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中国明对虾MKK3基因cDNA克隆及其在氨氮胁迫下的表达 被引量:1
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作者 姚万龙 何玉英 +2 位作者 刘萍 李健 王清印 《中国水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期34-43,共10页
采用RACE技术克隆获得中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis)丝裂原活化蛋白激酶激酶3(MKK3)基因全长c DNA序列,并对该序列进行分析。结果表明,该基因全长为1434 bp,开放阅读框长1011 bp,5′非编码区长33 bp,3′非编码区长390 bp,将该... 采用RACE技术克隆获得中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis)丝裂原活化蛋白激酶激酶3(MKK3)基因全长c DNA序列,并对该序列进行分析。结果表明,该基因全长为1434 bp,开放阅读框长1011 bp,5′非编码区长33 bp,3′非编码区长390 bp,将该基因命名为Fc MKK3。推测该基因编码336个氨基酸,分子量为37.89 k D,理论等电点为6.08。同源性和系统进化分析表明,Fc MKK3基因与丽蝇蛹集金小蜂(Nasonia vitripennis)和地中海实蝇(Ceratitis capitata)的相似性分别为69%和68%,与其他节肢动物MKK3聚为一类。荧光定量RT-PCR结果表明,Fc MKK3基因在肌肉中的相对表达量最高,其次为鳃。氨氮胁迫后该基因在中国明对虾肠、鳃、胃、心脏、肝胰腺、肌肉和血细胞中的表达量均显著增加,并有不同的时空表达趋势,表明Fc MKK3基因可能在中国明对虾应对非生物胁迫反应的过程中起着重要的作用。 展开更多
关键词 中国明对虾 mkk3基因 氨氮胁迫 基因克隆 组织表达
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乙型肝炎病毒X蛋白对肝癌细胞MKK3,p38MAPK表达的影响 被引量:3
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作者 蒲长宇 周后龙 +2 位作者 彭亮 宋扬 冯英明 《现代肿瘤医学》 CAS 2011年第4期640-644,共5页
目的:观察乙型肝炎病毒X蛋白对肝癌细胞中丝裂原活化蛋白激酶(MKK3)及其下游分子p38丝裂酶原活化的蛋白激酶(p38MAPK)的表达的影响,探讨相关的信号转导机制,及其对肝癌细胞生物学行为的影响。方法:分别将质粒pCDNA3.1及pCDNA3.1-HBx重... 目的:观察乙型肝炎病毒X蛋白对肝癌细胞中丝裂原活化蛋白激酶(MKK3)及其下游分子p38丝裂酶原活化的蛋白激酶(p38MAPK)的表达的影响,探讨相关的信号转导机制,及其对肝癌细胞生物学行为的影响。方法:分别将质粒pCDNA3.1及pCDNA3.1-HBx重组质粒经脂质体介导转染人肝癌细胞株HepG2,G418筛选培养,并用反转录PCR和Western blot鉴定,获得表达X蛋白的稳定细胞株HepG2-HBx和阴性对照细胞株HepG2-pCDNA3.1,以HepG2细胞株作空白对照。通过RT-PCR和Western blot检测上述三种细胞株中MKK3,p38MAPK在mRNA水平和蛋白水平的表达变化,并用细胞免疫荧光法检查磷酸化p38MAPK蛋白在细胞浆及细胞核中的变化;通过MTT实验检测三种细胞株的增殖情况。采用SPSS 12软件进行统计学分析。结果:MKK3在mRNA和总蛋白水平的表达在HepG2-HBx中均高于其他两组,其他两组无明显差异;p38MAPK在mRNA和总蛋白水平三组无明显差异,而其蛋白磷酸化水平和在核蛋白中的表达在HepG2-HBx中较其他两组升高;HepG2-HBx较其他两组细胞有更强的增殖能力。结论:HBx可以通过上调肝癌细胞中MKK3的表达,促进p38MAPK磷酸化和入核,从而进一步激活下游分子发挥生物活性。p38MAPK通路在HBx促进肝癌细胞的增殖中发挥重要作用。可能是导致HBV相关性肝癌与非HBV相关性肝癌临床特点及肿瘤生物学差异的机制之一。 展开更多
关键词 X蛋白 丝裂原活化蛋白激酶 p38丝裂酶原活化的蛋白激酶
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电针内关预处理对心肌缺血再灌注模型大鼠TNF-α、IL-1β与MKK3/6-p38MAPK通路的影响 被引量:7
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作者 韩永丽 吴松 +4 位作者 陈松 王华 梁凤霞 黄伟 周焕娇 《辽宁中医杂志》 CAS 2018年第12期2645-2648,共4页
目的:探讨电针内关预处理对心肌缺血再灌注大鼠炎性因子TNF-α、IL-1β与MKK3/6-p38MAPK通路的影响。方法:将90只大鼠随机分为9组:假手术组(S组)、模型组(M组)、电针预处理组(EA组)、抑制剂预处理组(SB组)、电针+抑制剂预处理组(EA+SB组... 目的:探讨电针内关预处理对心肌缺血再灌注大鼠炎性因子TNF-α、IL-1β与MKK3/6-p38MAPK通路的影响。方法:将90只大鼠随机分为9组:假手术组(S组)、模型组(M组)、电针预处理组(EA组)、抑制剂预处理组(SB组)、电针+抑制剂预处理组(EA+SB组)、缺血预处理组(IP组)、缺血预处理+抑制剂预处理组(SB+IP组)、药物预处理组(DP组)和药物预处理+抑制剂预处理组(DP+SB组)。进行相应组电针内关穴,治疗结束后,测定大鼠心肌TNF-α、IL-1β的含量,检测各组MKK3/6、p38MAPK、p-p38MAPK的含量。结果:与M组比较,S组、EA组、SB组、EA+SB组、IP、IP+SB、DP及DP+SB大鼠心肌TNF-α、IL-1β及MKK3/6、p38MAPK和p-p38MAPK蛋白的表达明显降低;EA组的上述指标与EA+SB组和SB组比较,显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。EA组的上述指标与IP组和DP组比较,差异没有统计学意义(P<0.05)。结论:p38MAPK信号通路介导了电针内关预处理对I/R大鼠心肌组织的保护作用,并且上游激活物包括参与炎症反应和氧化应激反应的各类相关细胞因子,参与I/R的保护效应。 展开更多
关键词 电针 预处理 缺血再灌注 TNF-α IL-1Β mkk3/6-p38MAPK通路
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大鼠MKK3蛋白的生物信息学分析 被引量:1
4
作者 赵小峰 吴桂梅 +2 位作者 金磊 汪瑶 贺玲 《安徽农业科学》 CAS 2018年第13期114-117,共4页
[目的]对大鼠MKK3蛋白进行生物信息学分析,预测其结构和功能,可以为进一步研究大鼠MKK3蛋白的功能提供试验基础。[方法]利用生物信息学工具对大鼠MKK3蛋白的理化性质、跨膜区域、空间结构、磷酸化位点、相互作用等进行预测。[结果]大鼠M... [目的]对大鼠MKK3蛋白进行生物信息学分析,预测其结构和功能,可以为进一步研究大鼠MKK3蛋白的功能提供试验基础。[方法]利用生物信息学工具对大鼠MKK3蛋白的理化性质、跨膜区域、空间结构、磷酸化位点、相互作用等进行预测。[结果]大鼠MKK3蛋白由347个氨基酸残基组成,等电点为7.05,相对分子质量39.3 k D,在哺乳动物中高度保守。二级结构主要由α-螺旋、β-折叠和无规卷曲构成,结构上含一个S_TKc结构域。MKK3能与多种MAPK、Tab1、Tab2、Traf6等蛋白发生相互作用。[结论]大鼠MKK3蛋白是一种不含信号肽和跨膜区的亲水蛋白,具有激酶活性,可参与p38MAPK信号通路在炎症和肿瘤的发生发展过程中发挥重要作用。该研究为进一步研究大鼠MKK3蛋白的功能提供了试验依据。 展开更多
关键词 大鼠 mkk3 序列分析 生物信息学分析
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肾衰饮通过TGFβ1/MKK3/p38MAPK/CTGF途径对肾间质纤维化大鼠的影响及分子机制
5
作者 刘烨 任艳玲 +1 位作者 李志明 郭玲 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期2592-2598,共7页
目的从TGFβ1/MKK3/p38MAPK/CTGF途径角度,探讨肾衰饮延缓大鼠肾间质纤维化的可能作用机制。方法将60只雄性SD大鼠适应性喂养3天后,按体重随机分为两组,即假手术组10只,造模组50只。造模采用左侧输尿管结扎术建立肾间质纤维化大鼠模型... 目的从TGFβ1/MKK3/p38MAPK/CTGF途径角度,探讨肾衰饮延缓大鼠肾间质纤维化的可能作用机制。方法将60只雄性SD大鼠适应性喂养3天后,按体重随机分为两组,即假手术组10只,造模组50只。造模采用左侧输尿管结扎术建立肾间质纤维化大鼠模型。造模成功后,将大鼠再随机分为五组:模型组,肾衰饮低剂量组,肾衰饮中剂量组,肾衰饮高剂量组及尿毒清组。分别按人与大鼠1:1/2,1:1,1:2和1:1灌胃各给药组大鼠,假手术组与模型组予生理盐水0.00015ml/10g灌胃,M组:9.56 g/(kg·d)。实验期间进行一般情况观察,灌胃治疗14天后结束实验,各组大鼠禁食、不禁水12小时,第二日早8:00称重,进行取材。收集24小时尿,全自动生化分析仪一次性检测尿肌酐(UCr)、微球蛋白(β2-MG)及尿微量白蛋白(mAlb)含量,髂总动脉分支处穿刺采血测定血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)含量;HE染色和Masson染色观察肾脏组织病理学改变及胶原沉积情况;免疫组织化学法检测肾脏组织相关蛋白表达;实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测肾脏组织miRNA21及相关mRNA的表达水平;免疫印迹法(Western Blot)检测肾脏组织相关蛋白表达水平。结果与假手术组大鼠比较,模型组大鼠精神倦怠,明显消瘦,排便、排尿异常。Scr、BUN、Ucr、β2-MG、mAlb显著升高(P<0.01)。HE染色模型组大鼠可见系膜增生,肾小管扩张或萎缩,肾小球硬化且形态不规则,球囊粘连,纤维化组织增多,间质增宽,可见炎性细胞浸润。Masson染色可见大鼠肾脏组织可见系膜增厚,可见大量肌成纤维广泛表达和胶原纤维沉积,模型组大鼠肾脏组织模型组大鼠肾脏组织TGF-β1、ASK-1、MKK3、CTGF、α-SMAmRNA的表达显著增高(P<0.01或P<0.05),E-cadherinmRNA的表达明显降低(P<0.05),TGF-β1、ASK-1、MKK3、p-p38MAPK、p-ATF2、CTGF、MEF2C蛋白水平显著增高(P<0.01或P<0.05);经给药治疗后,各给药组大鼠上述指标均明显好转(P<0.01或P<0.05),其中以肾衰饮高剂量组最为显著,明显优于尿毒清组(P<0.01或P<0.05)。结论肾衰饮可能通过抑制TGFβ1/MKK3/p38MAPK/CTGF途径,改善ECM降解酶系统功能异常,延缓肾间质纤维化。 展开更多
关键词 肾衰饮 肾间质纤维化 TGFβ1/mkk3/p38MAPK/CTGF 炎症
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The MKK3–MPK7 cascade phosphorylates ERF4 and promotes its rapid degradation to release seed dormancy in Arabidopsis 被引量:1
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作者 Xi Chen Qiujia Li +14 位作者 Ling Ding Shengnan Zhang Siyao Shan Xiong Xiong Wenhui Jiang Bo Zhao Liying Zhang Ying Luo Yiming Lian Xiuqin Kong Xiali Ding Jun Zhang Chunli Li Wim J.J.Soppe Yong Xiang 《Molecular Plant》 SCIE CSCD 2023年第11期1743-1758,共16页
Seeds establish dormancy to delay germination until the arrival of a favorable growing season.In this study,we identify a fate switch comprised of the MKK3–MPK7 kinase cascade and the ethylene response factor ERF4 th... Seeds establish dormancy to delay germination until the arrival of a favorable growing season.In this study,we identify a fate switch comprised of the MKK3–MPK7 kinase cascade and the ethylene response factor ERF4 that is responsible for the seed state transition from dormancy to germination.We show that dormancy-breaking factors activate the MKK3–MPK7 module,which affects the expression of some a-EXPANSIN(EXPA)genes to control seed dormancy.Furthermore,we identify a direct downstream substrate of this module,ERF4,which suppresses the expression of these EXPAs by directly binding to the GCC boxes in their exon regions.The activated MKK3–MPK7 module phosphorylates ERF4,leading to its rapid degradation and thereby releasing its inhibitory effect on the expression of these EXPAs.Collectively,our work identifies a signaling chain consisting of protein phosphorylation,degradation,and gene transcription,by which the germination promoters within the embryo sense and are activated by germination signals from ambient conditions. 展开更多
关键词 seed dormancy dormancy breaking seed germination mkk3 MPK7 ERF4 PHOSPHORYLATION protein degradation DNA binding
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大黄灵仙方调控肝内胆管细胞炎症大鼠的作用及机制研究
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作者 庞浇安 俞渊 +7 位作者 付军 叶桂源 陈伟棠 罗艳萍 滕金豪 刘春丽 肖丽君 李承积 《海南医学院学报》 CAS 北大核心 2024年第16期1201-1209,共9页
目的:观察大黄灵仙方对肝内胆管细胞炎症模型大鼠MAPK/NF⁃κB信号通路中IKKα、ASK1、MKK3以及CX3CL1关键因子的表达水平的影响,探讨其缓解肝内胆管细胞炎症的改善作用及可能机制。方法:45只SD大鼠按照完全随机方法分为9组,每组大鼠5只... 目的:观察大黄灵仙方对肝内胆管细胞炎症模型大鼠MAPK/NF⁃κB信号通路中IKKα、ASK1、MKK3以及CX3CL1关键因子的表达水平的影响,探讨其缓解肝内胆管细胞炎症的改善作用及可能机制。方法:45只SD大鼠按照完全随机方法分为9组,每组大鼠5只,空白组、模型组、大黄灵仙颗粒组、NF⁃κB组、p38MAPK组、NF⁃κB+p38MAPK组、NF⁃κB+大黄灵仙颗粒组、p38MAPK+大黄灵仙颗粒组、NF⁃κB+p38MAPK+大黄灵仙颗粒组。除空白组外,余下各组大鼠均在胆总管注射5 mg/kg LPS制备肝内胆管炎症模型。第7天灌胃结束后取大鼠胆管树,采用HE染色观察其炎性程度,蛋白免疫印迹法和实时荧光定量PCR检测IKKα、ASK1、MKK3以及CX3CL1蛋白及mRNA表达量。结果:HE病理结果显示,模型组的肝内胆管组织和细胞炎症明显,加入大黄灵仙颗粒和信号阻断剂后肝内胆管炎症状态较前改善,总病理评分差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,大黄灵仙颗粒组、p38MAPK组、NF⁃κB组、NF⁃κB+p38MAPK组、NF⁃κB+大黄灵仙颗粒组、p38MAPK+大黄灵仙颗粒组、NF⁃κB+p38MAPK+大黄灵仙颗粒组的ASK1、CX3CL1蛋白及mRNA表达量下降,MKK3 mRNA表达量上升以及p38MAPK组IKKα和NF⁃κB+大黄灵仙颗粒组MKK3蛋白表达量上升(P<0.05)。与大黄灵仙颗粒组比较,p38MAPK组、NF⁃κB组、NF⁃κB+p38MAPK组、p38MAPK+大黄灵仙颗粒组、NF⁃κB+大黄灵仙颗粒组、NF⁃κB+p38MAPK+大黄灵仙颗粒组的ASK1、CX3CL1 mRNA表达量下降,p38MAPK+大黄灵仙颗粒组、NF⁃κB+大黄灵仙颗粒组、NF⁃κB+p38MAPK+大黄灵仙颗粒组的MKK3 mRNA表达量上升(P<0.05)。与大黄灵仙颗粒组相比,p38MAPK组的IKKα蛋白表达量下降,NF⁃κB+大黄灵仙颗粒组的ASK1、MKK3蛋白表达量上升(P<0.05),而NF⁃κB+p38MAPK+大黄灵仙颗粒组的CX3CL1蛋白表达量下降(P>0.05)。结论:大黄灵仙方可缓解LPS诱导的大鼠肝内胆管炎症反应,促进胆管细胞的修复,从而达到降低PIS发生及术后复发的目的,其作用机制可能与抑制NF⁃κB/MAPK信号通路中的IKKα、ASK1、MKK3以及CX3CL1关键炎症因子的活化有关。 展开更多
关键词 大黄灵仙方 胆管炎症 IKKα ASK1 mkk3 CX3CL1
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MKK3抑制巨噬细胞炎性体活化
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作者 李坤瑀 于水星 +4 位作者 周风华 胡桂秋 韩文瑜 陈巍 杨勇军 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期850-853,858,共5页
为了探究MKK3对小鼠巨噬细胞炎性体活化过程中的调控作用,无菌分离培养野生型与MKK3基因缺失小鼠原代腹腔来源巨噬细胞,以LPS联合ATP经典方法诱导炎性体活化,并分别采用Western blot和ELISA的方法分析检测Caspase-1的活化、ASC的表达以... 为了探究MKK3对小鼠巨噬细胞炎性体活化过程中的调控作用,无菌分离培养野生型与MKK3基因缺失小鼠原代腹腔来源巨噬细胞,以LPS联合ATP经典方法诱导炎性体活化,并分别采用Western blot和ELISA的方法分析检测Caspase-1的活化、ASC的表达以及细胞因子IL-1β和TNF-α的分泌量。结果表明,与野生型小鼠巨噬细胞处理组比较,巨噬细胞缺失MKK3基因Caspase-1活化显著,ASC表达增加,IL-1β分泌也显著增加,而TNF-α分泌量差异不显著。即MKK3抑制小鼠巨噬细胞炎性体活化,对小鼠巨噬细胞炎性体活化具有负调控作用。 展开更多
关键词 mkk3 巨噬细胞 炎性体
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增生性瘢痕内p38丝裂素活化蛋白激酶及其MAPKKs基因的表达 被引量:3
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作者 陈伟 付小兵 +4 位作者 孙晓庆 赵志力 周岗 孙同柱 盛志勇 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第7期592-593,共2页
为探讨增生性瘢痕和正常皮肤中p3 8丝裂素活化蛋白激酶 ( p3 8MAPK)及其上游信号分子mkk3和mkk6基因表达的变化 ,提取 8例增生性瘢痕和 8例正常皮肤组织的总RNA后 ,分离纯化mRNA ,用RT PCR方法检测这 3种基因在不同组织中的表达变化规... 为探讨增生性瘢痕和正常皮肤中p3 8丝裂素活化蛋白激酶 ( p3 8MAPK)及其上游信号分子mkk3和mkk6基因表达的变化 ,提取 8例增生性瘢痕和 8例正常皮肤组织的总RNA后 ,分离纯化mRNA ,用RT PCR方法检测这 3种基因在不同组织中的表达变化规律。结果显示 ,在正常皮肤组织中 ,mkk6和p3 8MAPK基因表达较弱 ,而在增生性瘢痕内 ,这 2种基因PCR产物的灰度比分别为正常皮肤的 1 2倍和 1 9倍 ,基因表达量明显升高 (P <0 0 5和P <0 0 1) ,而mkk3在这两种不同类型组织中的表达量没有显著性差异 (P >0 0 5 )。提示增生性瘢痕的发生可能与mkk6和 p3 8MAPK基因表达升高有关 。 展开更多
关键词 P38MAP激酶 mkk3基因 mkk6基因 瘢痕
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MEK信号通路活化在榄香烯致人源U87MG胶质瘤细胞增殖抑制及G0/G1细胞周期阻滞中的作用 被引量:2
10
作者 朱廷准 徐英辉 +2 位作者 李晓明 罗力涵 梁国标 《实用药物与临床》 CAS 2013年第1期1-5,共5页
目的探讨MKK3和MKK6在榄香烯致人U87MG胶质瘤细胞增殖抑制和细胞周期阻滞中的作用。方法以不同浓度榄香烯作用于人U87MG及U251胶质瘤细胞,应用噻唑蓝(MTT)法检测细胞活性。West-ern blot检测MEK信号通路中MKK3和MKK6的总蛋白及磷酸化蛋... 目的探讨MKK3和MKK6在榄香烯致人U87MG胶质瘤细胞增殖抑制和细胞周期阻滞中的作用。方法以不同浓度榄香烯作用于人U87MG及U251胶质瘤细胞,应用噻唑蓝(MTT)法检测细胞活性。West-ern blot检测MEK信号通路中MKK3和MKK6的总蛋白及磷酸化蛋白含量。通过转染显性负突变质粒DN-MKK3和DN-MKK6,抑制MKK3和MKK6的活性。然后分别行MTT法和流式细胞术检测榄香烯对胶质瘤细胞的增殖抑制和细胞周期阻滞作用。结果榄香烯显著抑制了人胶质瘤细胞的增殖,呈时间和浓度依赖性,并可使细胞中MKK3和MKK6的磷酸化水平上调。抑制MKK3和MKK6的活性则可显著削弱榄香烯的抗胶质瘤增殖和G0/G1细胞周期阻滞作用。结论榄香烯可以通过将胶质瘤细胞的细胞周期阻滞于G0/G1期,进而有效地抑制肿瘤细胞增殖,且MKK3和MKK6信号通路的激活在其中发挥着不可或缺的作用。 展开更多
关键词 榄香烯 胶质瘤 mkk3 MKK6
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胎儿和出生后机体皮肤内p38MAPK及其MAPKKs基因表达变化的比较性研究 被引量:1
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作者 陈伟 付小兵 +5 位作者 葛世丽 姜笃银 周岗 孙同柱 韩冰 盛志勇 《感染.炎症.修复》 2003年第2期96-99,共4页
目的:探讨p38丝裂素活化蛋白激酶(p38MAPK)及其上游信号分子MAPKKs(mkk3和mkk6)基因在不同胎龄的胎儿皮肤和出生后机体皮肤组织中表达的变化及其可能的生物学意义。方法:用病理学技术检测不同发育时期皮肤的结构特征后,提取18例不同胎龄... 目的:探讨p38丝裂素活化蛋白激酶(p38MAPK)及其上游信号分子MAPKKs(mkk3和mkk6)基因在不同胎龄的胎儿皮肤和出生后机体皮肤组织中表达的变化及其可能的生物学意义。方法:用病理学技术检测不同发育时期皮肤的结构特征后,提取18例不同胎龄(13~32周)的胎儿皮肤和6例出生后机体皮肤组织的总RNA,分离mRNA,用RT-PCR方法检测这3种基因在不同组织中的表达变化规律。结果:p38MAPK,mkk3和mkk6基因在不同发育阶段的皮肤组织中都有表达。在早期妊娠胎儿的皮肤组织中,这3种基因表达较强,随着胎儿的生长和发育,皮肤组织内这3种基因表达逐渐减弱。在出生后机体的皮肤细胞中,p38MAPK,mkk3和mkk6基因的表达量分别为妊娠早期皮肤的39.6%,63.5%和54.5%,基因表达明显减弱(P<0.01)。结论:p38MAPK,mkk3和mkk6基因在不同发育阶段人皮肤组织内都有表达,显示细胞外信号引起的p38MAPK信号通路可能对皮肤的发生、结构功能的维持以及伤后修复十分重要。在早期妊娠胎儿皮肤中p38MAPK及其上游信号分子MAPKKs基因的高表达可能是胎儿皮肤组织细胞快速增殖,皮肤创面无瘢痕愈合的机制之一,但深层次机制还需进一步研究。 展开更多
关键词 P38丝裂素活化蛋白激酶 mkk3基因 mkk6基因 胎儿皮肤
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胎儿和出生后机体皮肤内p38MAPK及MAPKKs基因表达变化的比较性研究 被引量:5
12
作者 陈伟 付小兵 +5 位作者 葛世丽 姜笃银 周岗 孙同柱 韩冰 盛志勇 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期291-295,共5页
目的 探讨p38丝裂素活化蛋白激酶(p38mitogen- activated protein kinase,p38MAPK)及其上游信号分子MAPKKs(mkk3和mkk6 )基因,在不同胎龄胎儿皮肤和出生后机体皮肤组织中表达的变化,及其可能的生物学意义。 方法 用病理学技术检测不... 目的 探讨p38丝裂素活化蛋白激酶(p38mitogen- activated protein kinase,p38MAPK)及其上游信号分子MAPKKs(mkk3和mkk6 )基因,在不同胎龄胎儿皮肤和出生后机体皮肤组织中表达的变化,及其可能的生物学意义。 方法 用病理学技术检测不同发育时期皮肤的结构特征后,提取18例不同胎龄(13~32周)的胎儿皮肤和6例出生后机体皮肤组织(作为对照)的总RNA,分离m RNA,用逆转录-聚合酶链反应(reverse transcription- polymerasechain reaction,RT- PCR)方法检测3种基因在不同组织中的表达规律。 结果 p38MAPK,m kk3和mkk6基因在不同发育阶段的皮肤组织中都有表达。在早期妊娠胎儿的皮肤组织中,这三种基因表达较强,随着胎儿的生长发育,皮肤组织内这三种基因表达逐渐减弱。在出生后机体的皮肤细胞中,p38MAPK、mkk3和mkk6基因的表达量分别为妊娠早期皮肤的39.6 %、6 3.5 %和5 4 .5 % ,明显减弱(P<0 .0 1)。 结论 p38MAPK、mkk3和mkk6基因在不同发育阶段人皮肤组织内都有表达,显示细胞外信号引起的p38MAPK信号通路可能对皮肤的发生、结构功能的维持以及伤后修复十分重要。在早期妊娠胎儿皮肤中p38MAPK及其上游信号分子MAPKKs基因的高表达可能是胎儿皮肤组织细胞快速增殖、皮肤创面无瘢痕愈合的机制之一。 展开更多
关键词 P38MAPK 出生后 基因表达变化 比较性研究 机体 P38丝裂素活化蛋白激酶 逆转录-聚合酶链反应 mkk6基因 MAPK信号通路 protein 皮肤组织 胎儿皮肤 信号分子 不同胎龄 早期妊娠 发育阶段 生物学意义 chain 细胞外信号 MAPKK
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缬沙坦对高糖培养的肾小球系膜细胞p38MAPK传导通路的影响 被引量:4
13
作者 王丽晖 段惠军 +2 位作者 史永红 刘青娟 刘淑霞 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期501-505,共5页
目的探讨高糖状态下肾小球系膜细胞中p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)、其上游因子MAPK激酶3/6(MKK3/6)和下游因子cAMP反应元件结合蛋白1(CREB1)的表达以及血管紧张素受体1拮抗剂(AT1Ra)缬沙坦的影响。方法体外培养大鼠肾小球系膜细胞... 目的探讨高糖状态下肾小球系膜细胞中p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)、其上游因子MAPK激酶3/6(MKK3/6)和下游因子cAMP反应元件结合蛋白1(CREB1)的表达以及血管紧张素受体1拮抗剂(AT1Ra)缬沙坦的影响。方法体外培养大鼠肾小球系膜细胞,分别给予高糖和缬沙坦干预,采用Western bolt检测MKK3/6、p38 MAPK和CREB1及其磷酸化蛋白的表达,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测系膜细胞内TGF-β1和FN mRNA的表达。放免法测定细胞上清液中纤维连接蛋白(FN)和IV型胶原的含量。MTT法检测缬沙坦在不同时间、不同药物浓度对细胞增殖状态的影响。结果①与低糖对照组相比,高糖组系膜细胞p-p38 MAPK、p-MKK3/6和p-CREB1表达明显上调,TGF-β1和FN mRNA的表达增加,FN和IV型胶原含量增加。②缬沙坦组p-p38 MAPK、p-MKK3/6和p-CREB1的表达明显下调,TGF-β1和FN mRNA的表达降低,同时FN和IV型胶原的含量减少。③MTT法检测显示不同浓度的缬沙坦对细胞增殖状态都有所抑制,并随药物浓度的增加而作用增强。结论缬沙坦抑制肾小球系膜细胞TGF-β1的表达和细胞外基质的分泌可能部分是通过影响p38 MAPK传导通路的激活来实现的。 展开更多
关键词 血管紧张素受体1拮抗剂 系膜细胞 高糖 P38丝裂原活化蛋白激酶 MAPK激酶3/6 cAMP反应元件结合蛋白1 转化生长因子β1
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let-7a通过抑制MAP4K3/MKK4/JNK信号通路减少脑出血大鼠神经元调亡 被引量:10
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作者 杨慧 万广 +2 位作者 高绚照 柳毅 王守春 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期1055-1062,共8页
目的:研究微小RNA let-7a对脑出血(ICH)大鼠神经元凋亡的影响及其分子机制。方法:从48只健康SD大鼠中随机选取8只作为假手术组,将2μLⅦ型胶原酶注入其余大鼠苍白球以构建ICH模型。将造模后的大鼠随机分为模型(2μL生理盐水)组、let-7a... 目的:研究微小RNA let-7a对脑出血(ICH)大鼠神经元凋亡的影响及其分子机制。方法:从48只健康SD大鼠中随机选取8只作为假手术组,将2μLⅦ型胶原酶注入其余大鼠苍白球以构建ICH模型。将造模后的大鼠随机分为模型(2μL生理盐水)组、let-7a激动剂(agomir)组、阴性对照(NC)agomir组、let-7a拮抗剂(antagomir)组和NC antagomir组,每组8只,在侧脑室注射相应药物。7 d后进行神经功能评分;HE染色观察病理损伤;RT-qPCR和Western blot检测相关蛋白表达水平;TUNEL染色检测神经元凋亡情况;利用生物信息学软件预测let-7a与丝裂原活化的蛋白激酶激酶激酶激酶3(MAP4K3)的靶向关系,并在HEK293T细胞中用双萤光素酶报告基因实验进一步验证。结果:动物实验中,let-7a过表达时,神经功能评分降低,病理损伤减轻,胶质细胞原纤维酸性蛋白(GFAP)低表达,神经元凋亡减少,cleaved caspase-3和cleaved PARP低表达(P<0. 05)。细胞实验中,MAP4K3是let-7a的靶基因之一,且两者为负向调控;let-7a过表达抑制MAP4K3/MKK4/JNK的表达。结论:let-7a通过抑制MAP4K3/MKK4/JNK信号通路,减少ICH大鼠神经元凋亡。 展开更多
关键词 脑出血 微小RNA let-7a MAP4K3/MKK4/JNK信号通路 神经元 细胞凋亡
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归芪活血胶囊对颈椎病模型大鼠软骨细胞的影响 被引量:5
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作者 程国良 姜艳玲 +1 位作者 李冰冰 罗琳 《世界中医药》 CAS 2020年第16期2369-2372,共4页
目的:研究归芪活血胶囊对颈椎病模型大鼠软骨细胞白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)及MKK3/6-p38MAPK信号通路的影响。方法:选取60只SD级大鼠作为研究对象,将其以随机抽签法等分成假手术组、模型组、归芪活血胶囊组。其中模型组... 目的:研究归芪活血胶囊对颈椎病模型大鼠软骨细胞白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)及MKK3/6-p38MAPK信号通路的影响。方法:选取60只SD级大鼠作为研究对象,将其以随机抽签法等分成假手术组、模型组、归芪活血胶囊组。其中模型组与归芪活血胶囊组参考颈椎间盘退变模型,假手术组仅切开皮肤,随后缝合。模型组不予以任何干预,归芪活血胶囊组则予以归芪活血胶囊灌胃治疗。干预4周后,通过甲苯胺蓝实施组织染色,以免疫组织化学法检测软骨细胞IL-6、IL-8含量,同时以Weatern Blot法检测MKK3/6以及p38MAPK表达水平。结果:假手术组、归芪活血胶囊组大鼠颈椎间盘软骨细胞IL-6水平、IL-8水平均显著低于模型组,差异均有统计学意义(P<0.05)。假手术组、归芪活血胶囊组大鼠颈椎间盘软骨细胞MKK3/6水平、p38MAPK水平相较于模型组明显更低(均P<0.05)。经Pearson相关性分析可得:颈椎病模型大鼠软骨组织IL-6、IL-8水平与MKK3/6、p38MAPK表达水平比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论:归芪活血胶囊的应用可显著降低颈椎病模型大鼠软骨细胞IL-6、IL-8含量,同时可下调软骨细胞MKK3/6以及p38MAPK蛋白表达水平,其主要机制可能是通过调节MKK3/6-p38MAPK信号通路,进一步下调IL-6、IL-8含量,从而达到治疗颈椎病的目的。 展开更多
关键词 颈椎病 归芪活血胶囊 白细胞介素-6 白细胞介素-8 mkk3/6-p38MAPK信号通路
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