Apoptosis mechanisms of human gastric cancer cell line MKN-45 infected with human mutant p27

AIM: To explore the inducing effect of human mutant p27 gene on the apoptosis of the human gastric cancer cell line MKN-45 and its associated mechanisms. METHODS: The recombinant adenovirus Ad-p27mt was constructed to infect the human gastric cancer cell line MKN-45. Using flow cytometry, TUNEL assay and DNA fragment analysis, we measured the apoptotic effect of Ad-p27mt on the human gastric cancer cells. RESULTS: Ad-p27mt was successfully constructed and the infection efficiency reached 100%. After 18 h of infection, we observed an apoptotic hypodiploid peak on the flow cytometer before G1-S and apoptotic characteristic bands in the DNA electrophoresis. The apoptotic rate detected by TUNEL method was significantly higher in the Ad-p27mt group (89.4±3.12%)compared to the control group (3.12±0.13%, P ＜ 0.01).CONCLUSION: Human mutant p27 can induce apoptosis of the human gastric cancer cells in vitro.

野生猕猴桃根黄酮提取物对胃癌MKN-49P细胞增殖影响

目的探讨野生猕猴桃根黄酮提取物对胃癌MKN-49P细胞增殖作用的影响及机制。方法采用CCK-8比色法、流式细胞术、Western Blot法检测野生猕猴桃根黄酮提取物对胃癌MKN-49P细胞增殖作用的影响。结果野生猕猴桃根黄酮提取物对胃癌MKN-49P细胞增殖有明显的抑制作用,且呈时间-浓度依赖性;其浓度升高,细胞凋亡增加,G1期细胞增加,S、G2/M期细胞减少,抑制周期蛋白CyclinD1表达降低。结论野生猕猴桃根黄酮提取物可抑制胃癌MKN-49P细胞增殖、促进细胞凋亡、阻滞细胞周期于G1期,其主要机制可能与抑制周期蛋白CyclinD1表达降低有关。

胃复春胶囊通过STAT3信号通路促进人胃癌细胞凋亡

[目的]研究胃复春胶囊对人胃癌MKN-49P细胞的作用,为胃复春胶囊在抗消化道肿瘤方面的应用提供新的依据。[方法]受试样品为经胃复春胶囊饲喂大鼠的含药血清。胃癌MKN-49P细胞与不同浓度的胃复春胶囊含药血清共同孵育,采用噻唑蓝(methy thiazolyl tetrazolium,MTT)法及流式细胞术分别检测细胞活力和细胞凋亡情况;JC-1染色检测线粒体膜电位的变化;免疫印迹法检测信号传导与转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT 3)蛋白及与细胞凋亡相关的蛋白表达情况。[结果]胃复春胶囊含药血清能够剂量和时间依赖地抑制MKN-49P细胞的生长,并可诱导MKN-49P细胞凋亡。浓度为0~100μg·mL-1的胃复春胶囊含药血清作用于MKN-49P细胞24 h后,细胞活力呈剂量依赖性降低;JC-1染色显示线粒体膜电位降低;经过25、50、100μg·mL-1的胃复春胶囊含药血清分别处理24 h后,胃复春胶囊含药血清处理组细胞中STAT3的磷酸化减弱。[结论]胃复春胶囊含药血清能抑制胃癌细胞的增殖并诱导其凋亡,其作用机制可能与STAT3信号通路有关,该结果为胃复春胶囊在临床上治疗胃癌提供了依据。

胃复春胶囊通过NF-κB信号通路诱导胃癌细胞凋亡并抑制胃癌细胞转移作用

目的研究胃复春胶囊对人胃癌细胞株MKN-49P的作用,为胃复春胶囊在抗消化道肿瘤方面的应用提供新的依据。方法将SD大鼠随机分为2组,即对照组、胃复春胶囊组。胃复春胶囊组取胶囊内容物,以生理盐水混悬,按300g/(kg·d)剂量ig给药,对照组大鼠ig 2 mL生理盐水,共5 d。末次给药后2 h,在无菌条件下,ip 10%水合氯醛(350 mg/kg)麻醉,腹主动脉取血,分离血清,经灭活处理后,置于-20℃冰箱保存备用。用不同质量浓度(0、2.5、5、10、20、30、50、80、100μg/mL)的胃复春胶囊含药血清处理MKN-49P细胞,采用MTT法检测细胞活力。加入各质量浓度(25、50、100μg/m L)胃复春胶囊含药血清,流式细胞术Annexin V/PI双染色检测细胞凋亡情况,Hoechst染色法检测细胞形态,细胞划痕实验测定细胞的迁移能力,Western blotting法检测信号传导与转录激活因子(STAT)蛋白、核转录因子-κB(NF-κB)信号通路及与细胞凋亡相关的蛋白表达情况。结果胃复春胶囊含药血清能够剂量和时间相关地降低MKN-49P细胞的活力,并可诱导MKN-49P细胞凋亡。Hoechst染色显示细胞膜通透性增强;细胞划痕实验结果显示,与对照组(0μg/mL)相比,不同浓度胃复春胶囊含药血清(25、50、100μg/mL)可浓度相关性地抑制MKN-49P细胞的迁移。MKN-49P细胞经过25、50、100μg/mL胃复春胶囊含药血清分别处理24 h后,MKN-49P细胞中STAT3的磷酸化减弱,NF-κB信号通路相关的蛋白表达量下调,抗凋亡蛋白表达量下降而促凋亡蛋白表达量增加。结论胃复春胶囊含药血清能抑制胃癌细胞的增殖、诱导细胞凋亡,并显著降低细胞迁移能力,其作用机制推测与NF-κB信号通路有关。