MKI67在胰腺癌中的表达及临床意义

目的探讨MKI67在胰腺癌中的表达、生物学功能、潜在机制及其临床意义。方法利用公共数据库分析MKI67在胰腺癌中的表达水平、诊断和预后价值,研究MKI67与免疫细胞浸润和免疫检查点分子之间的关系,并通过功能通路的富集分析揭示其可能的分子机制。采用qRT-PCR和Western blot法验证MKI67在mRNA和蛋白质水平的表达,采用免疫组织化学染色对MKI67在组织蛋白的表达水平进行检测。结果MKI67的高表达与胰腺癌较高的组织学分级和较差的预后显著相关。MKI67表达升高与胰腺癌患者不良预后相关(P=0.009),是影响患者预后的独立危险因素(95%CI:1.084~1.743,P<0.05)。MKI67的表达与Th2细胞水平呈正相关,而与pDC细胞、NK细胞、肥大细胞、T滤泡辅助细胞、免疫DC和CD8+T细胞呈负相关。结论MKI67可能作为胰腺癌的诊断和预后生物标志物,其机制可能与免疫逃逸或免疫抑制相关。

MKI67-siRNA可抑制QGY-7703细胞的生长

为了探讨MKI67在肝癌细胞发生发展中的作用,采用实时定量PCR方法检测人肝细胞癌QGY-7703细胞中MKI67基因表达水平,以及MKI67在肝细胞癌组织和癌旁正常组织中的表达情况,设计并合成针对MKI67的siRNA,利用脂质体转染法将其转入QGY-7703细胞内,通过MTT和细胞集落形成实验观察MKI67-siRNA对QGY-7703细胞生长活性和增殖能力的影响.实时定量PCR结果表明,MKI67在肝细胞癌组织中的表达水平明显高于癌旁正常组织(P<0.01).MTT和细胞集落形成实验结果显示,转染MKI67-siRNA的QGY-7703细胞生长活性和集落形成率明显低于对照组(P<0.01).由此得出结论:MKI67在肝癌细胞系QGY-7703细胞中的表达水平较高,且它在肝癌组织中的表达水平明显上调.同时,MKI67-siRNA可以有效抑制QGY-7703细胞的生长活性和增殖能力,提示MKI67可能与肝细胞癌的发生、发展相关.

SPAG5在胃癌细胞恶性增殖中的生物学作用

目的在胃癌组织及癌旁组织中分析SPAG5的表达情况,通过干扰SPAG5分析其在胃癌细胞生长中的生物学作用。方法结合TCGA分析,免疫组织化学、免疫荧光染色分析SPAG5及MKi67在胃癌及癌旁组织中的表达模式,利用胃癌细胞AGS和MGC803进行体外细胞生物学实验,分别设置空白对照组和干扰组,采用慢病毒干扰,其中空白对照转染shCtrl,干扰组转染shSPAG5。通过Celigo、MTT和克隆形成实验、凋亡检测分析敲减SPAG5基因后对胃癌细胞生长的影响。结果Proteinatlas数据库、TCGA数据库分析结果发现SPAG5在胃癌中高表达,KM-plot及GEPIA数据库分析SPAG5在肺腺癌、乳腺癌、肝癌、胰腺癌、宫颈癌、膀胱癌中高表达,免疫组化发现SPAG5在胃癌中高表达(P<0.001),免疫组化和免疫荧光共聚焦证明SPAG5与MKi67存在显著相关性(R=0.393,P<0.001)。Real time-PCR及Western blotting结果显示SPAG5在MKN74、BGC823、MGC803、SGC7901和AGS等细胞中表达水平较高(P<0.01)。敲减SPAG5后mRNA和蛋白的表达下降,Celigo、MTT和克隆形成实验结果显示敲减SPAG5抑制胃癌细胞增殖(P<0.01),流式凋亡分析发现敲减SPAG5促进胃癌细胞凋亡(P<0.001)。结论SPAG5和MKi67在胃癌组织中的表达具有相关性,干扰SPAG5基因可以抑制胃癌细胞的增殖。SPAG5与患者预后相关,可能成为胃癌的潜在标志物。

TERC与p16/Ki-67检测诊断宫颈高级别上皮内瘤变效能比较

目的探讨人端粒酶RNA基因(TERC)和p16/Ki-67对于宫颈高级别上皮内瘤变(CIN2+)的诊断效能。方法随机选取61例组织学确诊宫颈病变患者,其中CIN2+35例、CIN1-26例。对其残余宫颈细胞学标本通过荧光原位杂交方法进行TERC检测,通过免疫细胞化学方法进行p16、Ki-67双染检测,并对其灵敏度、特异度进行比较。结果CIN1-组和CIN2+TERC扩增率分别为11.5%、94.3%,p16/Ki-67双染阳性率分别为4.0%、80.0%,两组比较差异有统计学意义(P均<0.01)。p16/Ki-67、TERC检测诊断CIN2+的灵敏度分别为80.0%、94.3%,特异度分别为96.2% 88.5%,准确性分别为86.9%、91.8%,两组灵敏度比较差异有统计学意义(P<0.05)。在各种诊断策略中,p16/Ki-67的特异度最高(96.2%),其次为TERC(88.5%)。TERC灵敏度最高(94.3%),其次为HPV(91.4%)。结论TERC、p16/Ki-67检测均有较高的灵敏度和特异度,二者均可用于CIN2+的早期诊断,而p16/Ki-67检测价格低廉,操作简便,较TERC检测更适合宫颈病变筛查。