MMP-3、MMP-13在骨性关节炎患者滑膜中的表达及意义

目的探讨MMP-3、MMP-13在骨性关节炎患者滑膜中的表达及相关性。方法应用免疫组化和Western blotting法检测MMP-3、MMP-13蛋白在30例骨性关节炎(OA,实验组)与30例非OA(对照组)患者滑膜组织中的表达情况。结果免疫组化结果表明MMP-3、MMP-13蛋白在实验组与对照组患者滑膜中的表达有显著性差异(P<0.01),且阳性表达多定位于滑膜细胞的胞浆;Western blotting分析结果显示MMP-3、MMP-13蛋白在实验组患者滑膜中表达明显高于对照组患者,且二者在OA组中表达呈正相关性。结论 MMP-3、MMP-13蛋白与骨性关节炎发生发展密切相关,可能作为诊断及判断骨性关节炎的一项重要指标。

马急性滑膜炎模型关节液中MMP-3和MMP-13含量变化的研究

关节滑膜炎是骨关节疾病发病的基本病理过程,试验通过研究马急性滑膜炎关节液中基质金属蛋白酶-3(MMP-3)和基质金属蛋白酶-13(MMP-13)含量的变化,进而研究马滑膜炎机理。试验选用8匹马,在马右侧中间腕关节内注入0.5 ng大肠杆菌脂多糖(LPS)诱导滑膜炎,同时在对侧关节内注入等量的PBS作为对照,于注射药物前和注射药物后的8、24 h和168 h,采马关节液.用ELISA检测马关节液中MMP-3和MMP-13的含量。结果注入LPS的关节液中MMP-3和MMP-13的量在注射后的24 h内持续升高,在24 h达到最大量10.01 ng/mL和6.08 ng/mL,与对照组比较差异性显著,24 h后开始下降,168 h时含量恢复到对照水平。试验结果表明,12'S诱导的滑膜炎模型为一过性的.在急性滑膜炎过程中,MMP-3和MMP-13的表达和释放增加,并且这两种酶在滑膜炎过程中起到重要作用。

中药熏洗对膝骨性关节炎患者关节滑液中MMP-3和MMP-13的影响

目的:观察中药熏洗治疗膝关节骨性关节炎的临床疗效和对关节滑液中MMP-3和MMP-13的影响。方法:膝关节骨性关节炎90例,分成治疗组和对照组。分别采用补肾活血汤熏洗和热开水熏洗加双氯芬酸钠乳膏外搽治疗,观察两组患者的临床症状、体征、Lysholm's膝关节评分以及关节滑液中MMP-3和MMP-13变化。结果:两组治疗后Lysholm's膝关节评分较治疗前明显升高(P<0.01),治疗组的评分值高于对照组(P<0.01),治疗组总体优良率为93.33%,对照组总体优良率为82.22%,治疗组疗效优于对照组(P<0.01),两组治疗后关节滑液MMP-3、MMP-13水平明显下降(P<0.01),治疗组MMP-3、MMP-13下降较对照组更为明显(P<0.01)。结论:补肾活血汤熏洗治疗膝骨性关节炎疗效显著,其作用机制可能通过降低MMP-3、MMP-13的水平,减轻滑膜炎症和关节软骨的破坏,从而发挥对骨性关节炎的治疗作用。

筋骨痛消丸对膝骨关节炎大鼠模型血清MLT、MMP-3、MMP-13的影响

目的通过观察筋骨痛消丸对膝骨关节炎大鼠模型血清中MLT、MMP-3和MMP-13表达的影响,探究筋骨痛消丸治疗膝骨关节炎的机制,为临床防治膝骨关节炎提供实验依据。方法SPF级SD大鼠40只,体质量200~220 g,随机分为4组,空白对照组、模型对照组、阳性对照组、实验组,每组10只。除正常对照组外,其余各组大鼠均采用关节腔内注射木瓜蛋白酶溶液制备膝骨关节炎模型。造模后,按照人体用药量换算成大鼠等效剂量作为大鼠给药量,阳性对照组大鼠每天予以双醋瑞因药液给药,实验组每天予以筋骨痛消丸药液给药,空白对照组和模型对照组每天予以生理盐水给药,各组连续给药两周。于给药后采集血液样本,运用ELISA检测法检测各组大鼠血清中MLT及MMP-3、MMP-13的表达水平。结果给药后,与模型对照组相比,阳性对照组和实验组大鼠的关节肿胀度明显降低(P<0.05),大鼠血清中MMP-3、MMP-13的表达水平明显降低(P<0.05),且实验组降低显著(P<0.05);与其余各组相比,实验组大鼠血清中MLT的表达水平显著升高(P<0.05)。结论筋骨痛消丸可以上调膝骨关节炎大鼠模型血清中MLT的表达水平,降低MMP-3、MMP-13的表达水平,从而增强机体抗氧化、抗炎及抗凋亡等作用,对膝骨关节炎的治疗具有积极作用。

茯苓丸加减方对兔膝骨关节炎模型MMP-3、MMP-13及TIMP-1表达水平的影响

目的观察茯苓丸加减方对兔膝骨关节炎(KOA)模型MMP-3、MMP-13及TIMP-1表达的影响。方法将日本大耳白兔随机分为正常组、模型组、双氯芬酸钠组和茯苓丸加减方组,每组6只;除正常组外,各组均采用改良Hulth法对其左后膝关节进行手术造模;造模成功后对各组大耳白兔进行4周的干预治疗,治疗结束后进行病理观察,同时采用ELISA法对各组大耳白兔膝关节液内MMP-3、MMP-13和TIMP-1水平进行测定。结果模型组MMP-3、MMP-13和TIMP-1含量较正常组均明显升高(P<0.01);与模型组比较,双氯芬酸钠组和茯苓丸加减方组均明显下降(P<0.01)。结论MMP-3、MMP-13和TIMP-1与KOA发病关系密切,茯苓丸加减方可能是通过抑制其病理性升高对KOA的发病起到治疗作用。

聚肌苷酸-聚胞苷酸对人髓核细胞基质金属蛋白酶-1、13表达的影响

目的探究聚肌苷酸-聚胞苷酸[polyinosinic-polycytidylic acid,Poly(I:C)]对人髓核细胞(nucleus pulposus cells,NPC)基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)-1、13表达的影响。方法取人椎间盘组织,采用酶消化法分离并体外培养NPC。不同时间不同剂量的Poly(I:C)刺激NPC,利用qPCR和Western blot方法检测MMP-1、13的mRNA和蛋白质表达情况;siRNA分别沉默TLR-3、RIG-1和MDA-5后,Poly(I:C)刺激NPC,qPCR检测MMP-1、13的mRNA表达情况。结果分离培养的NPC 5~6d后,贴壁生长;Poly(I:C)刺激NPC后,MMP-1、13的mRNA和蛋白质表达水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);siRNA沉默TLR-3后,MMP-1、13的mRNA表达水平受到明显抑制,差异有统计学意义(P<0.05);siRNA沉默RIG-1和MDA-5后,MMP-1、13的mRNA表达水平不受影响(P>0.05)。结论Poly(I:C)通过TLR-3受体途径促进NPC表达MMP-1、13。

降钙素对兔骨关节炎软骨基质金属蛋白酶1、3、13的影响

目的研究降钙素对兔骨关节炎软骨基质金属蛋白酶1、3、13的影响。方法 60只日本大白兔被随机分为对照组(ACLT)、降钙素(CT)干预组,各30只。结果 CT组MMP-1、3、13的含量低于ACLT组(P<0.01)。结论降钙素对MMP-1、3、13的分泌有着一定的抑制作用,进而对骨关节炎进程有着相应的干预,使得骨关节炎的进展得以缓解和延缓。

基于"经筋理论"针刀治疗对早中期膝骨关节炎患者骨代谢指标和血清TIMP-1、MMP-3、MMP-13的影响

目的:探讨基于"经筋理论"针刀治疗对早中期膝骨关节炎(KOA)患者骨代谢指标和血清金属蛋白酶抑制物-1(TIMP-1)、基质金属蛋白酶(MMP)-3、MMP-13的影响。方法:根据随机数字表法,将2021年1月至2023年1月期间就诊于新疆医科大学附属第一医院的120例早中期KOA患者分为对照组(n=60,常规治疗)和研究组(n=60,对照组的基础上接受"经筋理论"针刀治疗)。对比两组疗效、量表评分[疼痛视觉模拟评分(VAS)、西安大略和麦克马斯特大学骨关节炎调查表(WOMAC)]、骨代谢指标[抗酒石酸盐酸性磷酸酶异构体(TRACP-5b)、骨特异性碱性磷酸酶(BALP)、骨钙素(BGP)]和血清TIMP-1、MMP-3、MMP-13。结果:与对照组相比,研究组的临床总有效率更高(P<0.05)。与对照组相比,研究组治疗后WOMAC、VAS评分和血清MMP-3、MMP-13、TRACP-5b水平更低,TIMP-1、BALP、BGP水平更高(P<0.05)。结论:基于"经筋理论"针刀治疗早中期KOA患者,可有效减轻疼痛症状,提高临床治疗效果,可能与改善骨代谢指标和血清TIMP-1、MMP-3、MMP-13水平有关。

佐剂性关节炎大鼠血清中基质金属蛋白酶3和13的表达及意义

目的:通过检测AA大鼠模型血清中基质金属蛋白酶-3(MMP-3)和基质金属蛋白酶-13(MMP-13)的表达水平,探讨MMP-3和MMP-13在RA发病中的作用机制。方法:选用SD大鼠32只,雌雄各半,随机分为4组,3个剂量组采用左足踝关节皮下分别注入不同浓度弗氏佐剂(CFA),空白对照组注射0. 15 m L生理盐水。观察各组大鼠足踝关节肿胀情况,确定大鼠足踝肿胀至最大程度所需时间(高峰时间)。另取SD大鼠50只,随机分为对照组和4个剂量组。高峰时间计算大鼠关节肿胀率,并检测血清中MMP-3和MMP-13的含量。结果:造模第8天,关节肿胀达到高峰。实验组间血清中MMP-3和MMP-13的含量与对照组相比,差异均有统计学意义(P <0. 05),且注射0. 15 m L和0. 20 m L CFA血清中MMP-3和MMP-13的含量能够分别达到最高浓度。结论:佐剂性关节炎大鼠血清中MMP-3和MMP-13这两种蛋白酶表达水平均明显升高,可能参与疾病的病理机制过程。

壮骨健膝方对IL-1β诱导后软骨细胞表达Caveolin-1、p-p38、MMP-3、MMP-13及TNF-α的影响

目的:观察壮骨健膝方对IL-1β诱导后软骨细胞中Caveolin-1、p-p38及其培养液中MMP-3、MMP-13和TNF-α表达的影响,探讨该方保护关节软骨的机制。方法:制备兔含药血清;取新西兰大白兔膝关节第二代软骨细胞,以10ng/mL IL-1β进行诱导,48h后随机分为空白血清组、含药血清组、阻滞剂A组、阻滞剂B组,并设未诱导的细胞为正常对照组,分别用不同方法干预6h后,检测软骨细胞及其培养液中上述5个指标的表达。结果:空白血清组5个指标的表达均高于其它各组(P<0.05),而3个干预组均能降低其表达(P<0.05),其中含药血清与SB203580联用的阻滞剂B组效果最明显。结论:壮骨健膝方对关节软骨的保护作用可能与其抑制Caveolinp38MAPK信号通路的激活,进而降低软骨细胞表达MMP-3、MMP-13及TNF-α有关。

曲普瑞林对子宫肌瘤组织中MMP-13和TIMP-3表达的影响

目的:探讨曲普瑞林对子宫肌瘤患者肿瘤组织中MMP-13和TIMP-3表达影响。方法:选取我院收治的子宫肌瘤患者40例,随机分为两组,每组各20例。实验组予曲普瑞林后,行子宫肌瘤切除术,对照组直接行子宫肌瘤切除术,观察比较超声测量子宫和子宫肌瘤的体积,实时定量PCR法与免疫印迹法检测子宫肌层和肌瘤组织中MMP-13和TIMP-3的表达。结果:1与曲普瑞林治疗前以及对照组相比较,曲普瑞林治疗后临床症状显著改善,子宫和肌瘤体积均明显缩小,差异有统计学意义(P<0.05)。2与对照组和治疗前相比较,血清雌二醇水平显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。3与对照组相比较,肌层和肌瘤组织中MMP-13m RNA水平降低,肌层和肌瘤组织中TIMP-3m RNA水平增加,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:曲普瑞林能够通过降低血清雌二醇水平,降低肌层和肌瘤组织中MMP-3的表达,以及增加肌层和肌瘤组织中TIMP-13的表达,来缩小子宫和子宫肌瘤的体积,从而缓解患者的症状。

MMP-13和TIMP-3在子宫肌瘤中的表达及意义

目的观察基质金属蛋白酶-13(MMP-13)和其抑制剂-3(TIMP-3)在子宫肌瘤组织中的表达情况,探讨MMP-13和TIMP-3与子宫肌瘤发生的关系与临床意义。方法采用免疫组织化学方法(S-P法)对57例子宫肌瘤患者进行MMP-13和TIMP-3蛋白表达的检测,并与45例子宫肌瘤瘤旁组织中MMP-13和TIMP-3表达比较。结果 MMP-13和TIMP-3蛋白在子宫肌瘤组织中多呈阳性表达,在子宫肌瘤瘤旁组织中多呈阴性表达,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 MMP-13与TIMP-3在子宫肌瘤组织中异常表达,可能与子宫肌瘤的发生有关。

医用臭氧水对兔膝关节骨性关节炎软骨MMP-1、MMP-3与MMP-13表达的影响

目的观察医用臭氧水对兔膝关节骨性关节炎关节软骨基质金属蛋白酶1/3/13(MMP-1/3/13)表达的影响。方法成年新西兰大白兔36只,随机分为对照组12只、骨性关节炎组12只与医用臭氧水治疗组12只。采用Hulth法将骨性关节炎组与医用臭氧水治疗组实验动物制成膝关节骨性关节炎模型。待造模成功后,医用臭氧水治疗组向兔膝关节腔内注射医用臭氧水2ml,注射浓度为20μg/ml,一周一次,共治疗3次,骨性关节炎组兔关节腔内注射空气;对照组实验动物不作处理。在造模成功时和处死前测定兔膝关节活动度,末次干预1周后,用空气栓塞法处死实验兔,取下实验兔右膝关节软骨进行组织匀浆,采用Western blot与real time PCR方法测定关节软骨中MMP-1、MMP-3与MMP-13的含量变化。结果与对照组相比,造模成功后的骨性关节炎组和医用臭氧水治疗组兔膝关节活动度显著降低,P<0.01;与骨性关节炎组相比,采用医用臭氧水治疗后,医用臭氧水治疗组兔膝关节活动度显著升高,P<0.01。骨性关节炎组大鼠膝关节软骨组织中MMP-1、MMP-3与MMP-13的蛋白与m RNA表达水平比对照组明显升高,而医用臭氧水治疗组比骨性关节炎组显著降低,P<0.01。结论医用臭氧水对骨性关节炎的治疗作用可能与降低早期骨性关节炎关节软骨中MMP-1、MMP-3与MMP-13的表达水平相关。

子宫肌瘤患者中TIMP-3和MMP-13的检测意义

目的比较UL(子宫肌瘤)组织和瘤旁子宫正常组织内的TIMP-3(基质金属蛋白酶抑制因子3)和MMP-13(基质金属蛋白酶-13)的表达差异及TIMP-3与MMP-13之间的相关性,以探讨UL的发生发展与两者间的关系。方法分析2012年4月至2014年4月在我院接受部分子宫切除或全切术治疗的UL患者的临床资料。用石蜡将手术切除的UL组织和瘤旁正常组织包埋做标本,免疫组织化学染色SP法检测TIMP-3和MMP-13的表达。比较UL组织和瘤旁组织的TIMP-3、MMP-13的阳性表达率,并分析TIMP-3与MMP-13表达间的相关性。结果本研究共纳入UL患者50例,其中包括UL组织和癌旁正常组织各50个。UL组织的MMP-13阳性表达率显著高于瘤旁组织(χ2=36.24,P<0.01);UL组织的TIMP-3阳性表达率显著高于瘤旁组织(χ2=9.632,P=0.022);UL组织中MMP-13和TIMP-3的表达情况两者间有着显著的相关性(r=0.603,P=0.021)。结论 UL的发生发展与TIMP-3和MMP-13的关系密切。

补肾通络方对大鼠膝骨关节炎膝关节软骨细胞外基质代谢的影响

目的探讨补肾通络方对膝骨关节炎大鼠的膝关节软骨中基质金属蛋白酶-3/13(matrix metalloproteinase-3/13,MMP-3/13)、组织金属蛋白酶抑制剂(tissue inhibitor of metalloproteinase-1,TIMP-1)m RNA和蛋白聚糖酶-1(aggrecanase-1即ADAMTs-4)蛋白的表达影响。方法将42只雄性Wistar大鼠随机分为7组:正常组,模型组,西药组,成药组,补肾通络方低、中、高剂量组,向大鼠双侧后肢膝关节腔内分别注射4%木瓜蛋白酶生理盐水溶液0.2 mL,于第1、4、7天注射以建立膝骨关节炎(Knee osteoarthritis,KOA)模型。造模成功后,分别以蒸馏水、美洛昔康水溶液、抗骨增生胶囊水溶液、补肾通络颗粒方低、中、高浓度水溶液对大鼠进行灌胃给药干预,干预过程中观察大鼠的一般状态,于灌胃给药干预4周后处死,并刮取双膝关节内胫骨平台及股骨内、外侧髁软骨组织,置于冻存管中备用,用实时定量反转录酶-聚合酶链锁反应(Real-time reverse transcript polymerase chain reaction,RTPCR)法测定软骨中MMP-3/13和TIMP-1在m RNA水平表达的变化及Western blot法测定ADAMTs-4蛋白表达情况。结果 MMP-3和MMP-13的m RNA表达情况在模型组最高(P<0.05),正常组表达最低(P<0.05),不同药物对其影响不同,其中补肾通络方的中剂量组表达水平在各给药组中最小,成药组表达含量在各给药组中最大,补肾通络方中剂量组与高剂量组相比,中剂量组表达低于高剂量组,然二者之间差异无统计学意义(P>0.05)。TIMP-1的m RNA含量在模型组中最低(P<0.05),正常组中表达最多(P<0.05),在各给药组中补肾通络方高剂量组含量接近正常组,而低剂量组表达最少。软骨ADAMTs-4蛋白表达情况,模型组含量最高,正常组含量最低,各给药组之间含量不同,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论补肾通络方治疗KOA疗效明显,其作用机制可能是通过抑制MMP-3/13和ADAMTs-4的水平,增加TIMP-1的表达,减轻膝关节软骨的破坏情况,改善KOA的症状,从而达到治疗KOA的作用。

仙灵骨葆联合康复运动对大鼠骨关节炎炎性因子mRNA表达的影响

目的:探讨仙灵骨葆联合康复运动对大鼠骨关节炎(OA)炎性因子mRNA表达的影响。方法:采用前交叉韧带切断术制作大鼠骨关节炎模型。50只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、仙灵骨葆组、康复运动组和仙灵骨葆联合康复运动组。经干预治疗8周后测定大鼠膝关节炎症因子白细胞介素-1β(IL-1β)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)和人基质金属蛋白酶-13(MMP-13)的mRNA表达。结果:与正常对照组比较,模型组、仙灵骨葆组、康复运动组和仙灵骨葆联合康复运动组大鼠的IL-1β、Caspase-3、MMP-13的mRNA表达明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,仙灵骨葆组和仙灵骨葆联合康复运动组大鼠的IL-1β、Caspase-3、MMP-13的mRNA表达明显降低,康复运动组大鼠的Caspase-3、MMP-13的mRNA表达明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。仙灵骨葆联合康复运动组大鼠的Caspase-3 mRNA表达明显低于仙灵骨葆组和康复运动组大鼠,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:仙灵骨葆联合康复运动可以调节骨关节炎诱导的关节退行性改变,减少促炎介质的表达。

壮骨健膝方含药血清对人退变关节软骨细胞caveolin-p38MAPK信号通路的影响

目的:观察壮骨健膝方含药血清对人退变关节软骨细胞caveolin-p38MAPK信号通路关键信号分子及下游效应产物的影响,阐明该方含药血清保护人退变关节软骨细胞的机制。方法:取正常人及膝骨关节炎(KOA)患者软骨标本体外分离软骨细胞并培养至第3代。将正常人软骨细胞设为正常组,KOA患者软骨细胞随机分为KOA组、阻滞剂组、含药血清组及含药血清+阻滞剂组。分别用20%空白血清、20%空白血清、20%空白血清+20μmol/L SB203580、20%含药血清、20%含药血清+20μmol/L SB203580进行干预;48h后,收集细胞;采用Western Blot检测细胞中caveolin-1、p-p38蛋白表达,RT-PCR检测细胞中TNF-α、IL-1β、MMP-3、MMP-13 mRNA表达。结果:与正常组比较,KOA组软骨细胞中caveolin-1、p-p38蛋白及TNF-α、IL-1β、MMP-3、MMP-13 mRNA表达显著升高(P<0.01,P<0.05);与KOA组比较,阻滞剂组、含药血清组、含药血清+阻滞剂组软骨细胞中caveolin-1、p-p38蛋白及TNF-α、IL-1β、MMP-3、MMP-13 mRNA表达显著降低(P<0.01);与阻滞剂组比较,含药血清组软骨细胞中caveolin-1蛋白及MMP-13 mRNA表达显著降低(P<0.01,P<0.05),p-p38蛋白及TNF-α、MMP-3 mRNA表达显著升高(P<0.01,P<0.05);含药血清+阻滞剂组软骨细胞中caveolin-1、p-p38蛋白及TNF-α、IL-1β、MMP-3、MMP-13 mRNA表达显著降低(P<0.01,P<0.05);与含药血清组比较,含药血清+阻滞剂组软骨细胞中caveolin-1、p-p38蛋白及TNF-α、IL-1β、MMP-3、MMP-13 mRNA表达显著降低(P<0.01)。结论:壮骨健膝方含药血清保护人退变关节软骨细胞的机制可能与其抑制caveolin-p38MAPK信号通路中关键信号分子caveolin-1、p-p38蛋白表达,降低下游效应产物TNF-α、IL-1β、MMP-3、MMP-13 mRNA表达有关。