甲泼尼龙对呼吸机相关性肺损伤大鼠肺组织TRPV4/MMP-2/MMP-9信号通路的影响

目的评价甲泼尼龙对呼吸机相关性肺损伤(VILI)大鼠肺组织瞬时受体电位香草酸4 (TRPV4)/基质金属蛋白酶2/9(MMP-2/MMP-9)信号通路的影响。方法清洁级雄性SD大鼠100只,采用随机数字表法分为5组(n=20):对照组(C组)、机械通气组(V组)、甲泼尼龙组(Mp组)、甲泼尼龙+GSK1016790A组(MpG组)、HC-067047组(H组)。C组不行机械通气,自主呼吸空气4 h;V组机械通气(RR 40次/min,VT 40 m L/kg,I∶E 1∶1,PEEP 0,Fi O221%) 4 h;Mp组在机械通气前20 min静脉输注甲泼尼龙10.0 mg/kg;MpG组在给予甲泼尼龙前20 min静脉输注GSK1016790A 0.025 mg/kg;H组机械通气前30 min静脉输注HC-067047 10.0 mg/kg。机械通气4 h时,检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞介素-1(IL-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、总蛋白浓度,测定肺通透指数(LPI)、肺湿/干质量比(W/D),观察肺组织病理学结果。Western blot法检测肺组织TRPV4、MMP-2、MMP-9的表达水平。结果与C组比较,V组和MpG组BALF中IL-1(ng/m L:84.56±5.35 vs. 144.85±9.39、121.56±7.69)、TNF-α(ng/m L:179.65±45.73 vs. 486.18±94.79、316.93±69.71)、总蛋白(mg/m L:321.29±28.76 vs. 687.78±65.78、476.39±46.67)升高,肺组织LPI [(2.47±0.17)×10^(-3)vs.(6.19±0.29)×10^(-3)、(4.24±0.25)×10^(-3)]、W/D比值(4.42±0.19 vs. 8.83±0.61、6.32±0.41)升高,TRPV4(1.85±0.25 vs.5.81±0.92、3.87±0.65)、MMP-2 (0.44±0.06 vs. 1.16±0.23、0.85±0.11)、MMP-9(0.19±0.03 vs. 0.46±0.09、0.34±0.07)表达上调(P<0.05);与V组比较,Mp组、MpG组和H组BALF中IL-1(ng/m L:144.85±9.39 vs. 89.78±5.91、121.56±7.69、94.23±6.78)、TNF-α(ng/m L:486.18±94.79 vs. 186.42±49.37、316.93±69.71、193.71±51.41)、总蛋白(mg/m L:687.78±65.78 vs. 348.78±31.52、476.39±46.67、359.68±36.12)降低,肺组织LPI [(6.19±0.29)×10^(-3)vs.(2.85±0.14)×10^(-3)、(4.24±0.25)×10^(-3)、(2.97±0.21)×10^(-3)]、W/D比值(8.83±0.61 vs. 4.75±0.22、6.32±0.41、4.82±0.25)降低,TRPV4(5.81±0.92 vs. 2.13±0.29、3.87±0.65、2.35±0.37)、MMP-2 (1.16±0.23 vs. 0.48±0.08、0.85±0.11、0.52±0.08)、MMP-9(0.46±0.09 vs. 0.22±0.04、0.34±0.07、0.25±0.05)表达下调(P<0.05),肺组织病理损伤减轻;与Mp组比较,MpG组BALF中IL-1 (ng/m L:89.78±5.91 vs. 121.56±7.69)、TNF-α(ng/m L:186.42±49.37 vs. 316.93±69.71)、总蛋白(mg/m L:348.78±31.52 vs. 476.39±46.67)升高,肺组织LPI [(2.85±0.14)×10^(-3)vs.(4.24±0.25)×10^(-3)]、W/D比值(4.75±0.22 vs. 6.32±0.41)升高,TRPV4(2.13±0.29 vs. 3.87±0.65)、MMP-2(0.48±0.08 vs. 0.85±0.11)、MMP-9(0.22±0.04 vs. 0.34±0.07)表达上调(P<0.05)。结论甲泼尼龙可减轻大鼠VILI,与其抑制TRPV4/MMP-2/MMP-9信号通路有关。

TGF-1β和MMP-2/MMP-9mRNA在PQ中毒鼠肺中的表达及Ac-SDKP保护作用

目的探讨TGF-1β和MMP-2/MMP-9mRNA在PQ中毒鼠肺中的表达及Ac-SDKP保护作用。方法实验分为Ac-SDKP治疗组(60只),对照组(C30只)、百草枯中毒组(PQ60只)。PQ组按照25 mg/kg标准给予百草枯灌胃造模,C组灌胃生理盐水。Ac-SDKP治疗组:造模后1 h腹腔埋入含Ac-SDKP[800μg/(kg·d)]的微量缓释泵;PQ组、C组分别予生理盐水。以6 h、12 h、1 d、3 d、5 d、7 d为研究点处死实验鼠,C组每次5只,其它组每次10只。对实验鼠肺泡炎症程度、间质水肿、肺不张和肺纤维化形成分别进行评分,实验鼠肺组织TGF(转化生长因子)-1β和MMP-2/MMP-9mRNA的表达检测分别采用酶联免疫法(ELISA)方法和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测。结果与对照组相比,PQ组肺组织损伤明显,TGF-1β的表达升高,MMP-2/MMP-9mRNA的表达上调(P <0.05),Ac-SDKP组能抑制这种变化;TGF-1β与MMP-2/MMP-9 mRNA表达呈正相关(r1=0.71,r2=0.87,P <0.01)。结论 Ac-SDKP可能也是通过对TGF-1β和MMP-2/MMP-9 mRNA基因表达的调节,来保护百草枯中毒所致肺损伤。

生殖道感染对足月和未足月胎膜早破孕妇宫颈分泌液MMP-2、MMP-9表达及不良母婴结局的影响

目的分析生殖道感染对足月和未足月胎膜早破(PROM)孕妇基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达及不良母婴结局的影响。方法招募2021年6月至2023年6月就诊于湖北医药学院附属十堰市太和医院的110例PROM孕妇作为研究对象。根据生殖道感染情况和孕周将其分为未足月胎膜早破(pPROM)感染组(34例)、pPROM非感染组(26例)、足月胎膜早破(tPROM)感染组(34例)、tPROM非感染组(16例)。比较四组一般资料、宫颈分泌液MMP-2和MMP-9表达水平以及不良母婴结局发生情况,采用多因素logistic回归分析PROM孕妇发生不良母婴结局的影响因素。结果四组年龄、孕次、体质量指数、吸烟史、饮酒史比较差异无统计学意义(P>0.05)。四组宫颈分泌液MMP-2、MMP-9表达水平比较差异有统计学意义(P<0.05),其中pPROM感染组宫颈分泌液MMP-2、MMP-9表达水平高于pPROM非感染组和tPROM非感染组,tPROM感染组宫颈分泌液MMP-2、MMP-9表达水平高于tPROM非感染组,差异有统计学意义(P<0.05)。四组绒毛膜羊膜炎及不良母婴结局总发生率比较差异有统计学意义(P<0.05),其中pPROM感染组绒毛膜羊膜炎发生率高于tPROM感染组和tPROM非感染组,不良母婴结局总发生率高于pPROM非感染组和tPROM非感染组,差异有统计学意义(P<0.05)。多因素logistic回归分析结果显示,生殖道感染及较高的宫颈分泌液MMP-2、MMP-9表达水平是PROM孕妇发生不良母婴结局的独立危险因素(P<0.05)。结论生殖道感染可增加足月和未足月PROM孕妇宫颈分泌液MMP-2、MMP-9表达水平,生殖道感染及较高的宫颈分泌液MMP-2、MMP-9表达水平是PROM孕妇发生不良母婴结局的独立危险因素。

ADAM15与MMP-2、MMP-9 mRNA在乳腺癌组织中的表达及意义

目的:探讨ADAM15、MMP-2、MMP-9 mRNA在乳腺癌组织中的表达、与临床病理特征的关系及对乳腺癌转移、预后的影响。方法:采用原位杂交技术检测45例乳腺癌和20例乳腺良性病变中ADAM15、MMP-2和MMP-9 mRNA表达情况。分析ADAM15 mRNA表达与乳腺癌临床病理特征的关系并分析ADAM15 mRNA与MMP-2、MMP-9 mRNA表达的相关性。从TCGA数据库获取乳腺癌转录组数据,通过生物信息学分析相关因素与乳腺癌临床病理特征的关系。结果:ADAM15 mRNA在乳腺癌中高表达,并与乳腺癌淋巴结转移和临床分期密切相关,与患者年龄和肿瘤大小无关。乳腺癌中MMP-2和MMP-9 mRNA阳性率均明显升高,且均与淋巴结转移相关。乳腺癌组织中ADAM15和MMP-2、MMP-9的mRNA表达均呈正相关。生物信息学分析表明ADAM15 mRNA在乳腺癌组织中高表达,其高表达与患者预后密切相关。结论:ADAM15 mRNA在乳腺癌中高表达,与淋巴结转移呈正相关并与患者预后呈负相关,ADAM15 mRNA有可能通过上调MMP-2和MMP-9 mRNA的表达而促进乳腺癌转移。

唾液腺腺样囊性癌患者的MAPK、MMP-2和MMP-9及CD147表达和价值

目的探究唾液腺腺样囊性癌患者丝裂原活化蛋白激酶(mitogen activated protein kinase,MAPK)、基质金属蛋白酶-2(matrix metallo proteinase,MMP-2)、细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(extracellular matrix metalloproteinase inducer,CD147)、基质金属蛋白酶-9(matrix metallo proteinase,MMP-9)的表达和价值。方法选取2020年2月—2022年2月甘肃医学院附属医院接诊的20例唾液腺腺样囊性癌患者为A组,另外选择同期健康体检者20例为B组(正常唾液腺组织),均进行实验室检查,采用免疫组织化学法测定、分析两组MAPK(p-JNK、p-P38)、MMP-2和MMP-9、MVD、CD147表达水平,以及A组中MVD、CD147、MMP-2、MMP-9与MAPK(p-JNK、p-P38)的相关性分析。结果A组MMP-2、MMP-9、MVD、CD147表达水平高于B组,MAPK(pJNK、p-P38)表达水平低于B组,差异有统计学意义(P<0.05)。p-JNK阳性/阴性组中,MMP-9、MVD水平情况相近,差异无统计学意义(P>0.05);p-JNK阳性组中,MMP-2、CD147水平升高,差异有统计学意义(P<0.05)。p-P38阳性/阴性组中,MMP-2、MMP-9、MVD水平情况相近,差异无统计学意义(P>0.05),CD147水平升高,差异有统计学意义(P<0.05)。经Spearman系数显示,经Spearman系数显示,A组与MMP-2、CD147存在相关性(r=0.584、0.687,P<0.001),p-P38与CD147存在相关性(r=0.650,P<0.001)。结论监测唾液腺腺样囊性癌患者体内MAPK、MMP-2、CD147、MVD和MMP-9表达,可有效判断病情进展状况,以指导采取相应的治疗措施。

MMP-2和MMP-9在人脑原发性胶质瘤侵袭中的作用

目的 探讨基质金属蛋白酶MMP 2和MMP 9在原发性人脑胶质瘤侵袭行为中的作用。 方法 用免疫组织化学S P法检测MMP 2和MMP 9在胶质瘤和脑内转移瘤中的表达情况 ;同时通过测量CT影像上的瘤周水肿范围 ,并与免疫组织化学表达结果作对照比较。 结果 1 45例人脑胶质瘤标本中 ,MMP 2和MMP 9的瘤细胞阳性率分别为 35 5 %、6 2 2 % ,两者之间差别显著 (P <0 0 5 ) ;MMP 2、MMP 9在高度恶性胶质瘤标本中阳性率分别为 5 6 5 %、91 3% ,两者之间亦存在明显差别 (P <0 0 1) ;2 MMP 2的染色强度与胶质瘤侵袭指标———CT瘤周水肿范围无关 (P >0 0 5 ) ,而MMP 9的染色强度则与其有关 (P <0 0 5 ) ;但两者染色与否则均与其明显相关 (P <0 0 1) ;3 MMP 2、MMP 9两者在脑内转移瘤中表达率无明显差别 (P >0 0 5 ) ;也与高度恶性胶质瘤中的表达率无统计学差别 (P >0 0 5 )。 结论 MMP 2、MMP 9在人脑胶质瘤中可作为恶性表型及侵袭指标之一 ,亦可体现胶质瘤基质降解表型 ,但不能作为转移表型。其中 ,MMP

基质金属蛋白酶抑制剂LY52对人卵巢上皮癌细胞SKOV3中MMP-2,MMP-9表达及其侵袭转移能力的抑制作用

背景与目的:研究表明,肿瘤细胞MMP-2,MMP-9表达升高与其侵袭和转移能力有密切关系。因而,研究设计新的MMPs特异性抑制剂得到广泛重视。根据MMP-2,MMP-9结构特点,本实验设计合成全新结构的N1-取代咖啡酰吡咯烷类MMPs抑制剂——LY52,并观察该化合物对MMP-2,MMP-9表达的抑制作用及对人卵巢粘液囊腺上皮癌细胞SKOV3侵袭转移能力的影响。方法:MTT和细胞克隆法检测LY52对细胞生长抑制作用;明胶酶直接降解琥珀酰明胶法测定LY52抑酶作用活性;SDS-PAGEzymography分析对SKOV3细胞MMP-2,MMP-9表达的抑制作用;MTT法测定细胞与FN,LN和matrigel的粘附能力;Transwell小室法观察化合物对SKOV3细胞侵袭人工基底膜的抑制作用。结果:直接与细胞接触,LY52具有较弱的肿瘤细胞生长抑制作用。LY52直接抑制明胶酶活性,抑制作用IC50为11.9!g/ml。同时,LY52抑制SKOV3细胞MMP-2,MMP-9表达。以0.1、1、10、100、1000μg/ml剂量与SKOV3细胞孵育24h,对培养上清液MMP-2表达的抑制率为10.66%～31.47%;对MMP-9表达的抑制率为22.56%～56.71%。按上述剂量孵育1h,对SKOV3细胞与FN,LN和matrigel粘附能力的最大抑制率分别为29.79%,48.94%,50.92%。LY52显著抑制SKOV3细胞穿过人工基底膜能力,按上述剂量,LY52与细胞孵育24h,抑制率分别为7.5%,42.07%,66.54%,72.15%,82.84%。结论:LY52通过抑制SKOV3细胞MMP-2,MMP-9的表达,降低癌细胞侵袭转移能力。

Ki-67、MMP-7、MMP-2在宫颈CIN和宫颈癌中的表达及意义

目的:检测Ki-67、MMP-7、MMP-2在宫颈CIN及宫颈癌中的表达情况,探讨Ki-67、MMP-7、MMP-2与宫颈癌的发生、发展,增殖和侵袭转移之间的关系。方法:采用免疫组化S-P法和图像分析技术检测Ki-67、MMP-7、MMP-2在已确诊的50例宫颈癌(Invasive cervical cancer,ICC)、23例宫颈上皮内瘤样变(Cervical intraepithelial neoplasm,CIN)和正常宫颈(Normal cervical epithelium,NCE)对照20例的表达情况。结果:50例宫颈癌中ki-67、MMP-7、MMP-2的阳性表达分别为72.00%、78.00%、76.00%;CIN组ki-67、MMP-7、MMP-2的阳性表达分别为47.83%、60.87%、56.52%;正常对照组ki-67、MMP-7、MMP-2的阳性表达分别为10、0、0;Ki-67在子宫颈癌组和CIN组明显高于正常宫颈上皮组,在腺癌中的表达高于鳞癌(P<0.05),在CINⅠ和CINⅡ、CINⅢ中表达无明显差异,在低分化癌的表达明显高于高分化癌(P<0.05),在淋巴结转移组中的表达明显高于非淋巴结转移组(P<0.05);MMP-7、MMP-2在宫颈癌组织中的表达水平高于CIN及正常宫颈组织(P<0.01),MMP-7、MMP-2的表达与宫颈癌的病理类型及分化无关,在淋巴结转移组中表达高于非淋巴转移组。结论:Ki-67、MMP-2、MMP-7与宫颈癌肿瘤细胞的侵袭转移行为相关。

ARK5、MMP-2和MMP-9在胃癌中的表达及与侵袭转移的关系

目的:探讨ARK5、基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)、基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)在胃癌组织中的表达及与胃癌侵袭转移的关系。方法:免疫组织化学方法检测66例胃癌组织及20例正常胃组织中ARK5、MMP-2、MMP-9的表达;脂质体介导法将ARK5-siRNA转染入胃癌细胞株SGC-7901(siARK5/SGC7901细胞组),以SCRsiRNA转染组(scr/SGC7901细胞组)作为对照组,Western blot检测转染后ARK5、MMP-2、MMP-9蛋白表达;Transwell侵袭实验检测细胞体外侵袭能力。结果:ARK5、MMP-2、MMP-9在胃癌组织中的阳性表达率分别为68%、76%、68%,三者之间差异具有统计学意义(P<0.05);ARK5的表达与胃癌的浸润深度、细胞分化程度、TNM分期及淋巴结转移呈正相关(P<0.05),与年龄、性别、肿瘤大小无关(P>0.05);转染后siARK5/SGC7901细胞组表达ARK5、MMP-2和MMP-9蛋白水平降低,体外侵袭能力明显降低(P<0.05)。结论:ARK5、MMP-2和MMP-9在组织中的表达有相关性,ARK5与胃癌的侵袭和转移密切相关,可作为判断预后的指标和化学治疗的靶点。

MMP-2/9活性与TIMP-1/2蛋白表达在大鼠肺纤维化形成中的变化特点

目的：观察大鼠肺纤维化形成过程中基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinase，MMP）-2／9的活性及其活性抑制物——基质金属蛋白酶组织抑制因子（tissue inhibitor of matrix metalloproteinase，TIMP）-1／2蛋白表达的动态变化，探讨肺纤维化形成过程中细胞外基质（extracellular matrix，ECM）降解的调控规律。方法：SD大鼠48只，随机分为模型组（30只）与正常对照组（18只）。模型组大鼠予以1次性气管内注射博来霉素诱导肺纤维化模型，正常对照组大鼠于气管内注入等量生理盐水。每组再各设1d、3d和1、2、3、4周共6个时间观察点，动态观察大鼠肺系数的变化。HE染色观察大鼠肺组织病理学的改变；Masson染色观察大鼠肺组织胶原沉积情况；Jamall氏法测定肺组织羟脯氨酸（hydroxyproline，Hyp）的含量；Western印迹法分析肺组织MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2蛋白的表达变化；明胶酶图法检测肺组织MMP-2与MMP-9的活性。结果：与正常对照组大鼠比较，模型组大鼠染毒后2周其肺组织发生局灶性病变，肺泡壁与间隔增厚，肺泡腔与间质内有大量炎细胞浸润，伴有少量成纤维细胞；肺系数明显增高；肺组织内Hyp含量稍升高；MMP-2／9蛋白的表达与活性增加，以活化型MMP-2增加更为明显；TIMP-1／2蛋白的表达则逐渐增加。模型组大鼠染毒后3～4周时，肺泡结构遭到破坏，部分肺泡腔塌陷消失，由胶原纤维和成纤维细胞占据，肺泡壁与间隔进一步增厚，形成严重的肺纤维化；肺系数较2周时有所下降，肺组织Hyp含量和TIMP-1／2蛋白的表达明显增加，至染毒后4周时最为明显；MMP-2／9活性较2周时有所下降，尤以活化型MMP-2的活性下降较为明显。结论：博来霉素诱导肺纤维化形成过程中，早期肺组织的病理学变化以肺泡炎症为主，肺组织内MMP-2／9活性增高；后期以纤维化为主，肺组织TIMP-1／2表达明显增加，MMP-2／9活性则有所下降。

溃疡性结肠炎患者外周血中MMP-2、MMP-9与肠黏膜通透性关系的临床研究

目的探讨溃疡性结肠炎(UC)患者中基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9水平与肠黏膜通透性的临床关联,为UC的发病机制及治疗提供可靠的参考指标。方法采用ELISA法检测38例UC患者(UC组)和30例正常对照者(正常对照组)外周血中MMP-2、MMP-9水平;采用高效液相色谱示差法检测UC组和正常对照组口服乳果糖(L)和甘露醇(M)测试液后尿液中L、M含量,计算L/M比值。结果 UC组外周血中MMP-2、MMP-9水平显著高于正常对照组(P<0.05)。UC组外周血中MMP-2、MMP-9水平与UC疾病严重程度及病变范围呈一定相关性;UC组患者尿中L/M比值显著高于正常对照组(P<0.05),UC患者外周血中MMP-2、MMP-9水平与肠黏膜通透性改变有良好的相关性。结论活动期UC患者肠黏膜通透性增高,可能与外周血中MMP-2、MMP-9水平增高有关。

乳腺癌中PKCζ、MMP-2、MMP-9的表达及相关性

目的探讨乳腺癌中蛋白激酶Cζ(protein kinase Cζ,PKCζ)、基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)的表达及三者与其侵袭、转移的关系。方法应用免疫组化PV 9000两步法检测PKCζ、MMP-2、MMP-9在100例乳腺癌组织及对应癌旁正常乳腺组织中的表达,并分析三者表达的相关性。应用RNAi技术将合成的PKCζ-siRNA转染入乳腺癌细胞株MDA-MB-231中,即siPKCζ/MDA-MB-231细胞组,以转染空载质粒的scr/MDA-MB-231的细胞组作为对照组,应用Transwell侵袭实验检测细胞的体外侵袭能力。利用Western blot法检测转染细胞中PKCζ蛋白的表达。酶联免疫吸附实验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测培养基中MMP-2、MMP-9的含量。结果PKCζ、MMP-2、MMP-9在乳腺浸润性导管癌中的阳性率分别为62.5%、37.5%、32.5%,明显高于乳腺导管内癌和癌旁正常乳腺组织(P均<0.05)。PKCζ蛋白表达与淋巴结转移、远处转移有关(P均<0.01),与患者年龄、肿瘤大小、临床分期、ER、PR等无关(P均>0.05);转染siRNA的siPKCζ/MDA-MB-231细胞组与scr/MDA-MB-231组相比,体外侵袭能力以及PKCζ蛋白的表达水平明显下降(P均<0.05),培养基中MMP-2、MMP-9蛋白表达量亦明显下降(P均<0.05)。结论 PKCζ通过影响乳腺癌细胞中MMP-2、MMP-9的分泌来促进乳腺癌的侵袭、转移。

大鼠脑出血后脑组织MMP-2、MMP-9表达的实验研究

目的 探讨大鼠脑出血后不同时程脑组织中的基质金属蛋白酶 - 2 ( MMP- 2 )、基质金属蛋白酶 - 9( MMP- 9)的表达及其规律。方法 采用立体定向技术制作大鼠脑出血模型 ,在脑出血后不同时间分别断头取脑 ,免疫组化法测定脑组织 MMP- 2、MMP- 9的表达量。结果 ( 1)与假手术对照组比较 ,脑出血后 6 h血肿周围可见到微血管内皮表达 MMP- 9( P<0 .0 1) ,48h达高峰 ,至 5～ 7d后下降 ,但仍高于假手术对照组 ( P<0 .0 1) ,2周时降至零表达 ;12～ 2 4h中性粒细胞亦表达 MMP- 9;( 2 ) MMP- 2的表达要迟于 MMP- 9,2 4h可见到少量的 MMP- 2表达 ( P>0 .0 5 ) ,5～ 7d时逐渐达高峰 ( P<0 .0 1) ,主要在巨噬细胞上表达 ,2周时仍保持较高水平 ( P<0 .0 1)。结论 脑出血后出血侧血肿边缘有 MMP- 9、MMP- 2表达 ,推测 MMP- 9在急性期参与了脑水肿的形成 ,而 MMP- 2在脑出血后期可能参与了脑组织的修复.

扶正解毒通络方对人肝癌HepG2细胞MMP-2、MMP-9表达及细胞侵袭作用的影响

目的:探讨扶正解毒通络方对肝癌HepG2细胞侵袭作用和基质金属蛋白酶(Matrix metallo proteinases,MMP)-2、MMP-9表达水平的影响及可能的作用机制。方法:CCK8实验检测扶正解毒通络方对HepG2细胞活性影响;Transwell侵袭实验检测扶正解毒通络方对HepG2侵袭能力的影响;ELISA法检测扶正解毒通络方干预HepG2细胞后MMP-2和MMP-9的表达水平。结果:CCK8实验结果显示,扶正解毒通络方对HepG2细胞意志呈剂量时间相关性。Transwell侵袭实验显示,2.65 mg/ml扶正解毒通络方对HepG2细胞侵袭力抑制率为52.45%(P<0.05)。ELISA检测结果显示,扶正解毒通络方干预后HepG2细胞上清液中MMP-2和MMP-9表达水平下降(P<0.05)。结论:扶正解毒通络方可以抑制肝癌HepG2细胞的生长和侵袭,其机制可能是通过下调MMP-2、MMP-9在肝癌细胞HepG2的表达。

rt-PA应用后MMP-2、MMP-9表达的改变及Neuroserpin的影响

目的 观察重组组织型纤溶酶原激活剂(rt-PA)对血管再通后基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、MMP-9表达的影响以及神经源性丝氨酸蛋白酶抑制剂(neuroserpin,NSP)的干预作用。方法 应用易卒中型肾血管性高血压大鼠复制大脑中动脉缺血模型,缺血3 h后再灌注并静脉注射rt-PA,于预组在应用rt-PA前脑内注射NSP,1天后处死,常规病理检查,并应用免疫组织化学和原位杂交的方法观察MMP-2、MMP-9在脑组织的表达。结果 缺血再灌注后MMP-2、MMP-9表达均升高;应用rt-PA后可见缺血再灌注区有灶性出血及红细胞漏出,同时使MMP-9进一步升高,但对MMP-2影响不大;应用rt-PA的同时使用NSP可以减轻缺血损伤,减少出血的发生,并使升高的MMP-9减少至接近正常水平,但NSP可以使MMP-2表达略有升高。结论 rt-PA溶栓后出血转化的发生可能与MMP-9表达增加有关,溶栓时联合应用NSP可能通过降低rt-PA所致的MMP-9表达上调而减轻溶栓治疗的出血并发症。

启膈方对人胃癌MGC细胞增殖、运动能力及分泌MMP-2、MMP-9酶活性的影响

目的观察启膈方对人胃癌MGC细胞增殖能力、运动能力及分泌基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9活性的抑制作用。方法体外培养人胃癌MGC细胞,随机分为启膈方小、中、大剂量组及5-氟尿嘧啶(5-FU)组、空白对照组,共5组。启膈方小、中、大剂量组加入不同浓度的中药,其终浓度为35、70、140mg/mL;5-FU组加入5-FU使其终浓度为50μg/mL,空白对照组加入PBS。分别用MTT法检测肿瘤细胞的增殖,琼脂滴法检测肿瘤细胞运动能力,明胶酶谱法检测肿瘤细胞分泌MMP-2、MMP-9的活性。结果启膈方对MGC细胞体外增殖有明显的抑制作用,并随着药物浓度增加其抑制作用更加明显。启膈方各剂量组、5-Fu组运动能力较对照组明显弱,运动速度慢,差异有统计学意义(P<0.05)。启膈方各剂量组细胞分泌MMP-2、MMP-9活性明显较空白对照组减弱(P<0.05),其中MMP-2活性减弱更明显(P<0.01)。结论启膈方可通过抑制MGC肿瘤细胞的增殖、运动能力及MMP-2、MMP-9的活性来抑制转移。

CREST与MMP-2、MMP-9在乳腺癌侵袭转移中的作用及关系

目的观察钙反应性反式激活因子(CREST)、MMP-2、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在不同TNM分期乳腺癌组织中的表达及其与乳腺癌侵袭、转移的关系。方法乳腺癌组织90例,苏木素-伊红(HE)染色确定组织学类型、组织学分级,结合临床资料确定TNM分期,分为乳腺癌TNMⅠ期20例,Ⅱ期40例,Ⅲ期30例,分别应用免疫组织化学SP法检测CREST、MMP-2、MMP-9蛋白在乳腺癌组织不同TNM分期的表达;RT-PCR和Western印迹检测CREST在mRNA和蛋白水平的变化,分析三者的相关性及其与TNM分期的关系。结果 CREST、MMP-2、MMP-9蛋白在TNMⅢ期乳腺癌中的阳性表达率明显高于TNMⅠ、Ⅱ期,且在TNMⅡ期乳腺癌中的阳性表达率明显高于TNMⅠ(P均<0.05),且三者的表达呈正相关(P均<0.05)。CREST mRNA在TNMⅢ期乳腺癌中的相对表达量明显高于TNMⅠ、Ⅱ期,在TNMⅡ期乳腺癌中的相对表达量明显高于TNMⅠ(P均<0.05)。CREST和MMP-2、MMP-9的高表达均与分化程度有关(P均<0.05),而与患者的年龄无关(P>0.05)。结论乳腺癌中CREST、MMP-2、MMP-9的高表达可能与其侵袭、转移有关,联合检测三者的表达,对乳腺癌预后判断可能有指导作用。

急性髓系白血病82例患者VEGF与MMP-2、MMP-9的相关性研究

为了探讨急性髓系白血病(AML)患者中血管内皮生长因子(VEGF)与基质金属蛋白酶MMP-2、MMP-9的相互关系及二者在AML中的意义,采用半定量RT-PCR技术检测AML患者与正常人骨髓单个核细胞(MNC)MMP-2mRNA、MMP-9mRNA、VEGF mRNA的表达,用明胶酶谱的方法测定原代MNC和HL-60细胞分泌的MMP-2、MMP-9的活性,应用ELISA方法检测AML患者血清中VEGF蛋白的水平,分析VEGF和MMP-2、MMP-9mRNA之间的关系。结果显示:AML患者MMP-2mRNA、MMP-9mRNA与VEGF mRNA的表达和VEGF蛋白水平呈正相关,缓解期患者和正常对照无相关性;VEGF阳性组发生髓外浸润率明显高于阴性组;VEGF上调HL-60细胞中bcl-2的表达。结论:AML患者中MMP-2,MMP-9的表达和VEGF具有正相关性,VEGF可以上调部分AML患者中MMP-2,MMP-9的表达,VEGF可能与MMP-2,MMP-9共同参与了白血病髓外浸润的发生。

新生儿颅内出血患儿血浆MMP-2、MMP-9、CNP含量及其与神经功能缺损、出血量的关系

目的:探讨新生儿颅内出血患儿血浆基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、C-型利钠肽(CNP)含量及其与神经功能缺损、出血量的关系。方法:选择本院新生儿科颅内出血患儿72例作为观察组,将72例患儿按照神经功能缺损将其分为轻型组26例、中型组29例、重型组17例,按照出血量分为小量组25例、中量组31例、大量组16例,分析颅内出血患儿神经功能缺损评分、出血量与患儿血浆MMP-2、MMP-9、CNP含量的关系。结果:观察组血浆MMP-2、MMP-9以及CNP水平均较对照组儿童明显升高,差异具有统计学意义(P<0.05);不同神经功能缺损程度患儿血浆MMP-2、MMP-9以及CNP水平与对照组比较,均明显升高,且重型组>中型组>轻型组,差异具有统计学意义(P<0.05);不同出血量患儿血浆MMP-2、MMP-9以及CNP水平与对照组比较,均明显升高,且大量组>中量组>小量组,差异均具有统计学意义(P<0.05);颅内出血患儿其神经功能缺损评分与血浆MMP-2、MMP-9以及CNP水平均呈正相关关系(P<0.05);颅内出血患儿出血量与血浆MMP-2、MMP-9以及CNP水平均呈正相关关系(P<0.05)。结论:新生儿颅内出血患儿其血浆MMP-2、MMP-9以及CNP水平高于健康新生儿,并且血浆MMP-2、MMP-9以及CNP水平与患儿神经功能缺损、出血量密切相关,可作为判断患儿病情的相关参考指标。

MMP-2、MMP-9、TIMP-1在血管成形术后再狭窄中的表达及其意义的实验研究

目的观察PTA后MMP-2、MMP-9和TIMP-1在血管壁各层随时间的演变规律,探讨其在血管再狭窄过程中的表达及意义。方法48只大鼠制作成颈动脉再狭窄动物模型,选取30只内膜增生满意的标本,分别代表动脉损伤后1、3、7、14、28、42天6个观察时间点,对胶原纤维进行Masson染色。MMP-2、TIMP-1、PCNA进行免疫组织化学染色,MMP-9进行免疫组织化学和原位杂交两种染色。分析它们的表达与内膜增生和血管重塑的关系。结果正常血管不表达MMP-9mRNA及蛋白,损伤后第3天中膜、外膜mRNA表达达高峰,第7天内膜表达达高峰。MMP-9蛋白第7天内膜表达达高峰,且阳性细胞率高于中膜和外膜。第14、28天,血管壁各层表达逐渐下降至基线水平,内膜的阳性细胞主要集中在新生内膜靠近管腔的一侧。内膜MMP-2表达高峰出现晚至第14天,且近内弹力板处MMP-2也有明显的表达。正常血管壁不表达TIMP-1,损伤后第3天,中膜和外膜表达达高峰。第7天,新生内膜表达达高峰,中膜和外膜仍有较高水平表达。结论MMP-9、MMP-2、TIMP-1参与再狭窄,内膜MMP-9表达与早期增殖的细胞向内膜迁移形成新生内膜有关。MMP-2表达与晚期内膜形成、内膜重塑有关。TIMP-1的表达对内膜增生和重塑没有直接作用,其表达升高是机体为适应MMPs升高做出的代偿反应,在维持自身平衡中起作用。