CD34^+CD38^+造血干细胞移植MISTRG小鼠的人源化免疫特征研究

目的研究人脐带血CD34^+CD38^+造血干细胞移植入MISTRG免疫缺陷小鼠体内的人源化免疫特征。方法利用Ficoll密度梯度离心法从新生儿脐带血中分离单个核细胞,并结合免疫磁珠法分选hCD34^+造血干细胞,然后经体外扩增培养后利用流式细胞技术检测CD34^+CD38^+细胞的比例。取2×105细胞数注射至辐照后的新生MISTRG小鼠肝脏内,分别于第3、6、9、12周采血检测人源免疫细胞的分化与表达情况。结果免疫磁珠法分选人的CD34^+CD38^+造血干细胞纯度高达92.0%。移植小鼠外周血中的hCD45^+细胞初始浓度水平大于10.0%,淋巴细胞群包含人源T(hCD3^+CD45^+)、B(hCD3-CD19^+)和NK(hCD3-CD56^+)淋巴细胞,其中B(hCD3-CD19^+)淋巴细胞所占比值最大(初始水平为49.0%±7.4%),髓系细胞群则主要由巨噬细胞组成(初始水平为82.3%±4.5%)。小鼠外周血中hCD45^+细胞比值和T细胞占免疫细胞的比值随着时间的推移逐渐下降,B淋巴细胞和巨噬细胞所占的比例逐渐升高,而NK细胞基本完全消失。结论人源CD34^+CD38^+造血干细胞在新生MISTRG小鼠中可有效分化为人源淋系和髓系免疫细胞。在移植后的12周内hCD45^+细胞的比例逐渐下降,MISTRG免疫缺陷小鼠最佳的人源化免疫系统维持时间为第3～6周。