非小细胞肺癌组织中lncRNA MNX1-AS1、miR-218-5p的表达及临床意义

目的研究非小细胞肺癌(NSCLC)组织中长链非编码RNA(LncRNA)MNX1-AS1、微RNA(miR)-218-5p表达及临床意义。方法选取2015年1月至2017年1月湖北省中医院诊治的120例NSCLC患者,取术中获取的NSCLC组织和癌旁组织,应用荧光定量PCR检测LncRNA MNX1-AS1、miR-218-5p表达。分析NSCLC组织中LncRNA MNX1-AS1与miR-218-5p的相关性及与临床病理特征的关系。以LncRNA MNX1-AS1、miR-218-5p相对表达量的均值(2.321、1.213)为界分为高、低表达组,分析其对NSCLC患者生存预后的影响。结果NSCLC组织中LncRNA MNX1-AS1表达高于癌旁组织,miR-218-5p表达低于癌旁组织(P<0.05)。LncRNA MNX1-AS1与miR-218-5p呈负相关(r=-0.561,P<0.01)。不同淋巴结转移、肿瘤分期患者LncRNA MNX1-AS1、miR-218-5p表达比较,差异有统计学意义(P<0.05)。LncRNA MNX1-AS1高表达组生存曲线低于LncRNA MNX1-AS1低表达组,miR-218-5p低表达组生存曲线低于miR-218-5p高表达组(P<0.05)。结论NSCLC组织中LncRNA MNX1-AS1表达升高,miR-218-5p表达降低,两者与患者预后不良有关,可能作为预后评估指标。

lncRNA MNX1-AS1在非小细胞肺癌中的表达及调控PI3K/AKT通路对癌细胞生物学行为的影响

目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)MNX1-AS1(lncRNA MNX1-AS1)在非小细胞肺癌(NSCLC)中的生物学功能及可能的作用机制。方法:选取2017年6月至2019年3月期间在本院进行手术治疗的75例NSCLC患者癌组织及癌旁组织标本,RT-qPCR法检测标本lncRNA MNX1-AS1表达水平,分析lncRNA MNX1-AS1表达与NSCLC临床病理特征及预后的相关性;体外培养NSCLC细胞系PC-9细胞,分别转染si-MNX1-AS1(si-MNX1-AS1组)、si-NC(si-NC组),MTT法及EdU实验检测各组PC-9细胞增殖;Transwell小室法检测细胞迁移与侵袭;Western blot实验检测PI3K/AKT通路相关蛋白表达。结果:lncRNA MNX1-AS1在NSCLC癌组织与细胞系中表达水平显著升高(P<0.05)。lncRNA MNX1-AS1表达与TNM分期和淋巴转移有关(P<0.05),Kaplan-Meier生存分析显示,lncRNA MNX1-AS1高表达组患者3年累积生存率显著低于低表达组,差异有统计学意义(42.11%vs 81.08%,χ^(2)=11.132,P=0.001);与si-NC组比较,si-MNX1-AS1组PC-9细胞的增殖、迁移与侵袭能力以及p-PI3K、p-AKT、p-mTOR蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。结论:lncRNA MNX1-AS1在NSCLC中表达水平升高,可能通过激活PI3K/AKT通路影响NSCLC细胞的增殖、迁移、侵袭,促进NSCLC的发生发展。

干扰长链非编码RNA MNX1-AS1对卵巢癌细胞的干样特性、氧化应激以及线粒体功能损伤的影响

目的:探讨干扰长链非编码RNA(lncRNA)MNX1-AS1对卵巢癌细胞的干样特性、氧化应激以及线粒体功能损伤的影响。方法:将KOV3细胞随机分组,进行处理及培养,RT-PCR检测RNA MNX1-AS1的表达,筛选干扰效果最明显的序列;观察干细胞成球情况;免疫印迹检测干细胞标记物蛋白八聚体结合转录因子4(OCT4)、性别决定区Y框蛋白(SOX2)和ATP结合转运蛋白G超家族成员2(ABCG2)的表达;检测氧化应激标记物丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)的含量;荧光探针检测活性氧(ROS)的含量;流式细胞仪检测线粒体膜电位的变化;免疫印迹检测B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)/Bcl-2相关X蛋白(Bax)、活化胱天蛋白酶3(cleaved cas3)/cas3、c-Myc的表达。结果:3个序列对比显示MNX1-AS1-shRNA3干扰组最为显著,选择此组为后续实验干扰组,分组为对照组、阴性对照组(shRNA-NC)、干扰组(MNX1-AS1-shRNA3);与对照组相比,MNX1-AS1-shRNA3干扰组SKOV3干细胞成球数量、直径减小,干细胞标记物蛋白OCT4、SOX2、ABCG2的表达显著降低,SOD活性、c-Myc蛋白表达均显著降低,线粒体损伤标记物蛋白的表达(Bax/Bcl-2、cleaved cas3/cas3)、MDA与ROS含量均显著升高,线粒体的膜电位下降。结论:干扰lncRNA MNX1-AS1诱导卵巢癌细胞的干样特性降低、氧化应激增强、线粒体损伤加重,干扰lncRNA MNX1-AS1对SKOV3细胞抑制效果显著,具有靶向治疗卵巢癌的潜力。

lncRNA MNX1-AS1在结直肠癌中的临床意义及功能研究

目的研究长链非编码RNA运动神经元和胰腺同源盒1反义RNA1(lncRNA MNX1-AS1)在结直肠癌组织中的表达及其临床意义,并探讨MNX1-AS1在结直肠癌中发挥的生物学功能。方法采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测MNX1-AS1在60例结直肠癌组织和癌旁组织中的表达水平,并分析结直肠癌组织中MNX1-AS1的表达水平与患者临床病理参数的关系。MNX1-AS1 siRNA转染结直肠癌细胞系SW480抑制MNX1-AS1的表达后,采用CCK8实验检测细胞增殖能力,流式细胞仪检测细胞周期变化,Transwell实验检测细胞的转移能力,Western blotting检测细胞中细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、细胞周期素依赖性蛋白激酶4(CDK4)、基质金属蛋白酶-7(MMP7)蛋白的表达。结果qRT-PCR结果显示MNX1-AS1在结直肠癌组织中的表达高于癌旁组织(P<0.05),MNX1-AS1的表达水平与TNM分期、淋巴结转移和分化程度有关(P<0.05)。干扰SW480细胞中MNX1-AS1的表达后,细胞增殖和转移能力均下降(P<0.05),细胞周期阻滞在G0/G1期(P<0.05),细胞中cyclin D1、CDK4和MMP7蛋白表达减少(P<0.05)。结论MNX1-AS1在结直肠癌组织中呈高表达,且其表达水平与TNM分期、淋巴结转移和分化程度有关。调控cyclin D1、CDK4、MMP7蛋白的表达可能是MNX1-AS1影响结直肠癌细胞增殖和转移的机制之一。

lncRNA MNX1-AS1通过调控miR-218-5p影响非小细胞肺癌细胞的增殖、凋亡及迁移

目的 探讨长链非编码RNA(lncRNA)MNX1-AS1通过调控miR-218-5p的表达对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞增殖、凋亡和迁移的影响。方法 qRT-PCR检测MNX1-AS1和miR-218-5p在肺癌细胞系及肺正常上皮细胞系中的表达;采用双荧光素酶报告基因实验和RNA pull down实验验证MNX1-AS1和miR-218-5p之间的靶向关系;干扰A549细胞中MNX1-AS1和miR-218-5p的表达后,MTT、流式细胞术和Transwell实验检测MNX1-AS1靶向miR-218-5p对癌细胞增殖、凋亡、迁移及侵袭的影响。结果 与肺正常上皮细胞系相比,肺癌细胞系中MNX1-AS1表达升高,miR-218-5p表达降低(P<0.05);荧光素酶报告基因实验显示,MNX1-AS1可与miR-218-5p结合导致荧光素酶活性显著降低(P<0.05);RNA pull down实验证实miR-218-5p能特异性结合MNX1-AS1(P<0.05);抑制A549细胞中MNX1-AS1的表达后,miR-218-5p水平上调,细胞的增殖、迁移和侵袭能力均显著降低,凋亡率显著升高;与MNX1-AS1抑制剂组相比,共抑制MNX1-AS1和miR-218-5p的细胞增殖、迁移、侵袭能力升高,凋亡率下降(P<0.05)。结论 MNX1-AS1可以通过靶向下调miR-218-5p的表达影响非小细胞癌的增殖、凋亡、迁移和侵袭。

长链非编码RNA MNX1-AS1在头颈鳞癌中的生物学功能及临床意义

目的:明确长链非编码RNA(long non-coding RNA,lnc RNA)MNX1-AS1表达水平与头颈鳞癌患者临床病理参数的关系,阐明lnc RNA MNX1-AS1在头颈癌细胞中发挥的生物学功能,为头颈鳞癌诊疗及预后评估提供潜在分子标志物。方法:分析TCGA数据库头颈鳞癌转录组数据中lnc RNA MNX1-AS1的表达情况;采用实时荧光定量PCR检测人胚肺二倍体细胞2BS和人类永生化表皮细胞Ha Ca T,头颈鳞癌细胞系FD-LSC-1、CAL-27和Detroit562中lnc RNA MNX1-AS1的表达水平,使用RNAi(RNA interference)技术敲降头颈鳞癌细胞中lnc RNA MNX1-AS1的表达,利用CCK-8、平板克隆、流式细胞术、Transwell迁移和侵袭等实验检测lnc RNA MNX1-AS1被敲降后肿瘤细胞系恶性表型的变化。结果:头颈鳞癌组织中lnc RNA MNX1-AS1表达水平高于正常对照组织(头颈鳞癌组织vs正常对照组织=0.323 vs0.088,P<0.05);其表达水平与头颈鳞癌患者病理学分级呈正相关(P<0.05)。生存分析发现,lnc RNA MNX1-AS1高表达组的患者总生存率显著低于低表达组患者(P<0.05);其中位生存时间分别为42.97个月、61.27个月。临床相关性分析发现,有吸烟史患者组中其表达水平高于无吸烟史患者组(P<0.05);临床中晚期患者组中其表达水平高于早中期患者组(P<0.05)。敲降lnc RNA MNX1-AS1可抑制头颈鳞癌细胞增殖、克隆形成、迁移和侵袭能力(均P<0.05)。结论:Lnc RNA MNX1-AS1高表达与头颈鳞癌恶性进展相关,具有促进头颈鳞癌细胞增殖、迁移、侵袭的重要生物学功能,是头颈鳞癌潜在的重要分子标志物。

LncRNA MNX-AS1在非小细胞肺癌组织中的表达及临床意义

目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)MNX1-AS1在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及其临床意义。方法:收集2015年6月至2017年6月经病理组织学确诊并经手术切除的180例NSCLC患者的原发病灶及癌旁组织,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测MNX1-AS1的表达,分析不同MNX1-AS1表达水平与NSCLC患者临床病理特征的关系,Kaplan-Meier法和Cox回归分析不同MNX1-AS1表达水平的预后情况。结果:NSCLC组织中MNX1-AS1的相对表达量显著高于癌旁组织,差异具有统计学意义(P<0.05)。MNX1-AS1的表达与NSCLC患者的肿瘤分化程度、TNM分期及淋巴结转移显著相关。MNX1-AS1高表达组患者的无进展生存期、总生存期及5年总生存率均低于低表达组(P<0.05)。Cox多因素回归分析显示,MNX1-AS1水平是影响NSCLC患者预后的独立因素。结论:MNX1-AS1在NSCLC组织中高表达并与其病理特征及预后密切相关,可能是一种NSCLC患者早期诊断及预后评估的新的生物学标志物。

红凉伞提取物调控MNX1-AS1对乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨红凉伞提取物对乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响及分子机制。方法:将乳腺癌细胞MDA-MB-453分为对照组、红凉伞提取物低、中、高剂量组、红凉伞提取物+pc DNA3.1组和红凉伞提取物+pc DNA3.1-MNX1-AS1组。四甲基偶氮唑盐比色法检测细胞增殖抑制率;克隆形成实验检测细胞克隆形成能力;流式细胞术检测细胞凋亡;Transwell检测细胞迁移和侵袭;实时荧光定量PCR检测MNX1-AS1表达水平;蛋白质印迹法检测细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂1A (P21)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3 (Caspase-3)、上皮钙黏蛋白(E-cadherin)、基质金属蛋白酶-2 (MMP-2)表达水平。结果:与对照组比较,红凉伞提取物低、中、高剂量组细胞增殖抑制率、凋亡率及P21、Caspase-3、E-cadherin表达水平均升高(P<0.05),细胞克隆形成数、迁移、侵袭细胞数及MNX1-AS1、MMP-2表达水平均降低(P<0.05)。与红凉伞提取物+pc DNA3.1组比较,红凉伞提取物+pc DNA3.1-MNX1-AS1组细胞增殖抑制率、凋亡率及P21、Caspase-3、E-cadherin表达水平均降低(P<0.05),细胞克隆形成数、迁移、侵袭细胞数及MNX1-AS1、MMP-2表达水平均升高(P<0.05)。结论:红凉伞提取物可抑制乳腺癌细胞MDA-MB-453增殖、迁移和侵袭,促进细胞凋亡,其机制可能与MNX1-AS1有关。