结直肠癌组织基因突变与临床病理及MMR蛋白表达的相关性分析

目的分析结直肠癌组织KRAS、NRAS、BRAF和PIK3CA基因突变与临床病理因素及MMR蛋白表达的相关性。方法采用扩增阻碍突变系统(ARMS)和免疫组化法对122例结直肠癌石蜡组织进行回顾性分析。结果 122例结直肠癌组织中KRAS、NRAS、BRAF和PIK3CA基因突变率分别为48.4%(59/122)、4.1%(5/122)、5.7%(7/122)和5.7%(7/122)。检出KRAS与PIK3CA双突变病例3例,BRAF与PIK3CA双突变1例,未发现BRAF与KRAS或NRAS基因同时突变病例。女性患者KRAS突变率高于男性患者(P<0.05),低分化腺癌KRAS突变率高于高、中分化腺癌(P<0.001)。女性患者、有淋巴结转移者和MLH1蛋白表达缺失者与男性患者、无淋巴结转移和MLH1表达者比(P<0.05),PMS2蛋白表达缺失者比表达者的BRAF突变率更高。黏液腺癌PIK3CA突变率较其他肿瘤组织学类型高(P<0.05)。结论该4种基因在结直肠癌的突变率依次为KRAS、 BRAF、PIK3CA、NRAS,不存在4种基因全突变及3种基因突变。BRAF与KRAS、NRAS基因突变存在相互排斥现象。KRAS、BRAF、PIK3CA基因突变与结直肠癌临床病理特征存在相关性。

结直肠癌MMR蛋白和MSI检测对比及临床病理特征分析

目的探讨结直肠癌(CRC)患者MMR蛋白表达与微卫星不稳定(MSI)检测的一致性以及与临床病理特征的相关性,分析两种检测结果不一致的原因。方法选取392例CRC石蜡包埋组织(FFPE)样本,采用免疫组化(IHC)法检测4种MMR蛋白(MLH1、MSH2、MSH6及PMS2)表达,至少1种蛋白表达缺失判定为错配修复蛋白表达缺失(dMMR),全部阳性判定为错配修复蛋白表达完整(pMMR);采用PCR毛细管电泳法检测MSI,将至少2个单核苷酸重复位点发生改变,归纳为高度MSI(MSI-H);仅有1个单核苷酸重复位点发生改变,归纳为低度MSI(MSI-L);未发生改变,归纳为微卫星稳定(MSS)。结果392例CRC中,dMMR为18.9%(74/392),MSI-H占比18.1%(71/392)。IHC法检测的敏感度、特异性分别为97.2%和98.4%;PCR法检测结果的敏感度、特异性分别为93.2%和99.4%,两种检测方法的一致性为98.2%。7例检测结果不一致的样本中,2例PCR法检测结果为MSI-H,IHC法检测结果为pMMR;5例PCR法检测结果为MSS,IHC法检测结果为dMMR,其中2例MSH6蛋白单独缺失,3例肿瘤为黏液腺癌。dMMR组与pMMR组、MSI-H组与MSS/MSI-L组在发病年龄、肿瘤直径、肿瘤部位、组织类型、临床分期及淋巴结转移等方面比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论IHC法检测MMR蛋白与PCR法检测MSI具有较高的一致性。MSH6单独缺失时,PCR检测可能表现为MSS。肿瘤中含黏液时,肿瘤实际占比<50%可能对PCR检测有一定的影响。CRC中dMMR/MSI-H患者具有明显的临床病理特点,对临床病理诊断、治疗有一定的指导意义。

TCF-4、MMR蛋白在结肠癌组织中的表达水平及其与临床病理特征和预后的关系

目的分析T细胞因子4(TCF-4)、DNA错配修复(MMR)蛋白在结肠癌组织中的表达水平及其与临床病理特征和预后的关系。方法随机选择医院2016年1月1日~2018年1月1日诊治的结肠癌患者165例。问卷调查患者年龄、性别、肿瘤直径、分化程度、浸润程度、淋巴结转移、脉管侵犯、神经侵犯情况。使用细针穿刺获取肿瘤组织和癌旁组织2 cm,将组织送至病理实验室。常规脱水后,石蜡包埋,厚度切片(3μm),使用免疫组化法检测TCF-4、MMR蛋白表达情况。统计患者3年生存时间。比较结肠癌和癌旁组织的TCF-4、MMR蛋白表达情况,分析T细胞因子4、MMR蛋白在结肠癌组织中表达情况与临床病理特征和预后的关系。结果结肠癌组织中TCF-4阳性表达率高于癌旁组织(P<0.05),MMR蛋白阳性率低于癌旁组织(P<0.05)。男性和女性结肠癌患者TCF-4、MMR蛋白表达率差异比较无统计学意义(P>0.05)。在肿瘤直径、分化程度、浸润程度、淋巴结转移、脉管侵犯、神经侵犯方面结肠癌患者TCF-4、MMR蛋白表达率差异比较有统计学意义(P<0.05)。TCF-4阳性表达的患者平均生存时间为(10.28±2.87)个月,阴性表达患者平均生存时间(16.87±1.58)个月。MMR蛋白阳性表达的患者平均生存时间为(19.68±1.02)个月,阴性表达患者平均生存时间(11.74±1.51)个月。TCF-4阳性表达患者生存时间短于阴性患者(P<0.05),MMR蛋白阳性表达患者平均生存时间多于阴性患者(P<0.05)。TCF-4阳性表达与预后负相关(P<0.05),MMR蛋白表达与预后正相关(P<0.05)。结论TCF-4在结肠癌组织中的高表达,MMR蛋白结肠癌中低表达,TCF-4影响预后,而MMR蛋白是其保护因素,有利于预后。

错配修复蛋白表达在胃癌中的临床病理特征及与Ki67、P53相关性的研究

目的:探究93例胃癌患者中错配修复蛋白(MMR蛋白)的表达,并分析胃癌患者MMR蛋白表达缺失与其胃癌临床病理特征之间的联系以及其与Ki67和P53之间的相关性,以期为临床治疗提供理论依据。方法:采用免疫组织化学染色法测定93例胃癌组织4种MMR蛋白(MLH1、MSH2、MSH6和PMS2)的表达,分析临床病理特征和微卫星不稳定性(MSI)有无相关性,同时检测Ki67、P53蛋白,并分析与MSI的相关性。结果:在93例胃癌中dMMR组的缺失率达到27.96%,MLH1与PMS2均缺失20例。dMMR组胃癌中Ki67蛋白表达均≥30%,统计分析dMMR组与Ki67蛋白表达呈正相关(r=0.271,P<0.01),dMMR组与P53表达无相关性。结论:MLH1与PMS2在胃癌中有一定比例的成对缺失,dMMR组胃癌与年龄、性别、肿瘤大小、分化程度、肿瘤位置、TNM分期等均不相关,因MSI型胃癌中Ki67表达较高,进一步说明MSI与Ki67对评估胃癌的恶性程度有协同作用。

MMR蛋白及MLH1甲基化在子宫内膜癌中的表达及意义

目的通过检测错配修复(MMR)蛋白缺失及MLH1甲基化状态,结合临床病理特征,筛选可疑Lynch综合征(LS)相关子宫内膜癌。方法收集2010年1月-2020年5月大兴区人民医院行全切子宫110例子宫内膜癌患者的临床病理资料,免疫组化法测定子宫内膜癌中MMR蛋白的表达,荧光PCR探针法测定MLH1甲基化状态,统计患者年龄、肿瘤大小、浸润深度、累及部位、组织学分化、分型、淋巴结转移、显著淋巴细胞浸润等不同临床病理状态下MMR蛋白水平表达情况。结果110例子宫内膜癌患者病灶中MMR蛋白,24例至少一种MMR蛋白表达阴性,阴性率为21.82%(24/110),MLH1阴性者行甲基化检测,2例未发生MLH1甲基化。单因素及多因素Logistic回归分析:淋巴结转移、分化程度、显著淋巴细胞浸润是影响子宫内膜癌MMR蛋白表达的独立因素(P0.05)。结论淋巴结转移、分化程度及显著淋巴细胞浸润是MMR蛋白异常表达的相对特征性病理状态,应引起病理医师的重视; MMR蛋白联合MLH1甲基化能筛选可疑LS,指导家系筛查,便于早监管和治疗。

错配修复基因(MMR)蛋白在子宫内膜非典型增生中的表达及其意义

目的探讨子宫内膜非典型增生中错配修复基因(mismatch repair gene,MMR)蛋白MLH1、MSH2、PMS2和MSH6的表达,微卫星不稳定性及意义。方法应用免疫组织化学法检测DNA错配修复蛋白MLH1、PMS2、MSH2和MSH6在子宫内膜非典型增生(50例)及正常增生期宫内膜组织(50例)中的表达,分析微卫星不稳定性与子宫内膜非典型增生临床特征的关系。结果 50例子宫内膜非典型增生组织中MLH1、MSH2、PMS2、MSH6失表达率分别为12%(6/50)、14%(7/50)、12%(6/50)和8%(4/50);MLH1、PMS2、MSH6的表达率高于正常增生期子宫内膜,差异具有统计学意义(P<0.05),两组MSH2的表达差异无统计学意义(P=0.338)。以蛋白失表达情况分组,子宫内膜非典型增生组MSI-H表型7例(14%),MSI-L表型9例(18%),MSS表型34例(68%),与正常增生期宫内膜组比较,差异具有统计学意义(P=0.005)。在子宫内膜非典型增生中,年龄≤50岁者MSI-H明显高于>50岁者(P=0.001)。结论 MMR系蛋白失表达及MSI可能是子宫内膜非典型增生重要分子事件之一。

错配修复蛋白联合p53蛋白检测在肝细胞癌预后中的应用

目的探讨错配修复(mismatch repair,MMR)蛋白和p53突变与肝细胞癌临床病理特征的关系及其在预后中的临床应用价值。方法收集220例肝细胞癌标本制作组织芯片,采用免疫组化EnVision两步法检测MMR蛋白(MLH1、MSH2、MSH6和PMS2)和p53蛋白的表达,并复习相关文献。结果肿瘤细胞MMR蛋白缺失率为64.9%(131/202),其与肿瘤大小、分化程度、转移部位相关(P=0.015、P=0.017、P=0.027);p53蛋白突变率为72.4%(152/210),其与分化程度、脉管内癌栓、AFP水平相关(P=0.009、P=0.019、P=0.003);单因素生存分析表明肿瘤大小、AFP水平、复发转移及部位是肝细胞癌预后较差的危险因素;Cox多因素回归模型表明肝细胞癌中肝外转移者死亡风险更高;MMR缺陷与p53突变无相关性;Kaplan-Meier生存分析显示单一MMR缺陷和p53与肝细胞癌患者的总生存期和无进展生存期无关,但MMR缺陷患者中p53与肝细胞癌患者总生存期(P=0.009)和无进展生存期(P=0.013)显著相关。结论肝细胞癌中有明显的MMR缺陷和p53突变,两者联合与肝细胞癌患者预后较差有关。

错配修复基因蛋白表达与老年子宫内膜癌患者临床病理特征的相关性

目的观察子宫内膜癌老年患者配错修复蛋白(MMR)的表达,分析MMR蛋白表达与其临床病理特征的相关性。方法回顾性分析经手术治疗并在术后经病理确诊为子宫内膜癌的老年患者112例临床资料,取患者石蜡包埋组织切片,采用免疫组织化学染色法测定其MMR蛋白表达,观察老年子宫内膜癌患者整体的MMR蛋白表达缺失情况;比较不同临床病理特征患者MMR蛋白表达缺失情况,包括年龄、病理类型、分化程度、病理分期、是否发生转移等;将存在差异的临床病理特征筛选出,采用Spearman相关性分析检验MMR蛋白表达与老年子宫内膜癌患者主要临床病理特征的相关性。结果112例子宫内膜癌组织中,4种蛋白同时表达者83例(74.11%),均为散发癌;至少有1种MMR蛋白表达缺失者29例(25.89%),为可疑的Lynch综合征;累及子宫下段者、发生淋巴结转移者、病理分期为Ⅲ期者MMR蛋白缺失率高于其他未累及子宫下段者、未发生淋巴结转移者及病理分期为Ⅰ~Ⅱ期者,差异有统计学意义(P<0.05);经Spearman相关性检验,老年子宫内膜癌患者MMR蛋白与累及子宫下段、病理分期、淋巴结转移均呈正相关(r=0.429、0.379、0.353,均P<0.05)。结论MMR蛋白表达异常(缺失)与老年子宫内膜癌患者病理分期、淋巴结转移等临床病理特征相关,可考虑将其辅助用于老年子宫内膜癌初步筛选,利于疾病的早期筛查与诊断。