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PHI调控Molt-4细胞组蛋白甲基化诱导p15基因去甲基化后再表达 被引量:7
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作者 马旭东 黄轶群 +1 位作者 蒋少红 郑瑞玑 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2010年第3期583-587,共5页
本研究探讨异硫氰酸苯己酯(PHI)对急性T淋巴细胞性白血病Molt-4细胞组蛋白H3K4、H3K9甲基化,及p15基因的去甲基化的调控作用及诱导沉默基因重新表达的机制。用Western blot方法检测PHI作用后Molt-4细胞的组蛋白H3K4、H3K9甲基化状态及P1... 本研究探讨异硫氰酸苯己酯(PHI)对急性T淋巴细胞性白血病Molt-4细胞组蛋白H3K4、H3K9甲基化,及p15基因的去甲基化的调控作用及诱导沉默基因重新表达的机制。用Western blot方法检测PHI作用后Molt-4细胞的组蛋白H3K4、H3K9甲基化状态及P15蛋白的表达的变化;应用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)检测PHI作用前后Molt-4细胞株p15基因甲基化状态的变化;半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测Molt-4细胞经过PHI处理后p15基因的mRNA的表达变化。结果表明,PHI作用于Molt-4细胞可增强组蛋白H3K4甲基化表达,抑制组蛋白H3K9甲基化表达,并呈浓度及时间依赖性;PHI作用于Molt-4细胞5天后,p15基因的甲基化程度减弱,p15基因的异常高甲基化现象被逆转,沉默的p15基因重新表达;p15 mRNA、P15蛋白表达增加,并呈浓度依赖性。结论:PHI可能通过特异性调节组蛋白H3K4、H3K9甲基化水平,引起染色体空间结构发生变化,使p15基因的CPG岛去甲基化,从而诱导p15基因重新表达。 展开更多
关键词 异硫氰酸苯己酯 molt-4细胞 组蛋白去乙酰化酶抑制剂 组蛋白甲基化 p15基因去甲基化
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^(31)P核磁共振观察γ-干扰素对Molt-4细胞作用后含磷代谢物及pH变化 被引量:3
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作者 黄荣清 杜泽涵 +3 位作者 杨志刚 冯锐 李光玉 颜贤忠 《分析测试学报》 CAS CSCD 1998年第2期57-59,共3页
Molt_4细胞的31P核磁共振谱由磷酸单酯、无机磷(Pi)、双磷酸双酯、三磷酸腺苷(ATP)的共振峰组成。用31P核磁共振观察了γ-干扰素对Molt_4细胞作用后含磷化合物的变化。根据Pi的化学位移对Molt_4细... Molt_4细胞的31P核磁共振谱由磷酸单酯、无机磷(Pi)、双磷酸双酯、三磷酸腺苷(ATP)的共振峰组成。用31P核磁共振观察了γ-干扰素对Molt_4细胞作用后含磷化合物的变化。根据Pi的化学位移对Molt_4细胞内pH进行了监测。31P核磁共振能一次同时监测细胞内多种含磷代谢物,是一种无损伤研究细胞代谢的有效方法。 展开更多
关键词 molt-4细胞 Γ-干扰素 干扰素 NMR 含磷代谢物
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VPA和As2O3对Molt-4细胞的协同作用及可能机制 被引量:2
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作者 叶宝国 林福安 +2 位作者 沈建箴 范丽萍 林聪猛 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2008年第6期1288-1292,共5页
本研究探讨丙戊酸钠(sodium valproate,VPA)单药或与亚砷酸(arsenie trioxide,As2O3)联用对人急性T细胞白血病细胞株Molt-4增殖活力的抑制、去甲基化作用及其可能机制。用MTT法检测药物对细胞增殖的抑制作用,利用金氏公式观察两药联用... 本研究探讨丙戊酸钠(sodium valproate,VPA)单药或与亚砷酸(arsenie trioxide,As2O3)联用对人急性T细胞白血病细胞株Molt-4增殖活力的抑制、去甲基化作用及其可能机制。用MTT法检测药物对细胞增殖的抑制作用,利用金氏公式观察两药联用体外抗癌的协同作用。采用半巢式甲基化特异PCR(hnMS-PCR)检测p15INK4B基因甲基化,RT-PCR方法检测p15基因、DNA甲基转移酶DNMT-1、DNMT3A、DNMT3B的表达。结果表明:VPA和As2O3均可明显抑制细胞增殖,二者联用在体外有相加作用(Q值均大于0.85),在5mmol/L VPA与10μmol/L As2O3联用时抑制率达(70.31±2.54)%。Molt-4细胞p15基因因高甲基化而失表达,经VPA和As2O3联合作用后p15基因甲基化程度明显下降,p15基因表达增强,两药联用时DNMT-1、DNMT-3A、DNMT3BmRNA的表达都有下降。结论:VPA可能通过抑制DNA甲基转移酶DNMT-1和(或)DNMT3B使p15INK4B基因去甲基化,使p15基因表达上调,恢复其活性。VPA和As2O3均可明显抑制Mol-4细胞增殖,两药合用有协同相加作用,可减少砷剂的副作用。 展开更多
关键词 丙戊酸钠 AS2O3 molt-4细胞 甲基转移酶 P15基因甲基化
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TSA诱导MOLT-4细胞中p21^(WAF1/Cip-1)表达的功能机制研究 被引量:2
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作者 宋宜 刘梅菊 +8 位作者 赵国伟 钱俊杰 董燕 刘华 孙国敬 梅柱中 刘斌 田宝磊 孙志贤 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2005年第2期174-181,共8页
为了研究去乙酰化酶抑制剂TSA诱导MOLT-4细胞周期阻滞和凋亡反应中p21WAFl/Cip-1的表达及其功能, 以组蛋白去乙酰化酶抑制剂TSA处理急性淋巴细胞白血病细胞系MOLT-4,流式细胞仪和细胞吖啶橙染色、瑞士染 色检测细胞周期和凋亡,Western检... 为了研究去乙酰化酶抑制剂TSA诱导MOLT-4细胞周期阻滞和凋亡反应中p21WAFl/Cip-1的表达及其功能, 以组蛋白去乙酰化酶抑制剂TSA处理急性淋巴细胞白血病细胞系MOLT-4,流式细胞仪和细胞吖啶橙染色、瑞士染 色检测细胞周期和凋亡,Western检测p21p21WAFl/Cip-1的表达。结果表明:组蛋白去乙酰化酶抑制剂TSA可有效的诱导 MOLT-4细胞发生G2/M阻滞和凋亡,并且呈现明显的剂量效应关系和时间效应关系;在此周期阻滞与凋亡反应过 程中,p21WAFl/Cip-1蛋白的表达水平在周期阻滞前快速增高,而在凋亡早期开始下降。p21WAFl/Cip-1分子在细胞中的表 达规律与TSA诱导的细胞G2/M阻滞和凋亡反应间存在明显的剂量效应关系和时间效应关系;蛋白酶体抑制剂 MG-132提升p21WAFl/Cip-1分子在细胞中的表达可以增进细胞的G2/M阻滞反应而延缓凋亡。结论:蛋白酶体途径参 与TSA诱导的MOLT-4细胞周期阻滞向凋亡转换过程中p21WAFl/Cip-1分子的降解调控;p21WAFl/Cip-1在TSA诱导的 MOLT-4细胞G2/M阻滞和凋亡反应中起着重要调节作用。 展开更多
关键词 TSA molt-4细胞 p21^WAF1/Cip-1 G2/M阻滞 MG-132
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RNA干扰下调bcl11b基因表达对Molt-4细胞增殖和凋亡的影响 被引量:2
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作者 黄欣 陈思 +2 位作者 李扬秋 杨力建 陈少华 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期247-250,共4页
目的分析下调bcl11b基因表达对人T淋巴细胞白血病细胞株Molt-4细胞增殖和凋亡的影响。方法通过核转技术将bcl11b-siRNA转染Molt-4细胞;在不同时间点分别采用荧光实时定量PCR观察其对bcl11b基因表达的影响;MTT法观察对Molt-4细胞体外增... 目的分析下调bcl11b基因表达对人T淋巴细胞白血病细胞株Molt-4细胞增殖和凋亡的影响。方法通过核转技术将bcl11b-siRNA转染Molt-4细胞;在不同时间点分别采用荧光实时定量PCR观察其对bcl11b基因表达的影响;MTT法观察对Molt-4细胞体外增殖的抑制作用;流式细胞术及刘氏染色检测siRNA的诱导凋亡作用。结果转染后24小时开始细胞生存率均显著降低(P<0.01),细胞发生凋亡,bcl11b基因表达下调。结论bcl11b-siRNA可抑制Molt-4细胞中bcl11b基因表达,使肿瘤细胞增殖抑制和发生凋亡。 展开更多
关键词 小干扰RNA bcl11b基因 molt-4细胞
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小檗碱通过Notch途径抑制人T淋巴细胞性白血病Molt-4细胞增殖及凋亡的影响 被引量:5
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作者 王冠玲 胡斌飞 《医学研究杂志》 2016年第6期167-171,共5页
目的探讨小檗碱对人T淋巴细胞白血病细胞株Molt-4细胞体外增殖抑制、凋亡诱导及相关机制。方法CCK-8法检测不同浓度的小檗碱对Molt-4细胞的增殖抑制作用;流式细胞术检测细胞凋亡率;RT-PCR检测Molt-4细胞Notch1、Bcl-xl、Deltex1基因表... 目的探讨小檗碱对人T淋巴细胞白血病细胞株Molt-4细胞体外增殖抑制、凋亡诱导及相关机制。方法CCK-8法检测不同浓度的小檗碱对Molt-4细胞的增殖抑制作用;流式细胞术检测细胞凋亡率;RT-PCR检测Molt-4细胞Notch1、Bcl-xl、Deltex1基因表达情况。结果小檗碱诱导Molt-4细胞毒性及凋亡作用,呈剂量依赖性(P<0.05);RT-PCR显示Molt-4细胞株有Notch1 mRNA的表达,且随着小檗碱剂量的增加,Notch1、Bcl-xl、Deltex1 mRNA的表达逐渐下降。结论小檗碱可能通过Notch信号途径抑制Molt-4细胞增殖并诱导凋亡。 展开更多
关键词 小檗碱 molt-4细胞 Notch1信号途径 凋亡
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组蛋白乙酰化/去乙酰化在冬凌草甲素诱导Molt-4细胞凋亡中的作用
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作者 田鹏 刘琦 +3 位作者 李一飞 杨宇 张玉红 吴刚 《激光杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期79-80,共2页
目的:探讨组蛋白乙酰化/去乙酰化在冬凌草甲素(oridonin,Ori)诱导Molt-4细胞凋亡中的作用。方法不同浓度Ori(2.5μmol/L、5μmol/L、10μmol/L、20μmol/L、40μmol/L)作用于Molt-4细胞,MTT法检测细胞增殖;瑞氏染色光镜下观察细胞形态... 目的:探讨组蛋白乙酰化/去乙酰化在冬凌草甲素(oridonin,Ori)诱导Molt-4细胞凋亡中的作用。方法不同浓度Ori(2.5μmol/L、5μmol/L、10μmol/L、20μmol/L、40μmol/L)作用于Molt-4细胞,MTT法检测细胞增殖;瑞氏染色光镜下观察细胞形态学变化;Western blot检测Cas-pase-3、组蛋白去乙酰化酶1(histone deacetylase inhibitor,HDAC1)及组蛋白H3乙酰化水平。结果:Ori抑制Molt-4细胞增殖,诱导细胞凋亡,呈时间-剂量依赖性;光镜下Molt-4细胞染色质固缩,凋亡小体出现。Ori活化Caspase-3,下调HDAC1表达,使组蛋白H3乙酰化水平上调。结论:Ori可能通过提高组蛋白H3乙酰化水平,抑制HDAC1活性诱导Molt-4细胞凋亡。 展开更多
关键词 冬凌草甲素 组蛋白乙酰化 去乙酰化 molt-4细胞 凋亡
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ICAM-1-GFP的构建及其与Molt-4细胞的结合(英文)
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作者 陈卫华 达万明 高春记 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2009年第3期650-655,共6页
本研究构建人细胞间黏附分子1(ICAM-1)全长基因的真核表达载体pEGFP-C1-ICAM-1,转染中国仓鼠卵巢细胞(CHO-K1)细胞株,并检测其在CHO细胞中的表达及与Molt-4细胞的结合。采用RT-PCR法从健康人外周血中分离单个核细胞,钓取ICAM-1全长基因(... 本研究构建人细胞间黏附分子1(ICAM-1)全长基因的真核表达载体pEGFP-C1-ICAM-1,转染中国仓鼠卵巢细胞(CHO-K1)细胞株,并检测其在CHO细胞中的表达及与Molt-4细胞的结合。采用RT-PCR法从健康人外周血中分离单个核细胞,钓取ICAM-1全长基因(1622bp),与pMD18-T载体连接做全自动序列测定。将测序正确的克隆质粒pMD18-T-ICAM-1和表达载体pEGFP-C1分别用HindⅢ和Ⅰ进行双酶切,应用基因重组技术构建ICAM-1全长基因真核表达载体pEGFP-C1-ICAM-1,质粒经HindⅢ和SacII双酶切和PCR电泳鉴定后,采用脂质体转染法转染CHO细胞,并进行G418筛选。用RT-PCR、流式细胞术和荧光显微术检测ICAM-1-GFP的表达及亚细胞的定位,用检测ICAM-1-GFP/CHO细胞与Molt-4细胞的结合能力评价ICAM-1-GFP融合蛋白的功能。结果表明:重组质粒经限制性酶切鉴定得到与ICAM-1全长基因长度一致(1622bp)的酶切产物;测序分析证实,PCR产物与GenBank上登录的ICAM-1基因(NM_000201)序列完全一致,表明成功地完成了ICAM-1的扩增和表达载体的构建;荧光显微镜下可见转染的CHO细胞有绿色荧光蛋白的表达,表达的融合蛋白较均匀地分布于整个细胞;FACS检测ICAM-1-GFP的荧光转染率为(13±5.5)%,表明ICAM-1-GFP基因进入到CHO细胞并获得了有效表达,成功构建了ICAM-1-GFP/CHO细胞,并且ICAM-1-GFP/CHO细胞能够结合PMA处理的Molt-4细胞。结论:成功构建了ICAM-1-GFP真核表达载体,构建的ICAM-1-GFP真核表达载体在CHO细胞内稳定表达,ICAM-1-GFP/CHO细胞能与Molt-4细胞结合,这为进一步研究ICAM-1分子的功能打下基础。 展开更多
关键词 细胞间黏附分子-1 增强型绿色荧光蛋白 molt-4细胞 CHO细胞
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曲古菌素A对Molt-4细胞细胞周期阻滞和凋亡的作用
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作者 易莉莎 周剑锋 《武汉大学学报(医学版)》 CAS 2006年第3期295-298,329,共5页
目的:本研究旨在探讨曲古菌素A(TSA)对Molt-4细胞的诱导细胞周期阻滞及凋亡的作用及TSA高效低毒的抗肿瘤特性。方法:应用细胞培养、PI单标流式细胞术和DNA Ladder等方法初步探讨TSA对Molt-4细胞的诱导细胞周期阻滞及凋亡的作用。结果:... 目的:本研究旨在探讨曲古菌素A(TSA)对Molt-4细胞的诱导细胞周期阻滞及凋亡的作用及TSA高效低毒的抗肿瘤特性。方法:应用细胞培养、PI单标流式细胞术和DNA Ladder等方法初步探讨TSA对Molt-4细胞的诱导细胞周期阻滞及凋亡的作用。结果:在一定浓度范围内,TSA能以浓度依赖性诱导Molt-4细胞S期及G2期阻滞。TSA以浓度依赖性方式诱导Molt-4细胞凋亡,随着TSA的浓度的升高,细胞凋亡率也显著增高。TSA的各实验组的凋亡率和对照组的凋亡率相比均有显著性差异,P<0.01。经200 nmol/L的TSA处理后,Molt-4细胞凋亡率增高,且呈时间依赖性效应关系。TSA在显著诱导Molt-4细胞凋亡的浓度范围内对正常人外周血单个核细胞(NPBMNC)无明显的诱导凋亡作用。结论:TSA有明确的诱导Molt-4细胞周期阻滞和诱导Molt-4细胞凋亡的能力,并且这种作用呈浓度和时间依赖性,这可能是TSA体外抑制白血病细胞系Molt-4生长和发挥抗白血病作用的主要机理之一,与NPBMNC相比较,TSA能够选择性诱导Molt-4细胞凋亡。 展开更多
关键词 曲古菌素A 组蛋白乙酰化 细胞凋亡 molt-4细胞
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曲古抑菌素A诱导MOLT-4细胞凋亡的机制 被引量:1
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作者 苗新宇 洪振亚 +1 位作者 易莉莎 周剑峰 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期344-347,共4页
目的通过研究曲古抑菌素A(trichostatin A,TSA)作用前后MOLT-4细胞基因表达谱的差异,初步探讨TSA诱导细胞周期阻滞和凋亡的机制。方法TSA以不同浓度和不同作用时间作用MOLT-4细胞,通过流式细胞仪检测其凋亡率的变化。提取细胞RNA,应用... 目的通过研究曲古抑菌素A(trichostatin A,TSA)作用前后MOLT-4细胞基因表达谱的差异,初步探讨TSA诱导细胞周期阻滞和凋亡的机制。方法TSA以不同浓度和不同作用时间作用MOLT-4细胞,通过流式细胞仪检测其凋亡率的变化。提取细胞RNA,应用基因芯片方法分析TSA作用前后的基因表达变化,RT-PCR验证芯片结果的可靠性。结果MOLT-4细胞对TSA非常敏感,纳摩尔级水平即可诱导显著的细胞凋亡,而且这种凋亡与TSA作用浓度及时间呈现明显的线性关系。基因芯片结果显示,200nmol/LTSA作用MOLT-424h后共有952个基因发生不同程度的变化,其中上调的有477种,下调的有475种,部分结果经RT-PCR证实。结论TSA诱导肿瘤细胞周期阻滞和凋亡是一个多基因参与的复杂过程。 展开更多
关键词 曲古抑菌素A molt-4细胞 周期阻滞 细胞凋亡 基因芯片
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β-arrestin1过表达抑制Molt-4细胞异种移植小鼠急性T淋巴细胞白血病进展 被引量:1
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作者 张佳 舒逸 +5 位作者 张虹洋 蒋婷婷 宫茂源 朱丹 王皓飚 邹琳 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期654-660,共7页
目的探讨β-arrestin1对Molt-4细胞异种移植急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)NCG小鼠模型疾病进展的影响。方法建立稳定表达荧光素酶的人Molt-4细胞系,酶标仪检测其荧光素酶强度;构建稳定过表达或敲低β-arrestin1和空载体的Molt-4细胞系,设... 目的探讨β-arrestin1对Molt-4细胞异种移植急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)NCG小鼠模型疾病进展的影响。方法建立稳定表达荧光素酶的人Molt-4细胞系,酶标仪检测其荧光素酶强度;构建稳定过表达或敲低β-arrestin1和空载体的Molt-4细胞系,设为β1组、Siβ1组和Scram组并分别接种于亚致死计量辐射后NCG小鼠体内;记录小鼠移植后体质量及生存时间;利用活体荧光成像系统检测移植小鼠模型体内肿瘤进展;移植后16 d处死小鼠,取肝和脾做切片染色,检测肿瘤细胞浸润。结果成功构建稳定表达荧光素酶Molt-4细胞系(Molt4-Fluc)。在Molt4-Fluc基础上成功构建过表达β-arrestin1(β1)、敲低β-arrestin1(Siβ1)或空载体(Scram)的Molt-4细胞系。NCG小鼠T-ALL异种移植模型显示,β1组、Siβ1组及Scram组Molt4-Fluc细胞在受体NCG小鼠中进展,导致NCG小鼠在移植后体质量降低。小鼠生存时间显示,β1组细胞受体小鼠生存时间(43 d)显著长于Scram组细胞受体小鼠(33 d),P<0.001;Siβ1组细胞受体小鼠生存时间(20 d)显著短于Scram组细胞受体小鼠(33 d),P<0.001;活体荧光成像结果显示,β1组细胞受体小鼠体内T-ALL细胞荧光强度显著弱于Scram组细胞受体小鼠,Siβ1组细胞受体小鼠体内T-ALL细胞荧光强度强于Scram组细胞受体小鼠;处死移植后16 d小鼠,组织染色结果显示,β1组细胞受体小鼠肝、脾内肿瘤细胞浸润较Scram组细胞受体小鼠少。结论β-arrestin1过表达可抑制Molt-4细胞异种移植后小鼠T-ALL进展。 展开更多
关键词 T-ALL β-arrestin1 小鼠异种移植模型 活体荧光成像 molt-4细胞
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携带CUEDC1基因的慢病毒载体的构建及其对MOLT-4细胞株增殖和集落形成能力的影响 被引量:4
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作者 庄万传 吴庆运 +1 位作者 孟凡静 徐开林 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期1257-1262,共6页
目的:构建过表达人CUEDC1的慢病毒载体pCDH-CUEDC1,利用慢病毒介导的感染获得稳定表达重组质粒的MOLT-4细胞,分析过表达CUEDC1对MOLT-4细胞增殖和集落形成能力的影响。方法:利用RT-PCR的方法获得CUEDC1全长片段,将CUEDC1 DNA片段酶切回... 目的:构建过表达人CUEDC1的慢病毒载体pCDH-CUEDC1,利用慢病毒介导的感染获得稳定表达重组质粒的MOLT-4细胞,分析过表达CUEDC1对MOLT-4细胞增殖和集落形成能力的影响。方法:利用RT-PCR的方法获得CUEDC1全长片段,将CUEDC1 DNA片段酶切回收后克隆至慢病毒转移质粒pCDH-CMV-MCS-EF1-copGFPT2A-Puro(以下简称pCDH),获得pCDH-CUEDC1慢病毒重组质粒。经三质粒包装系统包装后获得高滴度慢病毒颗粒并感染人白血病细胞系MOLT-4,通过流式细胞仪分选获得稳定表达的白血病细胞系,应用real-time PCR和Western blot方法分别检测稳定转染细胞系的CUEDC1 mRNA和CUEDC1的表达。应用CCK-8法和集落形成试验测定CUEDC1对MOLT-4细胞增殖和集落形成能力的影响。结果:经限制性内切酶检测及基因测序证实成功构建了携带CUEDC1的重组慢病毒载体;病毒感染MOLT-4细胞后经流式细胞仪分选获得GFP阳性细胞。实时定量PCR及Western blot证实,病毒感染后CUEDC1的mRNA和蛋白表达上调;CCK-8法及集落形成试验显示,过表达CUEDC1促进MOLT-4细胞的增殖和集落形成能力,与对照组相比,均有统计学差异(P<0.05)。结论:成功构建了表达CUEDC1的慢病毒载体,CUEDC1可以促进MOLT-4细胞的增殖和集落形成能力。 展开更多
关键词 CUEDC1 慢病毒载体 白血病 载体构建 molt-4细胞
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长春花碱诱导MOLT-4细胞产生M期细胞阻滞的初步研究 被引量:3
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作者 钟以胜 潘长穿 +4 位作者 金昌男 林建军 熊共鹏 张建溪 龚建平 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2009年第2期358-362,共5页
本研究探讨化疗药物M期阻滞剂长春花碱(vinblastine,VLS)对MOLT-4急性淋巴细胞白血病细胞株产生的生物学影响并分析其意义。0.05μg/ml的VLS诱导MOLT-4细胞0-12小时产生M期细胞阻滞和/或细胞凋亡,流式细胞术检测DNA直方图和共聚焦显微... 本研究探讨化疗药物M期阻滞剂长春花碱(vinblastine,VLS)对MOLT-4急性淋巴细胞白血病细胞株产生的生物学影响并分析其意义。0.05μg/ml的VLS诱导MOLT-4细胞0-12小时产生M期细胞阻滞和/或细胞凋亡,流式细胞术检测DNA直方图和共聚焦显微镜观测细胞形态,采用阻滞增长率、阻滞效率、凋亡率及形态学指标分析阻滞前后的细胞周期分布、凋亡和细胞形态变化。结果表明,细胞阻滞可不伴随有凋亡率的显著增加;细胞阻滞的流式DNA直方图呈时间依赖的细胞周期分布动态改变,阻滞程度可量化;M期阻滞伴随有S期细胞堆栈;阻滞后细胞增殖率减低;M期阻滞细胞具有特征性细胞分裂的形态学特征。结论:长春花碱能单独诱导MOLT-4细胞M期阻滞,M期细胞阻滞的流式细胞检测和形态学特征的研究有助于进一步研究细胞阻滞与凋亡、检测点机制和抗癌新药开发提供参考。 展开更多
关键词 细胞阻滞 细胞周期 细胞凋亡 长春花碱 molt-4细胞
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咖啡因对喜树碱诱导Molt-4细胞凋亡的影响
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作者 谭惠玲 冯永东 +4 位作者 陶德定 肖徽 谢大兴 余从年 龚建平 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第12期1479-1483,共5页
背景与目的:有报道认为咖啡因(caffeine)可以作用于细胞周期检测点,从而影响细胞周期的进程,而这种效应对于肿瘤细胞凋亡的影响尚存在争议。本研究探讨咖啡因对喜树碱诱导Molt-4细胞凋亡的作用及其对细胞周期检测点的效应。方法:用喜树... 背景与目的:有报道认为咖啡因(caffeine)可以作用于细胞周期检测点,从而影响细胞周期的进程,而这种效应对于肿瘤细胞凋亡的影响尚存在争议。本研究探讨咖啡因对喜树碱诱导Molt-4细胞凋亡的作用及其对细胞周期检测点的效应。方法:用喜树碱诱导细胞凋亡,以咖啡因作为干扰细胞周期检测点的因素。用API法(AnnexinⅤ-propidiumiodide,AnnexinⅤ/PI)及亚G1峰法对细胞凋亡率以及凋亡发生的周期特异性进行检测分析。结果:2.0~20.0mmol/L的咖啡因对处于对数生长期Molt-4细胞增殖没有影响。喜树碱能诱导Molt-4细胞产生以S期细胞为主的细胞周期特异性凋亡,0.15μmol/L喜树碱作用4、6h,细胞凋亡率分别为(23.69±2.26)%、(36.99±1.42)%;10.0mmol/L咖啡因能显著抑制这种细胞凋亡,与0.15μmol/L喜树碱联合作用4、6h后,细胞凋亡率分别下降至(4.79±0.64)%和(2.69±0.56)%。去除咖啡因后,凋亡细胞明显增多,去除4、6h后细胞凋亡率升至(46.23±0.21)%和(55.81±0.41)%,且仍以S期细胞为主。结论:咖啡因可以抑制喜树碱诱导细胞凋亡。作为影响细胞周期检测点的药物,咖啡因可以明显屏蔽检测点对损伤细胞的监督,抑制细胞凋亡,但其作用是一过性的、可以逆转的。 展开更多
关键词 咖啡因 喜树碱 molt-4细胞 细胞周期检测点 细胞凋亡
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超抗原SEA对Molt-4细胞线粒体膜电位的影响
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作者 秦雅楠 田红霞 +3 位作者 王冠明 张鹏 林晨 李扬秋 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期127-129,共3页
目的:超抗原葡萄球菌肠毒素A(SEA)诱导Molt-4细胞活化与线粒体膜电位变化的关系。方法:应用CCK-8法体外检测不同浓度和时间SEA刺激传代T细胞株Molt-4细胞增殖活性,应用JC-1标记细胞线粒体,利用流式细胞术测定比较不同时间点SEA刺激对Mol... 目的:超抗原葡萄球菌肠毒素A(SEA)诱导Molt-4细胞活化与线粒体膜电位变化的关系。方法:应用CCK-8法体外检测不同浓度和时间SEA刺激传代T细胞株Molt-4细胞增殖活性,应用JC-1标记细胞线粒体,利用流式细胞术测定比较不同时间点SEA刺激对Molt-4细胞线粒体膜电位的影响。结果:经CCK-8检测,SEA的浓度在1 mg/L时Molt-4细胞的增殖最显著,以该浓度的SEA作用于Molt-4细胞180、60、30、10 min,10 min时间点膜电位升高明显高于其他时间点。SEA刺激10、30 min后线粒体膜电位升高低于有丝分裂原PHA刺激的结果。结论:SEA可诱导Molt-4细胞线粒体膜电位升高,且升高作用主要发生在细胞增殖的早期阶段。其升高作用略低于有丝分裂原PHA。 展开更多
关键词 molt-4细胞 超抗原 JC-1 线粒体膜电位
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白藜芦醇抑制白血病Molt-4细胞增殖的初步研究
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作者 姚君霞 李永军 《现代检验医学杂志》 CAS 2011年第5期94-96,99,共4页
目的 观察白藜芦醇对人急性淋巴细胞白血病Molt-4细胞的生长抑制及凋亡诱导作用.方法 白藜芦醇处理体外培养的Molt-4细胞后,噻唑蓝(MTT)比色法测定细胞生长抑制率,Wrigh-Gimesa染色、透射电镜观察细胞的形态变化,流式细胞术检测细胞... 目的 观察白藜芦醇对人急性淋巴细胞白血病Molt-4细胞的生长抑制及凋亡诱导作用.方法 白藜芦醇处理体外培养的Molt-4细胞后,噻唑蓝(MTT)比色法测定细胞生长抑制率,Wrigh-Gimesa染色、透射电镜观察细胞的形态变化,流式细胞术检测细胞的凋亡率及周期分布.结果 MTT结果显示,200 μmol/L的白藜芦醇作用于Molt-4细胞72 h后,细胞的生长抑制率达到74.98%,并呈时间、剂量依赖性;Wrigh-Gimesa染色和透射电镜结果显示:与对照组比较,经白藜芦醇处理后Molt-4细胞出现体积缩小,染色质浓缩边集化等典型的凋亡细胞形态学改变;流式细胞术检测结果显示100 μmol/L白藜芦醇作用于Molt-4细胞48 h后78.8%的细胞被阻滞于S期.结论 白藜芦醇能明显抑制Molt-4细胞增殖,引起细胞周期的S期阻滞,并进一步诱导其凋亡. 展开更多
关键词 白藜芦醇 molt-4细胞 增殖 凋亡
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长春新碱诱导白血病MOLT-4细胞凋亡及其机制研究 被引量:2
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作者 董如男 《西南国防医药》 CAS 2016年第3期278-281,共4页
目的观察长春新碱(VCR)对人急性淋巴细胞性白血病MOLT-4细胞促凋亡作用,并探讨其作用机制。方法分别用0、0.01、0.02、0.04、0.08μmol/L长春新碱处理MOLT-4细胞,然后用CCK-8法检测细胞活性,用Hochest33258对细胞核进行染色,用Rhodamine... 目的观察长春新碱(VCR)对人急性淋巴细胞性白血病MOLT-4细胞促凋亡作用,并探讨其作用机制。方法分别用0、0.01、0.02、0.04、0.08μmol/L长春新碱处理MOLT-4细胞,然后用CCK-8法检测细胞活性,用Hochest33258对细胞核进行染色,用Rhodamine123对细胞进行染色,检测线粒体膜电位情况。用caspase 8、9、3抑制剂预处理MOLT-4细胞,检测caspase8、9、3对细胞活性的影响。结果长春新碱对细胞活性具有抑制作用,且呈明确的剂量-效应关系;细胞核染结果显示,长春新碱可以促进细胞凋亡,剂量越大,凋亡现像越明显;同时,长春新碱可以引起细胞线粒体膜电位下降,并发现caspase 9和3参与了细胞凋亡过程。结论长春新碱可以促进MOLT-4细胞凋亡,作用机制可能是线粒体膜电位下降,进而诱导caspase 9和3活化而促发细胞的凋亡。 展开更多
关键词 长春新碱 凋亡 急性淋巴细胞性白血病 molt-4细胞
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31P-NMR研究白血病细胞系Molt-4细胞内pH
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作者 黄荣清 骆传环 《分析试验室》 CAS CSCD 北大核心 2003年第z1期61-63,共3页
用31P-NMR建立了无损伤性测定人淋巴瘤白血病细胞系Molt-4细胞胞内pH的方法.Molt-4细胞的31P核磁共振谱由无机磷(Pi)、ATP等的共振峰组成.通过测定Molt-4细胞内Pi化学位移进而能间接确定细胞内的pH,细胞内无机磷(Pi)的化学位移对pH非常... 用31P-NMR建立了无损伤性测定人淋巴瘤白血病细胞系Molt-4细胞胞内pH的方法.Molt-4细胞的31P核磁共振谱由无机磷(Pi)、ATP等的共振峰组成.通过测定Molt-4细胞内Pi化学位移进而能间接确定细胞内的pH,细胞内无机磷(Pi)的化学位移对pH非常敏感,随pH变化而变化.Molt-4细胞内Pi峰的化学位移为5.65±0.08(n=3),计算得到细胞内pH值为6.68±0.05.31P核磁共振能在测定细胞胞内pH的同时,观测到细胞内多种含磷小分子代谢物,是一种无损伤研究细胞内pH及代谢的有效方法. 展开更多
关键词 31P核磁共振 molt-4细胞 PH
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紫外线诱导的Molt-4细胞旁观者效应研究(英文)
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作者 Dan Huang Tian Xiao Xiangshang Xu Deding Tao Junbo Hu Jianping Gong 《The Chinese-German Journal of Clinical Oncology》 CAS 2008年第4期227-229,共3页
Objective: To find out whether ultraviolet ray, a kind of non-ionic ray, could cause the bystander effect, the UV exposed MOLT-4 cells had been investigated. Methods: Two experiment groups were carried out, in which c... Objective: To find out whether ultraviolet ray, a kind of non-ionic ray, could cause the bystander effect, the UV exposed MOLT-4 cells had been investigated. Methods: Two experiment groups were carried out, in which cells were culture and treated at two concentrations: 2 x 105/mL and 5 x 105/mL. All other treatments were the same. Part of the cells was labeled with DID and exposed to UV ray for 40 s as effect cells; other cells was untreated as bystander cells. Then, the cells were co-cultured and harvested at 4 h interval over a period of 24 h. Annexin V-FITC/PI assay was used to evaluate the bystander effect in bystander cells co-cultured with effected cells. Laser confocal microscope method was used to observe the morphologic changes of the bystander cells. Results: The percentage of cells undergoing apoptosis in the bystander cells was increased over time compared with the control group. They were 6.84%, 8.09%, 9.88%, 17.64%, 17.43%, 30.99% and 37.93% respectively in 0 h, 4 h, 8 h, 12 h, 16 h, 20 h and 24 h. When observed by laser scanning confocal microscope, the bystander cells show some classic character of apoptosis such as chromosome condense, phosphatidylserine transfer and formation of apoptotic bodies. Conclusion: Bystander effect is significant in un-irradiated bystander MOLT-4 cells when co-cultured with UV exposed cells. 展开更多
关键词 紫外线 诱导作用 molt-4细胞 旁观者效应
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SDF—1a/54/KDEL基因电穿孔Molt-4细胞株的转染条件优化
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《国际医药卫生导报》 2009年第7期7-10,共4页
目的探索以绿色荧光蛋白(GFP)为报告基因的重组质粒pEGFP/SDF-1a/54/KDEL电穿孔悬浮培养的Molt-4细胞的高效转染条件。方法通过控制脉冲幅度、脉冲电压、细胞生长状态等三个主要条件,采用不同条件组合后用电穿孔法将转入悬浮培养... 目的探索以绿色荧光蛋白(GFP)为报告基因的重组质粒pEGFP/SDF-1a/54/KDEL电穿孔悬浮培养的Molt-4细胞的高效转染条件。方法通过控制脉冲幅度、脉冲电压、细胞生长状态等三个主要条件,采用不同条件组合后用电穿孔法将转入悬浮培养的Molt-4,用荧光显微镜和流式细胞仪观察转染率。结果传代后第二天的Molt-4细胞在260V、950μF得到最大转染率51.2%。荧光显微镜下可观察到被转染目的基因的细胞发出绿色荧光。结论优选260V、950μF和良好的细胞生长状态等条件下的Molt-4,可获得目的基因SDF—1a/54/KDEL的最高转染效率。 展开更多
关键词 电穿孔 SDF-1a/54/KDEL molt-4细胞 基因转染
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