基于MKL1/CAAP1通路探讨香青兰总黄酮对胃癌MGC-803细胞恶性生物学行为的影响

目的探讨香青兰总黄酮对胃癌MGC-803细胞恶性生物学行为的影响及巨核细胞白血病因子(MKL)1/半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase)-3活性和凋亡抑制因子(CAAP)1通路的作用。方法体外培养胃癌MGC-803细胞,对照组不进行处理,香青兰总黄酮低剂量组、香青兰总黄酮中剂量组、香青兰总黄酮高剂量组分别给予浓度为25、50、100 mg/L的香青兰总黄酮,曲妥珠单抗组给予浓度为10 mg/L的曲妥珠单抗,继续培养24 h后检测细胞增殖率、细胞凋亡率、细胞侵袭和迁移能力,同时检测胃癌MGC-803细胞中MKL1、CAAP1、基质金属蛋白酶(MMP)-2、Caspase-3 mRNA和蛋白水平。结果与对照组比较,各香青兰总黄酮剂量组细胞增殖率、细胞侵袭数、迁移距离、MKL1、CAAP1、MMP-2、Caspase-3 mRNA和蛋白水平显著降低,细胞凋亡率显著增加,且呈剂量依赖性,但效果不如曲妥珠单抗组(P<0.05)。结论香青兰总黄酮可以降低胃癌MGC-803细胞增殖、抑制其侵袭和迁移、同时促进细胞凋亡,其机制可能与MKL1/CAAP1通路的抑制有关。

MKL1靶向CAAP1促进胃癌细胞的自噬并抑制凋亡

[目的]探讨MKL1和CAAP1对胃癌细胞凋亡的影响及其分子机制。[方法]蛋白质印迹和实时荧光定量PCR检测MKL1、CAAP1过表达效果;蛋白质印迹、流式细胞术、自噬检测试剂盒检测细胞的自噬和凋亡情况;荧光素酶报告基因活性测定、染色质免疫共沉淀验证MKL1和CAAP1基因启动子的结合。[结果]在MGC80-3细胞中过量表达MKL1后,凋亡抑制蛋白CAAP1的mRNA和蛋白水平与对照组相比均上调(P <0. 05),自噬标记基因LC3BII表达升高(P <0. 05),促凋亡蛋白Caspase3表达降低(P <0. 05)。敲降MKL1,Caspase3蛋白表达升高(P <0. 05)。敲降CAAP1,Caspase3蛋白表达升高(P <0. 05)。过表达CAAP1拮抗敲降MKL1,LC3BII蛋白表达下降,Caspase3蛋白表达升高(P <0. 05)。荧光素酶活性分析以及染色质免疫共沉淀分析结果表明MKL1促进CAAP1基因的转录活性。[结论]MKL1可通过上调CAAP1的表达进而促进胃癌细胞的自噬并抑制细胞凋亡。