文蛤(Meretrix Meretrix)凝集素(MML)的初步研究——Ⅰ.MML在文蛤体内的分布及纯化

在文蛤(Meretrix Meretrix)体内具有血球凝集活性的凝集素(简称MML),经实验证实仅分布于文蛤外套腔液中。向外套腔液中加入固体硫酸铵达40％时,可使99％的MML沉淀。用不同饱和度的硫酸铵溶液依次对上述沉淀进行抽提,得到MML粗制品溶液,其比活比原始外套腔液提高了约9.95倍,总活力回收达48％。最后用自制的人血浆糖蛋白一Sepharose 4 B亲合层析柱可将上述MML粗制品的比活再提高400多倍。结果与原始外套腔液比较,MML终产品的比活总共提高了4313倍,总活力回收达44.8％,在电泳鉴定时显示出单一的区带。

文蛤(Meretrix Meretrix)凝集素(MML)的初步研究——Ⅱ.MML的分子组成及性质鉴定

文蛤凝集素(MML)经实验证明是一种唾液酸专一性结合的凝集素,MML的活力表现依赖于Ca^(2+)。MML对高于40℃以上的温度敏感,其活力在?pH5.0～8.5的范围内稳定。等电聚焦电泳测出MML的等电点是5.6.在12％胶浓度的SDS-PAGE上,用含或不含-S-S-还原剂的样品处理液进行电泳,以及用4％～30％线性梯度胶浓度的PAGE分析,所得结果推测MML分子是由分子量为29000和30000道尔顿的2条肽链组成,肚链间经-S-S-共价联系形成约59000道尔顿的大亚基,再由约18个这种大亚基聚合成1060000道尔顿的MML大分子。氨基酸组成及共价结合糖含量测定表明,MML分子是一种含5％的糖类的糖蛋白。初步观察到MML对人体癌变淋巴母细胞株(Raji细胞)的生长有抑制或杀伤作用。