LncRNA MIR205HG靶向miR-299-3p调控肺癌细胞增殖、凋亡的机制研究

目的 探讨长链非编码RNA MIR205HG(LncRNA MIR205HG)与微小RNA-299-3p(miR-299-3p)的相互关系及其影响肺癌细胞增殖、凋亡的分子机制。方法 检测肺癌组织和细胞中MIR205HG、miR-299-3p的表达。H1299细胞分为si-MIR205HG组、si-NC组、miR-299-3p组、miR-NC组、si-MIR205HG+anti-miR-299-3p组、si-MIR205HG+anti-miR-NC组。MIR205HG与miR-299-3p的相互作用;检测增殖、凋亡及蛋白表达。结果 肺癌组织和细胞系中MIR205HG表达水平升高(P<0.05),miR-299-3p表达水平降低(P<0.05)。MIR205HG能与miR-299-3p特异性结合,可调控miR-299-3p的表达。干扰MIR205HG表达或miR-299-3p过表达后可降低肺癌细胞增殖能力,促进细胞凋亡,且CyclinD1、p21表达降低,Bcl-2、Bax表达增高(P<0.05)。抑制miR-299-3p可逆转干扰MIR205HG表达对肺癌细胞增殖及凋亡的作用。结论 干扰MIR205HG表达可抑制肺癌细胞增殖及诱导细胞凋亡,其作用机制与负向调控miR-299-3p有关。

lncRNA MIR205HG通过调控miR-122-5p促进食管鳞状细胞癌细胞的增殖和侵袭

目的:探究长链非编码RNA(lncRNA)MIR205HG对食管鳞状细胞癌细胞增殖和侵袭的影响及其作用机制。方法:RT-PCR检测食管鳞状细胞癌组织以及癌旁组织中MIR205HG的表达量;CCK-8实验检测MIR205HG对食管鳞状细胞癌细胞Eca-109和TE-10增殖的影响;Western blot实验检测侵袭相关蛋白MMP-1和MMP-9以及血管内皮生长因子(VEGF)的蛋白表达水平。结果:结果显示,MIR205HG在食管鳞状细胞癌组织中的表达量显著高于癌旁组织的表达量(P<0.05);与转染对照si-RNA相比,当细胞转染si-MIR205HG时,MIR205HG的表达量显著被抑制(P<0.05);干扰MIR205HG显著抑制食管鳞状细胞癌细胞Eca-109和TE-10的增殖和侵袭(P<0.05);此外,si-MIR205HG促进miR-122-5p的表达,且MIR205HG与miR-122-5p表达量呈负相关(P<0.05);进一步的研究结果表明,抑制miR-122-5p逆转si-MIR205HG对TE-10细胞增殖和侵袭的抑制作用(P<0.05)。结论:MIR205HG能够促进食管鳞状细胞癌细胞的增殖和侵袭,其作用机制是通过调控miR-122-5p来实现的,这一结果能够为食管鳞状细胞癌的临床治疗和诊断提供分子基础。

肺鳞状细胞癌组织中LncRNA MIR205HG的表达及对癌细胞增殖克隆的影响和机制研究

目的筛选肺鳞状细胞癌(squamous cell lung carcinoma,SQCLC)中差异表达且具有临床意义的潜在靶基因,并探究其在癌组织中的表达及其调控肺鳞状细胞癌发生发展的分子机制。方法通过临床数据库GEPIA找出在肺鳞状细胞癌中差异表达的长链非编码RNA(long noncoding RNAs,LncRNAs),进一步筛选出相较于正常肺组织表达差异性最显著的LncRNAs作为研究目的基因。通过PholyCSF数据库预测目的基因在肺鳞状细胞癌中发挥功能的形式。通过短发夹RNA(shRNA)介导敲低目的基因表达,利用细胞增殖实验、克隆形成实验验证目的基因在肺鳞状细胞癌发生发展中的重要性;通过分析与目的基因共表达基因参与的信号通路,探索其在肺鳞状细胞癌中发挥功能的潜在分子机制。结果研究最终选取在肺鳞状细胞癌中显著差异高表达的MIR205HG作为目的基因进行实验探究。肺鳞状细胞癌组织中MIR205HG表达显著高于正常肺组织(6.785±0.462 vs 1.084±0.036),差异有统计学意义(t=188.873,P<0.05),且随着临床分期越高MIR205HG表达水平越高(P=0.0472)。MIR205HG主要通过LncRNA形式在肺鳞状细胞癌中发挥功能。与shCTL组(0.988±0.039)相比,shMIR205HG#1组(0.709±0.032)和shMIR205HG#2组(0.736±0.026)细胞的增殖率明显降低,差异有统计学意义(F=66.163,P<0.001)。shMIR205HG#1组(0.324±0.021)和shMIR205HG#2组(0.402±0.023)细胞克隆形成速率明显低于shCTL对照组(1.809±0.019),差异有统计学意义(F=423.093,P<0.001)。shMIR205HG#1组(5.988±0.321)和shMIR205HG#2组(5.702±0.345)细胞中P53蛋白表达明显高于shCTL对照组(1.022±0.152),差异有统计学意义(F=285.386,P<0.001)。shMIR205HG#1组(3.857±0.362)和shMIR205HG#2组(3.698±0.314)细胞中下游P21蛋白表达亦明显高于shCTL对照组(1.106±0.253),差异有统计学意义(F=73.106,P<0.001)。结论lncRNA MIR205HG在肺鳞状细胞癌中显著高表达,可能通过P53信号通路参与肺鳞状细胞癌的增殖和克隆形成,可作为肺鳞状细胞癌的潜在药物治疗靶点。