基于GC-MS代谢组学分析MK-801诱导精神分裂症大鼠血浆代谢特征

目的基于代谢组学方法探索MK-801诱导精神分裂症大鼠的特征性生物标志物及代谢途径,为精神分裂症病理提供新见解。方法于2020年8月选用20只4周龄雄性SD大鼠,随机数字表法将大鼠分为对照组(腹腔注射生理盐水)和试验组(腹腔注射MK-801),每组各10只,2周后,依次进行旷场实验、高架十字迷宫实验和Y迷宫实验评价大鼠自主活动、焦虑样行为和学习记忆能力。采用气相色谱-质谱联用技术分析大鼠血浆代谢物,采用偏最小二乘判别分析(PLS-DA)和KEGG通路富集分析筛选MK-801诱导精神分裂症大鼠血浆差异代谢物和显著变化的代谢通路。结果与对照组相比,慢性MK-801给药导致大鼠在旷场行为学测试中运动路程显著降低、在高架十字迷宫行为测试进入开臂的次数和在开臂持续的时间显著降低和在新物体识别实验中测试期探索新物体时间显著降低(P<0.05),成功模拟精神分裂样症状。根据代谢组学分析在对照组与试验组之间的差异代谢物为苏氨酸、丝氨酸、肌氨酸、丙氨酸、谷氨酸、苯丙氨酸、柠檬酸、酪氨酸、D-核糖、核糖醇、色氨酸,且与对照组相比,其相对浓度均呈下降趋势;这些差异代谢物主要富集在两条代谢通路,即氨酰-tRNA(aminoacyl-tRNA)生物合成及苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸生物合成代谢通路。结论MK-801慢性给药诱导的精神分裂症发生可能与MK-801给药诱导血浆代谢紊乱,显著变化的代谢物和代谢途径与密切相关。

MK-801降低炎性痛大鼠脊髓NOS表达和NO含量

用NADPH d组织化学法 ,观察鞘内注射NMDA受体拮抗剂MK 80 1对大鼠右后掌皮下注射甲醛诱发的炎症性痛及痛过敏过程中脊髓后角一氧化氮合酶 (NOS)表达的影响 ,同时测定一氧化氮 (NO)代谢终产物NO-·3 及NO-·2 含量来观察这一过程中NO含量的变化。结果表明 ,皮下注射甲醛 2 4h时 ,双侧脊髓后角NOS的表达及腰膨大部位NO的含量明显增加 ;而注射甲醛前 15min及注射后 12h两次鞘内注射NMDA受体拮抗剂MK 80 1,则明显抑制NOS的表达及NO含量的增加。以上结果表明 :在大鼠后掌注射甲醛所引起的痛及痛过敏过程中 。

MK-801诱导的精神分裂症发育模型大鼠脑组织DA,DOPAC,Glu和GABA浓度的变化(英文)

目的：通过对MK-801诱导的精神分裂症（schizophrenia,SZ）发育模型大鼠和慢性给药模型大鼠脑组织多巴胺（dopamine,DA）、二羟苯乙酸（dihydroxy-phenyl acetic acid,DOPAC）、谷氨酸盐（glutamate,Glu）和γ-氨基丁酸（γ-aminobutyric acid,GABA）浓度的比较研究,探讨围产期N-甲基-D-天冬氨酸（N-methyl-D-aspartate,NMDA）受体阻断致SZ的神经生化机制。方法：60只新生雄性SD大鼠于出生后6天按批次随机分为SZ发育模型组（MK-801F）、SZ慢性给药模型组（MK-801M）和正常对照组（Control）;SZ发育模型大鼠于出生后7~10d皮下注射MK-801（0.1mg/kg,Bid）,SZ慢性给药模型大鼠于出生后47~60d腹腔注射MK-801（0.2mg/kg,Qd）,对照组大鼠于相应时段注射0.9%的生理盐水。出生后第60天分批进行行为学测试,出生后第63天取各组大鼠大脑内侧前额叶皮质（medial prefrontal cortex,mPFC）和海马组织并匀浆,以高效液相色谱-库仑阵列电化学法检测组织匀浆中的DA,DOPAC,Glu和GABA水平,并计算分析DA和Glu的利用率。结果：SZ发育模型大鼠mPFC和海马DA及DOPAC的浓度较正常对照组明显降低（P〈0.05）;mPFC区GABA浓度和Glu利用率较正常对照组明显降低（P〈0.05）;mPFC区DA浓度较SZ慢性给药模型组明显降低（P〈0.05）;海马DOPAC浓度及DA利用率较SZ慢性给药模型组明显降低（分别P〈0.01,P〈0.05）。结论：SZ发育模型成年大鼠mPFC区DA,Glu和GABA系统功能减退,海马DA系统功能减退。

MK-801抑制福尔马林实验引起的大鼠脊髓背角环氧合酶-2的表达

应用免疫组织化学方法,观察鞘内注射N-methyl-D-aspartate(NMDA)受体拮抗剂MK-801对福尔马林实验引起的大鼠脊髓背角环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)表达的影响。结果表明:MK-801对福尔马林实验引起的第1相缩足反射仅有一定抑制作用,但对第2相缩足反射有显著的抑制作用,且呈剂量依赖性。与这种行为学的变化相对应,MK-801可显著抑制福尔马林实验引起的脊髓背角COX-2表达的增加,并且这种抑制作用与MK-801的剂量呈正相关。这些结果表明,在福尔马林实验中,NMDA受体的活动是引起脊髓背角COX-2表达增加的原因之一。

MK-801建立谷氨酸功能低下精神分裂症小鼠模型的研究

目的用谷氨酸N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体非竞争性拮抗剂地卓西平马来酸盐(MK-801)建立谷氨酸功能低下精神分裂症小鼠模型,评价MK-801不同剂量时对这种模型的行为学改变,探讨其适宜剂量。方法根据文献及预试验,确定MK-801的实验剂量,用DigBehv自发活动视频分析系统测定腹腔注射MK-801不同剂量组小鼠的自发活动,用评分量表评价小鼠的刻板行为,并与注射生理盐水组比较。结果MK-801(0．125～0．50 mg／kg)呈剂量依赖性增加小鼠的自发活动和刻板行为。MK-801剂量为0．25 mg／kg时能显著增加小鼠的自发活动和刻板行为,而且从行为学方面评定,没有明显的神经毒性作用。0．50 mg/kg剂量组出现了后肢肌力障碍和明显的共济失调等神经毒性表现。结论0．25 mg／kg的MK-801可作为谷氨酸功能低下小鼠模型的最适宜剂量,引起的行为学改变能够客观量化。

MK-801建立精神分裂症的感觉运动门控障碍的小鼠模型研究

目的观察N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体拮抗剂地西平马来酸盐(MK-801)对小鼠感觉运动门控功能的影响,确定建立精神分裂症的感觉运动门控障碍小鼠模型的适宜剂量。方法采用不同剂量(0·125mg/kg、0·25mg/kg、0·50mg/kg)的MK-801建立感觉运动门控障碍的小鼠模型,用SR-LAB惊反射测试系统测定小鼠前脉冲抑制(PPI)、惊反射幅度和习惯化等行为学指标以比较不同剂量的药理作用。结果①前脉冲刺激的强度高于背景12dB时,MK-8010·125mg/kg、0·25mg/kg、0·50mg/kg各剂量组PPI的数值分别为(28·7%±4·8%)、(27·6%±5·6%)、(9·2%±4·0%),与对照组(53·6%±4·5%)的差异均有统计学意义(P<0·01),呈剂量依赖性破坏了小鼠的PPI。②MK-801剂量为0·5mg/kg时,惊反射的幅度明显大于对照组(P<0·001),增加的幅度为53%。③MK-8010·5mg/kg剂量组的习惯化为(-2·6%±10%),与正常对照组(43·7%±7·6%)相比,引起了习惯化明显损害(P<0·001)。结论MK-801能够引起小鼠PPI的缺失,且能增加小鼠对惊反射刺激的反应性。0·50mg/kg的MK-801可作为建立精神分裂症的感觉运动门控障碍的小鼠模型的适宜剂量。

MK-801诱导出生早期大鼠精神分裂症模型的行为学研究

目的建立地卓西平马来酸盐(MK-801)慢性处理的出生早期大鼠精神分裂症(SZ)模型,探讨其神经行为学变化。方法 11只出生后6 d的SD仔鼠,腹腔注射0.3 mg/kg的MK-801(MK-801组),一天2次,连续注射2周;11只同龄的SD仔鼠腹腔注射等体积的生理盐水(NS组)。给药前称重1次,给药完毕后每隔2 d称重1次,直至实验结束。给药后1周,检测旷场和水迷宫等行为学的变化。结果与NS组比较,MK-801组大鼠体重显著降低(P<0.01),并至少持续至注射结束后4周。行为学检测结果显示,与NS组比较,MK-801组大鼠自发活动显著减少(P<0.01),其学习能力明显降低,学习速度减慢,空间记忆能力下降(P<0.05)。结论 MK-801诱导的出生早期SZ模型大鼠自发活动减少,能部分模拟SZ的阴性症状;其学习及记忆功能损害可以部分模拟SZ的认知功能损害症状。

MK-801诱导的精神分裂症小鼠行为学和胼胝体髓鞘的改变

目的探讨白质/髓鞘损伤在N-甲基-D-天冬氨酸(N-methyl-D aspartate,NMDA)受体阻断致精神分裂症(schizophrenia,SZ)中的作用。方法雄性C57 BL/6J小鼠(8周龄)48只,随机分为地卓西平马来酸盐(dizocilpine,MK-801)慢性给药M1组(0.25mg/kg)、M2组(0.50mg/kg)和M3组(1.00mg/kg)及对照组(生理盐水)。以Morris水迷宫、探孔和转棒测试检验小鼠行为学改变,运用免疫组化、透射电镜及体视学方法观察其胼胝体内髓鞘的改变。结果各模型组小鼠与对照组比较,空间学习记忆能力无明显下降(均P>0.05),M1和M3组小鼠较对照组表现出对新环境探索减少的SZ阴性症状;大脑胼胝体区MBP染色M1组(179±10)%、M2组(235±7)%、M3组(152±9)%小鼠较对照组(288±18)%均降低(均P<0.01),其内有髓神经纤维髓鞘出现板层分离、节段性脱髓鞘等病变,M3组小鼠胼胝体内损伤有髓神经纤维比例高于对照组[(22.42±4.24)%vs.(3.84±1.35)%],差异有统计学意义(P<0.01)。结论胼胝体脱髓鞘改变可能是MK-801慢性给药诱导SZ的病因之一。

谷氨酸和MK-801对正常和帕金森模型大鼠纹状体内多巴胺代谢的影响(英文)

采用微透析和高效液相色谱-电化学(HPLC-ECD)技术研究了谷氨酸和MK-801对正常和帕金森模型大鼠纹状体内多巴胺代谢的影响。用微透析技术在大鼠纹状体内分别定位给以左旋多巴、L-谷氨酸和/或MK-801,同时收集透析液,用HPLC-ECD方法测定透析液中多巴胺代谢产物的浓度。微透析和HPLC-ECD分析结果表明:纹状体内定位给以左旋多巴,正常大鼠和帕金森模型大鼠纹状体内多巴胺代谢产物的浓度均升高;纹状体内定位给以L-谷氨酸,可使正常大鼠纹状体内多巴胺代谢产物的浓度降低,但对帕金森大鼠模型纹状体内多巴胺代谢产物浓度的降低不显著;纹状体内定位给以MK-801,正常大鼠纹状体内多巴胺代谢产物的浓度升高;但对帕金森大鼠模型纹状体内多巴胺代谢产物浓度的升高不显著;纹状体内同时定位给以MK-801和L-谷氨酸,可以有效防止L-谷氨酸所致正常大鼠纹状体内多巴胺代谢产物浓度的降低。结果提示,谷氨酸可以通过NMDA受体调节多巴胺的代谢。尽管非竞争性NMDA拈抗剂MK-801可以有效防止L-谷氨酸所致正常大鼠纹状体内多巴胺代谢产物浓度的降低,但却不能有效地改善帕金森大鼠模型纹状体内多巴胺的代谢水平。因此在正常及帕金森病情况下,谷氨酸-多巴胺相互作用机制和MK-801改善帕金森病的机制还有待进一步研究。

脑缺血再灌流后bFGF基因的表达及MK-801的影响

目的 研究脑缺血再灌流后 b FGF基因表达的意义及其机制。方法 采用原位杂交和免疫组化的方法 ,观察大鼠脑缺血再灌流后 b FGF基因的表达及 MK- 80 1对它们的影响。结果 缺血 2 h再灌流 1h可见 b FGF表达增高 (P<0 .0 5 ) ,b FGF m RNA表达于 12 h达高峰 ,b FGF蛋白于 2 4h达高峰 ;MK- 80 1组与缺血组相比 ,于再灌流 6 h～ 48h b FGF表达减弱 (P<0 .0 5 )。结论 局灶性脑缺血再灌流可诱导 b FGF表达 ,MK- 80 1则能抑制脑缺血后 b FGF的表达。

MK-801与抗癫痫药合用对大鼠杏仁核点燃的影响(英文)

目的 在大鼠杏仁核点燃模型研究MK 80 1(地佐西平 )及其联合用药的抗癫痫作用。方法 建立大鼠杏仁核慢性电刺激点燃模型 ,测定不同剂量的MK 80 1对点燃模型各项指标的影响 ,探讨MK 80 1与其他抗癫痫药的协同作用 ,用氨基脲诱发的小鼠惊厥模型测定MK 80 1抗惊厥作用。结果 MK 80 1(0 1～ 0 2 5mg·kg- 1)可剂量依赖性抑制杏仁核点燃 ,缩短后放电时程 ,降低Racine’s分级 ;在对点燃均无明显影响的剂量下 ,MK 80 1(0 0 5mg·kg- 1)与抗癫痫药 (苯巴比妥、丙戊酸及尼卡地平 )合用可缩短后放电时程或降低Racine’s分级。MK 80 1(0 1～ 0 2 5mg·kg- 1)显著降低小鼠氨基脲诱发的发作潜伏期、惊厥发生率和死亡率。结论 MK 80 1具有抑制大鼠杏仁核点燃的作用 ,增强苯巴比妥、丙戊酸及尼卡地平的抗癫痫活性 。

离子型谷氨酸受体拮抗剂MK-801浓度与全脑缺血再灌注大鼠海马内源性神经干细胞的增殖

背景:脑缺血再灌注后,过度释放的兴奋性氨基酸可通过N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体激活内源性神经干细胞,促使其增殖、分化,修复神经细胞,但同时也导致细胞内钙离子超载,引起神经细胞的损伤。目的:观察NMDA受体拮抗剂MK-801浓度对脑缺血再灌注大鼠海马内源性神经干细胞增殖的影响。方法:SD大鼠随机分为正常对照组、手术对照组及MK-8010.2,0.4,0.6,0.8,1.0,1.2mg/kg组。除正常对照组外,大鼠首先进行侧脑室插管,3d后进行4条血管阻断方法制备大鼠全脑缺血再灌注模型。在模型制作前30min按照不同浓度侧脑室注射MK-801。正常对照组和手术对照组侧脑室注射同剂量的生理盐水。免疫组织化学、RT-PCR技术检测各组脑海马nestin阳性细胞及其mRNA表达。结果与结论:MK-801浓度在0.8mg/kg以下时,用药组大鼠脑海马nestin mRNA及蛋白的表达与手术对照组差异无显著性意义(P>0.05),呈现高表达;当MK-801浓度达到0.8mg/kg时,与手术对照组相比,用药组大鼠脑海马nestin基因及蛋白的表达明显下降(P<0.05),并随浓度的增高呈递减趋势。提示MK-801在浓度为0.6mg/kg时,即可抑制钙超载保护神经元,又有良好的刺激神经干细胞增殖作用。

纳络酮、地卓西平(MK-801)对大鼠食物渴求的影响

实验以条件性位置偏爱(CPP)的表达为渴求模型观察纳络酮及MK-801对大鼠食物CPP表达的影响,探讨摄食行为调控的心理机制。48只SD大鼠分成食物组(24)与对照组(24), 3轮食物匹配训练后,在CPP表达前分别注射生理盐水、纳络酮(1. 0mg kg-1 )及MK-801(0. 1mg kg-1 ),观察各组动物在食物匹配训练侧停留时间的变化。结果发现,MK-801促进食物CPP的表达,但纳络酮对食物CPP的表达没有显著影响。以上结果表明MK-801(0. 1mg kg-1 )增强动物的食物渴求至少是其增加摄食量的原因之一,而1. 0mg kg-1的纳络酮降低动物的摄食量并不是由于食物渴求的下降导致的。MK-801与纳络酮调节动物摄食行为的心理机制可能不一致。

MK-801诱发精神分裂症对大鼠探索能力、疼痛反应及海马神经细胞增殖的影响

目的:观察大鼠精神分裂症后探索能力、痛觉及海马齿状回颗粒细胞层神经细胞增殖的改变。方法:MK-801腹腔注射制备精神分裂症动物模型,分别监测给药后第1、5、10、14 d大鼠的探洞次数和甩尾时间。Brdu标记后取材,应用免疫荧光染色和激光共聚焦显微技术观察海马齿状回神经细胞的增殖情况。结果:①洞板试验:实验组大鼠的探洞次数较对照组显著下降(P<0.01),且随着MK-801给药时间的增加而减少(P<0.01);②甩尾试验:实验组大鼠对疼痛刺激的反应时间较对照组缩短(P<0.01),且随着MK-801给药时间的延长痛觉敏感度不断增加(P<0.01);③神经细胞的增殖:停药后第1 d,实验组海马齿状回颗粒层神经细胞增殖数较对照组减少(P<0.05),第16 d两组间无显著差异(P>0.05)。结纶:MK-801诱发精神分裂症后可致大鼠的探索能力减退、痛觉敏感,同时可降低海马齿状回颗粒细胞层神经细胞的增殖。

戊四氮诱导发育鼠癫癎持续状态后海马神经发生及MK-801的影响

目的探讨戊四氮诱导发育期大鼠癫癎持续状态(SE)后对海马内齿状回颗粒细胞神经发生的影响以及N-甲基D-天冬氨酸受体(NMDAR)拮抗剂MK-801对此结果的抑制作用,从而研究癫癎发作后发育脑海马内神经发生及NMDAR在神经发生中的作用。方法SD大鼠7,14,21,28d4个日龄组共216只,每组均为54只,每个日龄组大鼠随机分SE组、MK-801组和正常对照组,每组18只。采用5-溴脱氧尿核苷(BrdU)标记新生细胞,再以β微管蛋白Ⅲ(TuJ1)、胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)分别标记早期神经元和胶质细胞的单、双标免疫组织化学方法,检测PTZ诱导癫癎持续状态后发育鼠海马齿状回(dentategyrus,DG)神经发生,并用MK-801治疗后观察对其的影响。结果BrdU注射后第7天和第14天,SE组各日龄幼鼠齿状回BrdU阳性细胞数明显高于同日龄的正常对照组,其中约有80%同时表达TuJ1;MK-801组BrdU阳性细胞数较SE组明显减少(P<0.01),而在第28天三组之间BrdU阳性细胞数无明显差异(P>0.05)。结论癫癎发作可增加幼鼠齿状回颗粒细胞的神经发生,而NMDAR在癫癎后的神经发生中起着促进作用。

MK-801对大鼠局灶性脑缺血损伤时的脑保护作用

目的：在大脑中动脉闭塞后，血脑屏障通透性的改变，脑水肿和脑梗塞是最常见的病理变化。本实验观察了MK－801（dizocilpine，一种高效非竞争性NMDA受体拮抗剂）在大鼠大脑中动脉闭塞时的脑保护作用。方法：用插线法制作局灶性脑缺血模型后，测定血脑屏障通透性，脑含水量，缺血损伤面积和体积。结果：缺血组梗塞侧皮质EB含量为：（8．82±1．35）μgweiht，在缺血前30min加入MK－801组梗塞侧皮质伊文思蓝（EB）含量下降为：（5．14±1．20）μg／gweight（P＜0．01），在缺血后30min加入MK－801组梗塞侧皮质EB含量下降为：（6．44±1．09）μg／gweight（P＜0.05）；缺血组梗塞侧脑含水量为：（80．29±2．44）％，在缺血前对30min加入MK－801组梗塞侧脑含水量下降为：（75．62±1．84）％（P＜0．01），在缺血后30min加入MK-801组梗塞侧脑含水量下降为：（76．39±2．20）％（P＜0．01）；缺血组梗塞体积为：（495.75±55．91）mm3，在缺血前30min加入MK-801组梗塞体积下降为：（180．65±9．67）mm3（P＜0．01），在缺血后则30min加入MK-801组梗塞体积下降为：（316.08±．93）mm3（P＜0．05）。结论：MK-801不仅可防止脑梗塞体积扩大，还可改善血脑屏障通透性和降低脑水肿，而具有脑保护作用。

谷氨酸及NMDA受体拮抗剂MK-801对大鼠伏核痛兴奋神经元电活动的影响

本文研究了谷氨酸(glutamicacid,Glu)及其NMDA受体拮抗剂5-甲基二氢丙环庚烯亚胺马来酸(MK-801)对大鼠伏核(nucleusaccumbens,NAc)痛兴奋神经元(pain-excitationneurons,PEN)痛诱发反应的影响。电刺激坐骨神经作为伤害性刺激,用玻璃微电极记录NAc的PEN放电,观察脑室内注射Glu和NAc内注射MK-801对大鼠NAc中PEN伤害性诱发活动的影响。结果显示,伤害性刺激可使NAc的PEN电活动增强;脑室内注射Glu(10nmol/10μ1)可使NAc的PEN伤害性诱发放电频率增加;NAc内注射MK-801(1.0nmol/0.5μ1)可阻断这种作用;MK-801本身也可部分抑制PEN伤害性诱发反应。上述结果表明,Glu对PEN伤害性反应的易化作用是通过NMDA受体介导的;Glu和NMDA受体参与NAc伤害性信息传递的调制。

MK-801对新生大鼠高氧性肺损伤的保护作用

目的观察谷氨酸(Glu)的NMDA受体拮抗剂MK-801对新生大鼠高氧性肺损伤的影响,探讨Glu在高氧性肺损伤中的可能作用。方法出生12h内的SD新生大鼠随机分为:空气对照组、空气+MK-801组、高氧对照组及高氧+MK-801组。观察持续高氧暴露7d后各组肺湿/干重比(W/D)、支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞及中性粒细胞数、肺组织及BALF中一氧化氮(NO)含量的变化。结果MK-801可有效地抑制高氧所致新生大鼠肺W/D、BALF中白细胞和中性粒细胞、肺组织和BALF中NO含量的增高。结论MK-801可有效地减轻新生大鼠高氧性肺损伤,提示内源性Glu通过NMDA受体介导,促进NO的产生而加重肺损伤。

侧脑室注射谷氨酸、MK-801及氯氨酮对大鼠吗啡戒断症状的影响

目的研究中枢N-甲基-D-天冬氨酸受体(NMDA)系统的功能变化与吗啡依赖大鼠戒断症状的关系。方法建立吗啡依赖大鼠模型,纳洛酮催瘾后,分别侧脑室注射谷氨酸、MK-801、氯氨酮,观察其对大鼠戒断症状的影响。结果谷氨酸使大鼠咬牙、湿狗样抖动、扭体、添阴茎、体重减轻等项体征的评分显著增高,而MK-801及氯氨酮则相反。结论中枢NMDA系统的功能变化可显著影响吗啡依赖大鼠的戒断症状。本研究为用非阿片类药物治疗阿片耐受和成瘾提供了实验依据。

应用NMDA受体拮抗剂MK-801治疗局灶性脑缺血的实验研究

目的 :研究N 甲基 D 门冬氨酸 (NMDA)受体拮抗剂MK 80 1对大鼠局灶性脑缺血模型的治疗作用和治疗时窗 ,为临床治疗提供依据。方法 :采用线栓法阻塞大鼠右侧大脑中动脉制成局灶性脑缺血模型。以 [3H]噻吩环己哌啶 ([3H]TCP)为配基 ,采用宏观和微观放射自显影术观察不同时间缺血组和给药组NMDA受体通道的活性变化。结果 :缺血前及缺血 2h内给予MK 80 1(0 .8mg/kg体重 )可有效拮抗NMDA受体的过度激活。而缺血 3h后给药则无此作用。结论 :MK 80 1对局灶性脑缺血的治疗时窗在