MIR22HG对肺炎支原体诱导RAW246.7细胞凋亡的影响及分子机制

目的探讨MIR22HG对肺炎支原体诱导的RAW246.7细胞凋亡的影响及分子机制。方法培养小鼠巨噬细胞RAW246.7,将其分为空白对照组(RAW246.7+10μL磷酸盐缓冲液)、模型细胞(RAW246.7+10μL肺炎支原体菌株)、模型细胞+si-NC组(RAW246.7+10μL肺炎支原体菌株+转染MIR22HG干扰载体阴性对照)和模型细胞+si-MIR22HG组(RAW246.7+10μL肺炎支原体菌株+转染MIR22HG干扰载体);采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测MIR22HG表达水平,细胞计数试剂盒8(CCK-8)和EdU染色检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)水平,蛋白印迹法测定caspase-9、Bax、p-p65、caspase-3及p-IκBα蛋白表达。结果肺炎支原体诱导的RAW246.7细胞中MIR22HG水平增加,细胞活性和EdU阳性细胞比率下降、凋亡增加,TNF-α、IL-6水平升高,Bax、caspase-9、caspase-3表达水平升高,Bcl-2表达水平降低,p-p65、p-IκBα水平增加,差异有统计学意义(P<0.05);敲减MIR22HG后,细胞活性、EdU阳性细胞比率和Bcl-2表达增加,凋亡率、IL-6、TNF-α水平、caspase-9、Baxp-p65、caspase-3、p-IκBα表达水平降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论敲减MIR22HG可能通过下调NF-κB信号通路抑制肺炎支原体诱导的RAW246.7细胞炎症反应和凋亡。