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动物组蛋白H3K4三甲基化转移酶MLL3的生物信息学分析 被引量:2
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作者 尚明保 杨旬旬 +3 位作者 吴风瑞 丁彪 刘勇 李文雍 《安徽农业科学》 CAS 2012年第7期3884-3888,共5页
[目的]对动物组蛋白H3K4三甲基化转移酶MLL3进行生物信息学分析。[方法]利用生物信息学的方法,对小鼠MLL3的基因结构、氨基酸序列、系统进化树、染色体定位和共线性等问题进行分析。[结果]编码合成的小鼠MLL3蛋白质一级结构包括7个锌指... [目的]对动物组蛋白H3K4三甲基化转移酶MLL3进行生物信息学分析。[方法]利用生物信息学的方法,对小鼠MLL3的基因结构、氨基酸序列、系统进化树、染色体定位和共线性等问题进行分析。[结果]编码合成的小鼠MLL3蛋白质一级结构包括7个锌指结构域、1个HMG-box(高迁移率族蛋白)、1个FYRN(N-末端富含苯丙氨酸或酪氨酸区域)、1个FYRC(C-末端富含苯丙氨酸或酪氨酸区域)、1个SET域和1个postSET域;从序列对比和同源性上发现,该研究中的19种动物都基本上具有这些结构,说明这些结构在进化上是相对保守的,其中SET域具有高度的保守性,是维持组蛋白甲基化酶活性所必须的;从系统发生上看,19种动物在进化树上的位置与其分类地位相一致;在共线性分析中,虽然小鼠和人的MLL3基因位于不同的染色体上,但其上游和下游具有相同的基因,说明小鼠和人的MLL3基因具有共线性。[结论]不仅揭示了MLL3的核苷酸序列及其氨基酸序列的一级结构,为以后研究其高级结构和蛋白质的功能奠定了基础;同时也为后期进行小鼠MLL3基因的引物设计、启动子分析、基因的克隆、定位和表达的调控模式研究奠定了基础。 展开更多
关键词 组蛋白甲基化酶 mll3 SET结构域 生物信息学
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Bioinformatics Analysis on Histone H3-lys-4 Methyltransferase MLL3 被引量:1
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作者 尚明保 杨旬旬 +3 位作者 吴风瑞 丁彪 刘勇 李文雍 《Agricultural Science & Technology》 CAS 2012年第3期512-516,550,共6页
[Objective] This study aimed to conduct bioinformatics analysis of histone H3-1ys-4 (H3K4) methyltransferase MLL3 in animals, thus exploring its relatively conservative evolution to reveal the role of histon H3K4 tr... [Objective] This study aimed to conduct bioinformatics analysis of histone H3-1ys-4 (H3K4) methyltransferase MLL3 in animals, thus exploring its relatively conservative evolution to reveal the role of histon H3K4 trimethyltransferase MLL3 in human cancers. [Method] By using bioinformatics method, gene structure, amino acid sequences, phylogenetic tree, chromosomal localization and synteny of mouse MLL3 were analyzed. [Result] Primary structure of the encoded mouse MLL3 protein con- tained seven zinc finger domains, an HMG-box (High mobility group-box protein), a FYRN (F/Y-rich N-terminus) domain, a FYRC (F/Yrich C-terminus) domain, a SET domain and a postSET domain. Results of sequence comparison and homology showed that 19 animal species in this study all had these structures basically, which indicated that these structures were relatively conserved in the evolution; specifically, the SET domain was highly conserved and was necessary to maintain the activity of histone methyltransferases. Results of phylogenetic analysis showed that the loca- tions of the 19 animal species in evolutionary tree were consistent with the taxo- nomic status. Results of synteny analysis showed that there were the same gene in the upstream and downstream of the mouse and human MLL3 gene which were located on different chromosomes, indicating that the mouse and human MLL3 gene had collinearity. [Conclusion] This study had revealed the primary structure of MLL3 nucleotide sequence and amino acid sequence, which had not only laid the foundation for the future research of high-level structure and function of MLL3 protein but also provided the basis for the follow-up study of primer design, promoter analysis, gene cloning and regulation patterns of localization and expression of mouse MLL3 gene. 展开更多
关键词 Histone methyltransferase mll3 SET domain BIOINFORMATICS
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MLL3/KMT2C突变介导肿瘤发生发展的生物学机制及其临床意义 被引量:1
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作者 李远良 陈皇 谭煌英 《中日友好医院学报》 CAS 2021年第4期235-236,240,共3页
髓样/淋巴或混合谱系白血病蛋白3(myeloid/lymphoid or mixed lineage leukemia3,MLL3),又名赖氨酸甲基转移酶2C(lysine methyltransferase 2C,KMT2C),为KMT2家族的成员之一,位于7q36.1,具有65个外显子,编码一种核蛋白,是对组蛋白3赖氨... 髓样/淋巴或混合谱系白血病蛋白3(myeloid/lymphoid or mixed lineage leukemia3,MLL3),又名赖氨酸甲基转移酶2C(lysine methyltransferase 2C,KMT2C),为KMT2家族的成员之一,位于7q36.1,具有65个外显子,编码一种核蛋白,是对组蛋白3赖氨酸4(histone 3 lysine 4,H3K4)进行甲基化修饰的酶,H3K4甲基化通常与转录活性相关,二甲基和三甲基化的H3K4与基因启动子的激活有关,而单甲基化则与基因增强子^([1,2])有关。MLL家族基因被认为与组织的生长调控、肿瘤发生有关。 展开更多
关键词 mll3/KMT2C 肿瘤发生发展 生物学机制 临床意义
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含非天然氨基酸定点突变的MLL3_(SET)蛋白表达与纯化
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作者 王小琴 黄银萍 +2 位作者 王蔚倩 吴萍 全舒 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期194-202,共9页
在组蛋白H3K4甲基转移酶MLL3的催化结构域(MLL3_(SET))中定点引入非天然氨基酸N-炔丙基赖氨酸(N-propargyl-lysine,PrK),表达、纯化该突变蛋白(MLL3_(SET)*),并评估突变蛋白的酶活,为后续进一步利用单分子荧光共振能量转移技术(smFRET)... 在组蛋白H3K4甲基转移酶MLL3的催化结构域(MLL3_(SET))中定点引入非天然氨基酸N-炔丙基赖氨酸(N-propargyl-lysine,PrK),表达、纯化该突变蛋白(MLL3_(SET)*),并评估突变蛋白的酶活,为后续进一步利用单分子荧光共振能量转移技术(smFRET)表征MLL3的作用机制奠定基础。将MLL3_(SET)接入pET-28b(+)构建表达载体,通过MLL3_(SET)晶体结构分析选择N4905位点进行PrK的引入;对商业化菌株(C321.ΔA.exp)进行基因组改造以引入T7 RNA聚合酶基因,并在改造后的菌株中表达、纯化MLL3_(SET)^(*),最后测定MLL3_(SET)^(*)的酶活性。结果表明,在构建的C321.ΔA.exp lacZ∷T7p07菌株中,pET28b-MLL3_(SET)^(*)在共转入aaRS-tRNA正交系统以及外源添加PrK后能够正常表达;通过Ni-NTA亲和层析及凝胶过滤层析成功纯化出高纯度的MLL3_(SET)^(*)蛋白;多酶级联反应结果显示,MLL3_(SET)^(*)的酶活性比野生型蛋白低,但仍具有约43%的甲基转移酶活性。本研究成功实现了含PrK的MLL3_(SET)蛋白的原核表达与纯化,突变蛋白保留了一定酶活性,为后续深入研究MLL3的分子机制奠定了基础。 展开更多
关键词 mll3_(SET) 基因组改造 非天然氨基酸 表达纯化 酶活性
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