p组、anti-miR-NC组、anti-miR-876-5p组、si-MINCR+anti-miR-NC组、si-MINCR+anti-miR-876-5p组;采用噻唑蓝法检测细胞活力;采用Transwell小室实验检测细胞迁移及侵袭能力;采用流式细胞术检测细胞凋亡率;双荧光素酶报告基因实验检测LncRNA MINCR与miR-876-5p的靶向关系;蛋白质印迹法检测细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、基质金属蛋白酶(MMP)2、MMP-9、天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved-caspase-3)蛋白表达量。结果与SV-HUC-1细胞比较,膀胱癌细胞系T24、RT4、UM-UC-3中LncRNA MINCR的表达水平升高[(2.25±0.20)、(1.84±0.18)、(1.61±0.12)比(1.00±0.10)],miR-876-5p的表达水平降低[(0.38±0.03)、(0.46±0.04)、(0.51±0.05)比(1.02±0.12)](均P<0.05)。与miR-NC组比较,miR-876-5p组细胞活力降低,迁移及侵袭细胞数减少,凋亡率升高,Cyclin D1、MMP-2、MMP-9蛋白水平降低,Cleaved-caspase-3蛋白水平升高(均P<0.05)。双荧光素酶报告实验证实LncRNA MINCR能够靶向结合miR-876-5p。与si-MINCR+anti-miR-NC组比较,si-MINCR+anti-miR-876-5p组细胞活力升高,迁移及侵袭细胞数增多,凋亡率降低,Cyclin D1、MMP-2、MMP-9蛋白水平升高,Cleaved-caspase-3蛋白水平降低(均P<0.05)。结论抑制LncRNA MINCR表达可减弱膀胱癌细胞增殖、迁移及侵袭能力,并诱导细胞凋亡,其作用机制与靶向调控miR-876-5p的表达有关。

长链非编码RNA MINCR在肿瘤中的研究进展

MINCR(MYC-induced long noncoding RNA)是一种新发现的LncRNA,定位于人类基因组8号染色体q24.3上,具有促进肿瘤的发生发展、侵袭和转移等作用。MINCR已经被证实在肝癌、肺癌、口腔鳞状细胞癌、胆囊癌等肿瘤中均存在表达差异,表明MINCR参与肿瘤的一系列复杂的生物学过程,在不同的肿瘤中通过不同途径调控肿瘤的发生、发展。目前研究显示,MINCR被认为是重要的致癌因子,其有望成为新的肿瘤诊断和治疗靶点,探讨MINCR在肿瘤中的生物学功能及其对肿瘤的诊断、治疗及预后有重大的价值,该文结合最新研究发现,就MINCR及其在不同肿瘤中的研究进展作一简述。

同时下调长链非编码RNA PVT1和MINCR对Raji细胞增殖的影响

目的探讨同时下调长链非编码RNA(lncRNA)人浆细胞瘤转化迁移基因1(PVT1)和MINCR(MYC-induced long non-coding RNA)对淋巴瘤细胞株Raji增殖的影响及其可能机制。方法合成靶向PVT1、MINCR的小干扰RNA(siRNA)和无关对照siRNA(SC-siRNA)序列。实验分为PVT1-siRNA组、MINCR-siRNA组、PVT1-siRNA+MINCR-siRNA组、无关对照组和细胞组(未转染的Raji细胞)。将各条siRNA转入Raji细胞后,用实时定量RT-PCR方法检测MINCR RNA表达水平;分别用CCK8法、流式细胞仪、Western blot检测细胞增殖、细胞周期和c-Myc蛋白的表达情况。结果转染MINCR-siRNA后MINCR表达下调,与无关对照组和细胞组相比差异有统计学差异(P<0.05)。PVT1-siRNA联合MINCR-siRNA转染到Raji细胞后,细胞增殖明显受到抑制(P<0.05),细胞周期阻滞于G1期(P<0.05),c-Myc蛋白表达下降(P<0.05),且与单用PVT1-siRNA组、MINCR-siRNA组相比差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论同时下调PVT1和MINCR可以增强对Raji细胞增殖的抑制作用。