具有家族背景大肠癌MMR基因表达及细胞增殖活性研究

目的了解具有家族背景大肠癌ＭＭＲ基因（ｈＭＬＨ１、ｈＭＳＨ２）表达及细胞增殖活性特征。方法应用免疫组化ＳＰ法和流式细胞术（ＦＣＭ），对４６例大肠癌进行研究。结果具有家族背景大肠癌组织ｈＭＬＨ１表达阴性率及其切缘"正常"腺体ｈＭＬＨ１和ｈＭＳＨ２表达阴性率明显高于无家族史的散发性大肠癌（Ｐ＜０．０５）。而其ＰＣＮＡ标记指数、ＤＮＡ异倍体率则显著减低（Ｐ＜０.０１，Ｐ＜０．０５）。结论具有家族背景大肠癌肿瘤细胞及切缘"正常"腺体ｈＭＬＨ１和ｈＭＳＨ２突变率的增高，其增殖指标有所降低。

多重PCR靶向富集结合高通量测序在子宫内膜癌MMR基因突变筛查中的应用

目的探讨多重PCR靶向富集结合高通量测序在子宫内膜癌MMR基因的突变筛查中的应用。方法选择86例豫西地区子宫内膜癌患者的血液为研究对象,提取样本基因组DNA,应用多重PCR扩增技术靶向富集MMR基因的外显子序列,构建文库后采用高通量测序技术检测分析子宫内膜癌患者中的MMR基因突变情况,采用Sanger测序法验证高通量测序结果,并对有无家族史患者的复发例数、复发时间进行分析统计,对中位无瘤生存时间进行统计。结果86例样本中发生MMR基因突变的共有66例,总突变率为76.8%,共发现12种非同义单核苷酸变异(SNV)和2种同义SNV。Sanger测序验证结果与新一代高通量测序结果一致。随访结果表明,不同年龄段的中位复发时间差异无统计学意义(P>0.05);有家族史组复发率明显高于无家族史组(P=0.003);无家族史组、有家族史组中位无瘤生存时间分别为(52.33±0.58)月、(36.33±1.21)月,差异具有统计学意义(P<0.001)。结论多重PCR靶向富集结合高通量测序技术用于MMR基因的突变检测成本低、速度快、通量高,可用于对EC高风险女性的早期筛查,从而为EC临床规范化治疗提供更多资料。

基于生物信息学数据库分析FOXM1在肝癌中的表达及其临床预后意义

目的 通过挖掘癌症数据库中的数据,分析了FOXM1在肝癌患者中的临床表达作用情况及其临床意义。方法 检索Oncomine、GEPIA和HPA数据库中有关肝癌中FOXM1的数据,结合文献二次综合分析,WB进行相互验证。结果 Oncomine数据库分析FOXM1在所有肿瘤类型中的表达,差异有统计学意义的研究结果共78个,其中肝癌中高表达的研究有4个。Oncomine与GEPIA两个数据库分析结果一致发现FOXM1 m RNA在肝癌组织中地表达显著高于正常组织(P<0.001)。HPA网站分析显示,FOXM1蛋白在正常组织中表达水平较低或不表达,但在肝癌组织中呈显著高表达。该蛋白表达结果与mRNA表达一致。生存分析发现,FOXM1表达水平与总生存期和无瘤生存期显著相关,FOXM1高表达患者临床预后差(均P<0,001)。GEPIA在线分析显示在肿瘤的不同临床阶段,各组之间的FOXM1 mRNA表达差异显著(P<0.001)。进一步相关性分析,发现肝癌中FOXM1与MSH4相关性低,而与MLH1、MSH2、MSH3、MSH5和MSH6基因的表达呈现正相关性(均P<0.001);与PIK3CA、mTOR、AKT1、HIF1A及VEGFA的表达均呈现正相关(均P<0.001)。WB结果显示实验组MLH1、MSH2、MSH3、MSH5、MSH6、PIK3CA、mTOR、AKT1、HIF1A和VEGFA的表达水平在一定程度上有所提高。结论 利用生物信息学的相关性方法分析发现,在肝癌组织中,FOXM1高表达,并且和癌症的临床分期以及预后密切相关。其机制可能与调节PI3K/AKT信号通路及错配修复基因MLH1、MSH2、MSH3、MSH5和MSH6有关,值得进一步深入探究。

胃癌发生过程中DNA修复蛋白表达的意义

[目的]探讨错配修复蛋白hMSH2、损伤直接逆转蛋白MGMT、同源重组修复蛋白XRCC2和XRCC3蛋白表达在胃癌诊断中的意义及用于胃癌预警的可能性。[方法]免疫组织化学(SP)法检测56例胃癌患者的癌组织(癌组)、癌旁黏膜上皮(癌旁组)与30例非肿瘤患者(正常组)胃黏膜上皮hMSH2、MGMT、XRCC2及XRCC3蛋白表达情况。[结果]胃癌、癌旁与正常组hMSH2蛋白阳性表达率为76.8%(43/56)、33.9%(19/56)与33.3%(10/30),胃癌组明显高于癌旁和正常组(P<0.05)。MGMT蛋白阳性表达率分别为26.8%(15/56)、32.1%(18/56)与73.3%(22/30),胃癌组和癌旁组明显低于正常组(P<0.05);XRCC2蛋白阳性表达率分别为32.1%(18/56)、3.6%(2/56)与0%(0/30),胃癌组明显高于癌旁和正常组(P<0.05);XRCC3蛋白阳性表达率分别为76.8%(43/56)、35.7%(20/56)与36.7%(11/30),胃癌组明显高于癌旁和正常组(P<0.05)。粘液癌、低分化与高中分化癌组hMSH2蛋白阳性表达率分别为62.5%(10/16)、76.9%(20/26)与85.7%(12/14);MGMT分别为12.5%(2/16)、34.6%(9/26)与28.6%(4/14);XRCC2分别为18.8%(3/16)、42.3%(11/26)与28.5%(4/14);XRCC3分别为56.3%(9/16)、84.6%(22/26)与85.7%(12/14),这些蛋白表达在各组间差异无显著性意义(P>0.05)。胃癌组织中hMSH2阳性组和阴性组MGMT蛋白阳性表达率分别为34.9%(15/43)和0%(0/13),两种蛋白表达明显正相关(r=0.333,P<0.05)。[结论]hMSH2、MGMT、XRCC2及XRCC3蛋白的异常表达说明胃癌中存在多种形式的DNA损伤。检测它们的表达会有助于诊断和预警胃癌。

前列腺癌中DNA错配修复基因PMS2与MSH6的表达及临床意义

目的观察前列腺癌中DNA错配修复基因(MMR)PMS2和MSH6的表达及意义。方法采用免疫组化SP法检测40例前列腺癌癌组织及癌旁组织中MMR蛋白的表达情况。结果 PMS2和MSH6在前列腺癌中的阳性率分别为77.5%和85%,在癌旁组织中的阳性率分别为47.5%和37.5%;两组比较PMS2和MSH6的表达差异显著(P<0.01)。前列腺癌组织中PMS2的表达与患者血清PSA,肿瘤临床分期和Gleason评分存在相关性(P<0.01)。结论 MSH6和PMS2的高表达可能与前列腺癌的发生有关,且PMS2可能与前列腺癌的侵袭、转移有密切关系。

错配修复基因蛋白在结直肠癌诊治中的临床应用

目的:探讨错配修复基因(mismatch repair gene,MMR)蛋白MLH1、MSH2、MSH6、PMS2在结直肠癌中的表达及在临床中的应用。方法:选取四川省人民医院2015年1月至2016年9月收治的607例结直肠癌患者,采用免疫组织化学法检测手术标本中MMR蛋白的表达情况,研究其与临床病理学的关系,并评价其在Lynch综合征和散发性结直肠癌筛查中的价值。结果:607例患者中MMR表达缺失率为35.58%。MMR蛋白表达缺失的阴性组与表达正常的阳性组,在年龄、性别、肿瘤大小、P53、CD34、D2-40的比较,差异均无统计学意义(P>0.05);两组患者在肿瘤位置、分化程度、TNM分期、淋巴结转移、VEGF、Ki-67的比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。联合检测MLH1、MSH2、PSM2、MSH6蛋白可以作为初步筛选Lynch综合征患者的方法。结论:对结直肠癌患者的手术标本进行MMR检测,筛查Lynch综合征患者和家族成员,进行管理及干预,可降低部分人群患结直肠癌的风险。

脆性组氨酸三聚体基因及错配修复基因hMLH1、hMSH2在口腔鳞状细胞癌中的表达及意义

目的:探讨脆性组氨酸三聚体基因(FHIT)和错配修复基因hMLH1、hMSH2在口腔鳞状细胞癌组织中的表达及其相互关系。方法:采用免疫组化法检测69例口腔鳞状细胞癌和40例正常口腔黏膜组织中FHIT和hMLH1、hMSH2的表达情况。资料的统计学处理用SPSS软件完成,比较用卡方检验。结果:口腔鳞状细胞癌组织中FHIT、hMLH1和hMSH2的阳性表达率(46.4%,47.8%,55.1%)低于正常口腔黏膜组织(77.5%,77.5%,80.0%),差异有显著性(P<0.05)。结论:FHIT、hMLH1和hMSH2可能在口腔鳞状细胞癌的发生发展中发挥重要作用。

前列腺癌DNA错配修复基因缺失的表达研究

为了探讨DNA错配修复基因 (MMR)在前列腺癌中的表达及其意义 .采用免疫组化方法检测 11例前列腺癌患者的 2 0份标本中错配修复基因MSH2 ,MLH1,PMS1和PMS2 的表达 ,分析了其与前列腺癌发生与发展的关系 .结果 :这 4种MMR基因在肿瘤区的表达都有不同程度的降低 ,PMS1在肿瘤细胞中大部分缺失或降低 ,在肿瘤区的表达率依次为MLH1>MSH2 >PMS2 >PMS1.结论 :在前列腺癌组织中PMS1和PMS2 蛋白表达的丢失在MMR突变中是占主导的 。

林奇综合征的诊治进展

林奇综合征是最常见的一种遗传性结直肠癌综合征,占结直肠癌的2%～5%。林奇综合征指的是那些具有错配修复基因(MMR)突变导致易患结直肠癌和其他恶性肿瘤的个体,包括那些已经患有肿瘤和尚未发生肿瘤的人。本文就林奇综合征的诊治进展做一综述。

结直肠癌微卫星不稳定(MSI)与其发病及预后的关系

抑癌基因及癌基因之间的相互作用是结直肠癌发病主要发病原因,近年研究发现微卫星不稳定成为结直肠癌发病另一重要机制,尤其是遗传性非息肉病性结直肠癌(hereditary non-polyposis colorectal cancer,HNPCC)及部分散发性结直肠癌发生的重要原因。微卫星不稳定的结直肠患者具有独特的临床病理特征,如低分化、黏液腺癌、多位于右半结肠、淋巴细胞浸润明显等。化疗是结直肠癌患者手术后重要治疗手段,氟尿嘧啶类药物为结直肠癌患者化疗的基本药物,因此结直肠癌患者对于氟尿嘧啶类药物敏感性成为患者能否从化疗中获益的重要因素,也成为各位学者的研究热点。近年来有学者提出微卫星不稳定及其他分子标记物可预测结直肠癌患者化疗敏感性,同时也可成为判断预后的指标。微卫星不稳定将来可成为结直肠癌患者的预后及化疗敏感性的判断因素,也可为个体化治疗提供理论依据,但目前尚需大样本的前瞻性临床试验进一步证实。结直肠癌目前在国内外发病率均逐渐升高,成为危害人类生命的重要疾病,且遗传倾向明显,是目前人类恶性肿瘤中遗传变化最明显的肿瘤。对于结直肠癌的发病研究表明,染色体不稳定(chromosomeinstability)为结直肠癌发病的主要原因,其机制仍未完全阐明。近年的研究发现微卫星不稳定(microsatelite instability)为结直肠癌发病的另一重要机制,是遗传性非息肉病性结直肠癌(hereditarynon-polyposis colorectal cancer,HNPCC)及部分散发性结直肠癌发生的重要原因。目前关于微卫星不稳定的研究不仅于发病机制上,与结直肠癌预后的关系也成为目前研究的热点。

脆性组氨酸三聚体基因及错配修复基因hMSH2在口腔鳞状细胞癌中的表达及意义

目的探讨脆性组氨酸三聚体基因(FHIT)和hMSH2基因在口腔鳞状细胞癌组织中的表达及其相互关系。方法采用免疫组化法检测69例口腔鳞状细胞癌和40例正常口腔粘膜组织中FHIT和hMSH2的表达情况。资料的统计学处理用SPSS软件完成,比较用卡方检验。结果口腔鳞状细胞癌组织中FHIT和hMSH2的阳性表达率(46.4%,55.1%)低于正常口腔粘膜组织(77.5%,80.0%),有显著差异。结论FHIT和hMSH2可能在口腔鳞状细胞癌的发生发展中发挥重要作用。

家族背景大肠癌微卫星不稳定性、错配修复基因表达的研究

目的:了解具有家族背景大肠癌微小卫星 DNA 不稳定性(MIN)、MMR 基因(hMLH1、hMSH2)表达及细胞增殖活性特征。方法:应用银染聚合酶链反应-单链构相多态性(PCR-SSCP)分析技术、免疫组化 SP 法和流式细胞术(FCM),对46例大肠癌进行研究。结果:与无家族史的原发性大肠癌相比,具有家族背景大肠癌 MIN 的表达增高(P<0.05);癌家族史、MIN 与大肠癌发病年龄轻、右半大肠癌、大肠外癌及低分化癌的发生率高均有明显关系(P<0.01,P<0.05);癌组织 hMLH1 表达阴性率及其切缘“正常”腺体 hMLH1 和 hMSH2 表达阴性率明显增高(P<0.05);而其 PCNA 标记指数、DNA 异倍体率则显著减低(P<0.01,P<0.05).hMLH1和 hMSH2表达阴性与 MIN 有显著的相关性(P<0.05).结论.MIN 在具有家族背景大肠癌中起着明显的作用。具有家族背景及 MIN阳性大肠癌肿瘤细胞及切缘“正常”腺体 hMLH1和 hMSH2突变率的增高,其增殖指标有所降低.

错配修复缺陷子宫内膜癌临床病理形态特征及临床意义

目的探讨碱基错配修复(MMR)缺陷子宫内膜癌的临床病理特征与临床意义。方法收集天津市中心妇产科医院常规开腹手术者中≤50岁内膜癌患者共108例,进行4种碱基错配修复(MMR)蛋白(MLH1、MSH2、MSH6及PMS2)的免疫组化检测,MMR蛋白表达完全缺失提示MMR基因缺陷,依据免疫组化结果进行分组。结果108例内膜癌中,33.3%(36例)至少1种MMR表达缺失。重点对36例MMR蛋白表达缺失患者行临床病理特征分析并与对照组比较。31%伴有深肌层侵犯,25%可见肿瘤细胞周围有密集的淋巴细胞浸润。35%的内膜癌患者合并黏液分化及透明细胞分化等多种分化方式,14%伴有异质性分化。20%患者同时合并卵巢癌。背景内膜多为增生期内膜。倾向深肌层侵犯、多样性分化与异质性分化、肿瘤周围淋巴细胞浸润、同时合并卵巢癌及背景内膜的特征与对照组相比差异有统计学意义。结论 MMR缺陷子宫内膜癌具有区别于传统Ⅰ型及Ⅱ型内膜癌的特征。

基因突变与胰腺癌

胰腺癌的发病率在我国呈逐年上升趋势 ,由于其起病隐匿 ,恶性程度高 ,早期诊断困难 ,出现临床症状时多属晚期 ,因此患者的预后较差。近年来随着分子生物学技术的发展 ,对胰腺癌发生机制的研究已进入基因水平 ,研究表明胰腺癌的发生是多基因异常改变的结果。就 p16基因 ,p5 3基因 ,DPC4基因 ,Ras基因及MMR基因与胰腺癌的关系作一综述。

Lynch综合征相关遗传基因及病理诊断对临床的指导价值

目的探讨Lynch综合征相关遗传基因及病理诊断对临床的指导价值。方法选取2015年1月～2018年3月本院收治的结直肠癌及子宫内膜癌患者358例,其中44例诊断为lynch综合征者为观察对象,应用免疫组织化学(IHC)检测MLH1/MSH2/MSH6/PMS2蛋白,多重PCR技术检查微卫星不稳定(MSI)情况,统计LS首发疾病种类及MMR基因表达情况。结果结直肠癌者21例(48.8%),子宫内膜癌者13例(29.5%),胃癌者3例(6.8%),泌尿系统者3例(6.8%),其他部位者4例(9.1%)。结直肠癌Lynch综合征患者中最常见的MMR基因缺失为MLH1及PMS2,子宫内膜癌Lynch综合征患者中最常见的MMR基因缺失为MSH2及MSH6。对于MLH1及MSH2突变携带的结直肠癌患者,其结肠癌发病部位以右半结肠居多(24例,77.4%),结肠癌合并直肠癌者8例(25.8%),子宫内膜癌者病理组织学类型中:子宫内膜样腺癌11例(84.6%),透明细胞癌及浆液性癌各1例(7.7%)。结论对于结直肠癌者,尤其是右半结肠癌MLH1及PMS2阙如,其出现Lynch综合征的概率较高,对于子宫内膜癌者,病理类型为鳞癌且MSH2及MSH6阙如者,其发生Lynch综合征的概率较高。

Lynch综合征子宫内膜癌的研究进展

文章就Lynch综合征子宫内膜癌的诊断标准、遗传分子学研究,及筛查策略及防治方面的相关文献进行综述,旨在探讨Lynch综合征子宫内膜癌的研究进展,为临床诊断和治疗提供依据。

错配修复蛋白在子宫内膜活检组织中的表达

目的探讨错配修复基因（mismatch repair gene,MMR）MLH1、MSH2、PMS2和MSH6蛋白在子宫内膜活检组织中的表达情况,并分析4种蛋白的表达与子宫内膜腺癌的发生与患者年龄的关系,为早期病变及高危人群提供有效的参考指标。方法子宫内膜腺癌患者作为实验组,子宫内膜非典型增生、子宫内膜复杂性增生和正常周期子宫内膜病例作为对照组,采用免疫组化En Vision法检测MMR蛋白,分别进行比较,观察上述4种蛋白在不同子宫内膜活检组织中的表达规律,应用SPSS19.0统计软件进行统计学分析。结果 40例子宫内膜腺癌活检组织中20例（50%）有一个以上MMR蛋白表达阴性,在不典型增生、复杂性增生和正常周期子宫内膜组中一个以上为阴性表达比例分别为9例（30%）、10例（33%）、4例（13%）,各组间的差异有统计学意义（P=0.014）。子宫内膜腺癌中MMR蛋白阴性表达率分别为MLH1 37.5%（15/40）、MSH2 15.0%（6/40）、PMS220.0﹪（8/40）、MSH6（0/0）;与对照组分别进行比较,MLH1和PMS2的表达差异均有统计学意义（P〈0.05）,MSH2和MSH6的表达差异均无统计学意义（P〉0.05）。子宫内膜腺癌患者50岁以下,50~60岁,〉60岁3个年龄组间4种MMR蛋白一个以上为阴性的比例为6/11、8/17、7/12,各组间差异无统计学意义（P〉0.05）,但MLH1、MSH2和PMS2的阴性表达更倾向发生在50~60岁患者中。结论 MMR基因突变与非典型增生及子宫内膜腺癌的发生有一定的相关性,在临床病理指标上4种MMR蛋白缺失表达与患者的年龄无明显相关性。

乳腺癌与癌前病变的微卫星不稳定性与3p杂合性缺失

目的探讨微卫星不稳定性（MSI）与3号染色体短臂杂合性缺失（LOH）在乳腺癌发生机制中的作用及其临床病理学意义。方法采用PCR—SSLP及银染方法检测41例乳腺癌和13例癌前病变中MSI状态以及3p上11个微卫星位点LOH发生情况；应用免疫组化SP法检测错配修复（MMR）基因hMLH1、hMSH2和3p上相关基因的表达情况。结果（1）乳腺癌MSI发生率为36．6％，低分化乳腺癌MSI发生率明显高于高中分化组；癌前病变的发生率为15．4％；良性增生均表现微卫星稳定。（2）乳腺癌中微卫星异常主要分布于D3S1766、D2S2739和TP533个位点，癌前病变和乳腺癌具有相同的高频不稳定位点D3S1766和D2S2739。（3）97．0％乳腺癌患者发生3pLOH，检出率较高的位点分别是D3S1295、D3S1029和D3S1038。癌前病变患者3pLOH发生率为41．7％，缺失率较高的位点是D3S1295和D3S1029。（4）hMLHl和hMSH2蛋白在乳腺癌中阳性表达率分别为45．0％和40．0％，在癌前病变中分别为61．5％和76．9％，均明显低于良性增生组（P〈0．05）。乳腺癌中两种蛋白阳性率与组织学分级相关（P〈0．05），高分化组明显高于低中分化组。MSI＋乳腺癌和癌前病变均表现MMR蛋白表达缺失。结论错配修复基因表达缺陷和MSI是乳腺癌多步骤发展过程的早期事件，在进展阶段MSI与乳腺癌低分化相关；D3S1766和D2S2739可能是检测乳腺癌与癌前病变MSI较敏感的位点。3p最小共同缺失区位于3p14-p25，提示该区域有与乳腺肿瘤发生发展相关并影响其生物学行为的候选抑癌基因。

子宫内膜异位症中hMLH1表达缺陷与其启动子区甲基化的关系

目的探讨错配修复基因(mismatch repair gene,MMR)hMLH1(human mutL homolog1)在子宫内膜异位症(endometriosis,EMs)组织及正常子宫内膜组织中的表达,分析这种差异表达与hMLH1启动子区甲基化的关系。方法 选择2009年1月至10月本院收治的卵巢子宫内膜异位症患者23例的异位内膜标本纳入EMs组(所有患者术前未经激素治疗)。选择同期在本院行节育术和子宫脱垂手术患者20例的正常子宫内膜标本纳入对照组。采用免疫组织化学SP法检测两组标本中hMLH1的表达,并从标本中提取DNA,采用甲基化特异性PCR(methylation specificity PCR,MSP)检测hMLH1启动子区的甲基化状态,比较两组hMLH1的表达情况及甲基化状态(本研究遵循的程序符合本院人体试验委员会所制定的伦理学标准,得到该委员会批准)。结果 EMs组hMLH1表达阳性率为65%(15/23),对照组为95%(19/20),两组比较,差异有显著意义(P<0.05)。EMs组中,hMLH1启动子区完全和部分甲基化率为39%(9/23),对照组仅1例为部分甲基化,占5%(1/20),两组比较,差异有显著意义(P<0.05)。结论 hMLH1无表达在子宫内膜异位症的发生中起重要作用。hMLH1启动子区甲基化是导致hMLH1表达缺陷的部分原因。

错配修复基因与涎腺肿瘤的关系

错配修复(mismatch repair,MMR)是DNA复制后的一种修复机制,对维持基因组稳定起重要作用。错配修复基因功能缺陷是继癌基因激活、抑癌基因失活之后又一肿瘤的发生、发展机制,错配修复基因的异常表达与全身多种肿瘤相关。涎腺肿瘤为口腔颌面部常见肿瘤之一,具有与其他系统肿瘤相似的组织学类型,多来源于肌上皮。近年来,有关涎腺肿瘤与错配修复基因的关系正逐步成为研究热点,本文就错配修复基因的组成、作用机制以及与涎腺肿瘤发生、发展的关系作一综述。