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LAMP实时浊度法快速检测转基因玉米MON810 被引量:6
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作者 王小玉 邝筱珊 +5 位作者 胡松楠 余以刚 成晓维 冯家望 张璜 肖性龙 《现代食品科技》 EI CAS 北大核心 2013年第12期3002-3005,3069,共5页
LAMP实时浊度法是采用环介导等温扩增(Loop Mediated Isothermal Amplification,LAMP)技术通过实时浊度仪实时检测反应过程中所产生的白色沉淀,从而实现对扩增全过程的监控,弥补了显色法只能观看反应终点的缺陷,使引物筛选和反应体系的... LAMP实时浊度法是采用环介导等温扩增(Loop Mediated Isothermal Amplification,LAMP)技术通过实时浊度仪实时检测反应过程中所产生的白色沉淀,从而实现对扩增全过程的监控,弥补了显色法只能观看反应终点的缺陷,使引物筛选和反应体系的优化有数据可依。本研究以转基因玉米MON810为研究对象,针对外源基因苏云金芽孢杆菌杀虫毒蛋白CryIA(b)与内源基因边界序列设计6条特异性引物,通过实时浊度法在63℃的恒温条件下完成检测,对检测的灵敏度、特异性、稳定性进行了评价。建立了转基因玉米MON810的LAMP实时浊度检测方法,该方法最低检出限为0.5%,与LAMP显色法和实时荧光PCR法进行结果比对,符合率为100%,经评价具有特异性高、稳定性强、准确简便等优点,非常适合转基因玉米MON810的快速检测,有较好的应用价值。 展开更多
关键词 环介导等温扩增技术 实时浊度仪 转基因玉米 mon810 检测
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实时荧光PCR定量检测加工产品中转基因玉米Mon810成分 被引量:9
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作者 覃文 曹际娟 朱水芳 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2003年第8期132-134,共3页
采用实时荧光PCR技术,建立了定量(性)鉴定检测加工产品中转基因玉米Mon810成分的方法。实验设计的可以扩增玉米自身基因和外源基因边界序列的引物和探针具有品种和品系特异性,特异性地检测出食品、饲料等加工产品中转基因玉米Mon810成... 采用实时荧光PCR技术,建立了定量(性)鉴定检测加工产品中转基因玉米Mon810成分的方法。实验设计的可以扩增玉米自身基因和外源基因边界序列的引物和探针具有品种和品系特异性,特异性地检测出食品、饲料等加工产品中转基因玉米Mon810成分。某些检测样品不仅检出转基因玉米Mon810成分,还同时检出其它转基因玉米品系或其它转基因品种。本研究实验建立的转基因玉米Mon810品系鉴定检测方法,即可以用于加工产品中转基因成分的定量检测(检测低限为0.1%),也可以用于定性检测,或作为常规PCR定性检测后的确证实验方法。 展开更多
关键词 转基因玉米 实时荧光PCR技术 定量检测 食品 饲料 mon810成分
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定性PCR方法检测转基因玉米MON810转化事件的研究 被引量:5
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作者 易小平 贺萍萍 +5 位作者 夏启玉 肖苏生 谢翔 杨小亮 李美英 郭安平 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2014年第12期2384-2390,共7页
转基因玉米MON810(Yield Gard R)是孟山都公司通过DNA重组技术和微注射轰击研发的一种具有对欧洲玉米螟(ECB;Ostrinia nublialis)有特殊抗性的转基因玉米品系,目前在世界各地已经得到广泛种植,为加强对该品系玉米的安全管理,本研究旨在... 转基因玉米MON810(Yield Gard R)是孟山都公司通过DNA重组技术和微注射轰击研发的一种具有对欧洲玉米螟(ECB;Ostrinia nublialis)有特殊抗性的转基因玉米品系,目前在世界各地已经得到广泛种植,为加强对该品系玉米的安全管理,本研究旨在建立MON810品系玉米的转化事件特异性定性PCR检测方法。根据MON810的插入序列信息,在3′端的侧翼序列处设计定性PCR检测的引物,检测MON810在其他几种常见转基因作物混合样品的特异性。结果表明,该方法具有很好的特异性。同时检测该引物系统的扩增灵敏度,结果表明,检测引物的灵敏度可达0.1%。建立的MON810特异定性PCR检测方法经全国7家实验室的验证,进一步证实该方法能够特异地检测出样品中的MON810转化事件,检测方法的灵敏度可达0.1%,且检测结果具有良好的可重复性和可重现性。MON810转化事件定性PCR检测方法的建立可满足于抗虫转基因玉米MON810及其衍生品种生物安全管理的需要。 展开更多
关键词 转基因玉米mon810 定性PCR 灵敏度 特异性
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PCR对转基因玉米MON810的鉴定检测 被引量:11
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作者 曹际娟 曹远银 《玉米科学》 CAS CSCD 2003年第1期19-21,共3页
本研究成功建立了商业化种植的转基因玉米MON810的筛选检测和品种鉴定的PCR方法。该方法根据玉米自身IVR基因作为内源特异参照基因扩增226bp片段,检查模板DNA提取的质量,避免了假阴性结果;同时扩增CaMV35S启动子基因195bp片段,可以对MON... 本研究成功建立了商业化种植的转基因玉米MON810的筛选检测和品种鉴定的PCR方法。该方法根据玉米自身IVR基因作为内源特异参照基因扩增226bp片段,检查模板DNA提取的质量,避免了假阴性结果;同时扩增CaMV35S启动子基因195bp片段,可以对MON810转基因玉米进行筛选检测;此外,根据MON810品种设计的特异性鉴定检测引物,可扩增Maizegenome/CaMV35S基因170bp片段和HSP/CryIA(b)基因194bp片段,具有很强的品种特异性,达到了对MON810转基因玉米的品种鉴定目的。PCR反应循环参数是94℃2min;94℃40sec,55℃60sec,72℃60sec,35次循环;之后72℃延伸5min。 展开更多
关键词 PCR 转基因玉米 mon810 鉴定检测 筛选检测 品种鉴定
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转基因玉米MON810基体标准物质Q—PCR量值协同实验研究 被引量:1
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作者 傅博强 臧超 +7 位作者 宋贵文 孟亚男 王晶 董莲华 余笑波 李亮 隋志伟 杨立桃 《计量学报》 CSCD 北大核心 2011年第B12期114-118,共5页
针对3种不同转基因含量水平的转基因玉米MON810基体标准物质,组织7家实验室对其量值采用实时荧光定量PCR(Q-PCR)方法进行了协同实验研究,并对Q-PCR得到的参考值进行了不确定度分析。经过加权平均,转基因玉米MONS10A、B、C3个水平... 针对3种不同转基因含量水平的转基因玉米MON810基体标准物质,组织7家实验室对其量值采用实时荧光定量PCR(Q-PCR)方法进行了协同实验研究,并对Q-PCR得到的参考值进行了不确定度分析。经过加权平均,转基因玉米MONS10A、B、C3个水平的基体标准物质转基因含量的Q—PCR方法参考值分别为0.51%±0.10%、1.1%±0.2%、4.7%±0.7%(k=2)。 展开更多
关键词 计量学 转基因玉米 mon810 基体标准物质 实时荧光定量PCR 协同实验
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转基因抗虫玉米MON810转化事件的研究及应用 被引量:2
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作者 杨双 《中国种业》 2018年第6期12-14,共3页
目前全球被批准商业化的玉米转化事件达148个,转基因抗虫玉米中MON810转化事件的商业化程度最高,全球有26个国家和地区批准其用于种植或饲料食品加工。我国从2002年开始允许进口MON810品系转基因玉米用于饲料食品的加工原料。鉴于MON81... 目前全球被批准商业化的玉米转化事件达148个,转基因抗虫玉米中MON810转化事件的商业化程度最高,全球有26个国家和地区批准其用于种植或饲料食品加工。我国从2002年开始允许进口MON810品系转基因玉米用于饲料食品的加工原料。鉴于MON810在中国的专利将在2020年过期,为了进一步应用该转化事件,本文综述了有关MON810转化事件的分子生物学特征、检测方法、杀虫效果、安全评价、国内外应用现状,供相关从业者参考。 展开更多
关键词 抗虫玉米 转化事件 mon810
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Feeding Study with Bt Corn (MON810: Ajeeb YG) on Rats: Biochemical Analysis and Liver Histopathology 被引量:1
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作者 Eman Mohamed Abdo Omar Mohamed Barbary Omayma El-Sayed Shaltout 《Food and Nutrition Sciences》 2014年第2期185-195,共11页
Bt corn “MON810: Ajeeb YG” produces delta endotoxins in the whole plant due to the genetic modification process. The chemical analysis of this variety showed significant differences from its conventional counterpart... Bt corn “MON810: Ajeeb YG” produces delta endotoxins in the whole plant due to the genetic modification process. The chemical analysis of this variety showed significant differences from its conventional counterpart “Ajeeb”. Further, feeding studies on rats were designed to complete assessing the safety of “MON810: Ajeeb YG”. Three groups of rats (6 males and 6 females’ rats/group) were fed on control diet, non-Bt corn and Bt corn for 1.5 months and 3 months. After 1.5 months, 3 males and 3 females from each group were sacrificed, and after another 1.5 months, 3 males and 3 females from each group and their offspring were sacrificed. Histopathological examination, blood haematology and serum biochemical analysis were determined. Results indicated significant differences among the tested parameters in the three groups especially Bt group. Severe changes in the liver of Bt group after 3 months were observed. 展开更多
关键词 mon810: Ajeeb YG FEEDING Study BLOOD BIOCHEMICAL Analysis HAEMATOLOGY HISTOPATHOLOGY
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多重DPO-PCR检测转基因玉米MON810和MIR604体系建立
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作者 周陆宁 张锐 +1 位作者 麦晨 魏霜 《现代农业科技》 2018年第17期1-2,共2页
针对转基因玉米MON810和MIR604品系插入位点序列,分别设计品系特异性DPO引物,建立转基因玉米MON810和MIR604品系检测的多重DPO-PCR方法。结果表明,设计的DPO引物特异性强,灵敏度达0.5 ng/μL,并且对退火温度不敏感。该检测方法特异性强... 针对转基因玉米MON810和MIR604品系插入位点序列,分别设计品系特异性DPO引物,建立转基因玉米MON810和MIR604品系检测的多重DPO-PCR方法。结果表明,设计的DPO引物特异性强,灵敏度达0.5 ng/μL,并且对退火温度不敏感。该检测方法特异性强、灵敏度高,适合于对转基因玉米MON810和MIR604品系进行快速检测。 展开更多
关键词 转基因玉米 mon810 MIR604 多重DPO-PCR
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PCR法检测食品和动物饲料中的转基因成分 被引量:9
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作者 周建嫦 杨明杰 +2 位作者 杨杏芬 黄俊明 凌文华 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期732-735,共4页
目的初步调查广州市场上含大豆及玉米原料的食品和饲料中转基因成分的存在情况。方法通过PCR检测camv35S启动子和nos终止子,筛选食品中是否含转基因成分,并进一步通过PCR检测RoundUpReadyTMSoybean(RRS)、Bt176Maximaizer和Mon810YieldG... 目的初步调查广州市场上含大豆及玉米原料的食品和饲料中转基因成分的存在情况。方法通过PCR检测camv35S启动子和nos终止子,筛选食品中是否含转基因成分,并进一步通过PCR检测RoundUpReadyTMSoybean(RRS)、Bt176Maximaizer和Mon810YieldGard的特异DNA片段,判断是否含这三种成分。结果从22份市售食品和3份动物饲料,检测出1份玉米汤和2份鲜黄豆样品、1份薯条、及1份大鼠和1份豚鼠饲料中含转基因成分;其中的阳性鲜黄豆和饲料样品含有RRS,而阳性玉米汤和饲料样品中未检测到Bt176Maximaizer和Mon810YieldGard。结论部分未标识市售食品和动物饲料中含转基因成分。 展开更多
关键词 camv 35S启动子 nos终止子 ROUNDUP Ready^TM SOYBEAN Bt176 Maximaizer mon810 YieldGard
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转基因玉米质粒分子国家标准样品的构建 被引量:2
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作者 郑秋月 曹际娟 +1 位作者 徐君怡 赵昕 《标准科学》 2012年第12期48-51,共4页
本文研制转基因玉米常见的4个品系:BT11、MON810、NK603和T25质粒分子国家标准样品。研究重点包括目标序列和内标准基因序列的选择和扩增、标准样品定值和分析等。均匀性和稳定性结果表明,所研制的转基因玉米4个品系标准样品均匀稳定。... 本文研制转基因玉米常见的4个品系:BT11、MON810、NK603和T25质粒分子国家标准样品。研究重点包括目标序列和内标准基因序列的选择和扩增、标准样品定值和分析等。均匀性和稳定性结果表明,所研制的转基因玉米4个品系标准样品均匀稳定。采用PicoGreen DNA分子荧光定量方法定值标准样品。多家单位合作定值,确定标准样品的标准值及其不确定度。所研制的转基因玉米质粒分子标准样品获得了国家标准样品证书,适用于转基因产品的定量和定性测定。 展开更多
关键词 转基因玉米BT11品系 转基因玉米mon810品系 转基因玉米NK603品系 转基因玉米T25品系 质粒分子国家标准样品
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Quantification of CrylAb Toxin in Bt Maize for Ostrinia nubilalis (Lep.: Crambidae) Bioassay
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作者 J. Stara V. Falta T. Erban F. Kocourek 《Journal of Agricultural Science and Technology(B)》 2011年第5期685-691,共7页
Two variants of diet composition were prepared to evaluate the susceptibility of ECBs to CrylAb toxin as follows: 1) 38-0600 Stonefly Heliothis Diet mixed with purified CrylAb protein and 2) 38-0600 Stonefly Heliot... Two variants of diet composition were prepared to evaluate the susceptibility of ECBs to CrylAb toxin as follows: 1) 38-0600 Stonefly Heliothis Diet mixed with purified CrylAb protein and 2) 38-0600 Stonefly Heliothis Diet mixed with lyophylized leaves of Bt maize MON 810-YieldGard. A method of sample preparation and extraction of Bt toxin for reproducible ELISA quantification were optimized. The qualitative DAS-ELISA kit from Agdia was optimized for use in quantitative analysis of Cry lAb toxin. The mortality of ECB larvae from the laboratory strain on the diet with CrylAb toxin did not differ significantly from the mortality on the diet with Bt maize leaves with the same rate of Cry lAb toxin. Similarly, the mortality of the ECB larvae from the field population on the diet with Bt maize leaves did not differ significantly from the mortality of ECB larvae from the laboratory strain on the same type of diet. Therefore, the incorporation of Bt maize leaves into the diet did not influence the efficacy of CrylAb toxin against ECBs. Using this method, a susceptibility of one field population of ECBs from the Czech Republic to CrylAb toxin was determined (LC50 of 2.16 μg of Cry 1Ab g^-1 of diet). 展开更多
关键词 Bacillus thuringiensis Bt toxin Cry 1Ab European corn borer MON 810 susceptibility transgenic maize
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山西市场动物饲料中转基因成分的检测(英文) 被引量:2
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作者 袁建琴 常泓 +3 位作者 赵江河 唐中伟 史宗勇 王俊东 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期1576-1589,共14页
为了评估转基因玉米和大豆在山西动物饲料市场的占有率和标识情况,采用改良十六烷基三甲基溴化铵法(Hexadecyltrimethy ammonium bromide,CTAB)提取山西市场抽取的30份鸡和猪饲料,通过定性PCR打包筛查,对检测阳性结果打包饲料拆包并检测... 为了评估转基因玉米和大豆在山西动物饲料市场的占有率和标识情况,采用改良十六烷基三甲基溴化铵法(Hexadecyltrimethy ammonium bromide,CTAB)提取山西市场抽取的30份鸡和猪饲料,通过定性PCR打包筛查,对检测阳性结果打包饲料拆包并检测CaMV35S启动子、NOS终止子、玉米内标zSSIIb、大豆内标Lectin和Cry IA(b)基因。同时检测玉米和大豆转化体事件MON810和GTS40-3-2。结果表明,83.3%的饲料含有转基因成分。所抽取的玉米、大豆、猪饲料和鸡饲料转基因成分阳性率分别为6.67%、100%、93.3%和73.3%。实时荧光定量PCR检测结果与定性PCR一致。结果提示,鸡和猪饲料中转基因成分在山西市场的占有率较高。 展开更多
关键词 商业化鸡饲料 商业化猪饲料 转基因玉米 转基因大豆 定性PCR 实时荧光定量PCR 转化体事件mon810和GTS40-3-2
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Decomposition of Surface-Applied and Soil-Incorporated Bt Maize Leaf Litter and Cry1Ab Protein During Winter Fallow in South Africa 被引量:4
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作者 A.KAMOTA P.MUCHAONYERWA P.N.S.MNKENI 《Pedosphere》 SCIE CAS CSCD 2014年第2期251-257,共7页
Unintended effects of genetic modification on chemical composition of Bt maize leaf litter may have impacts on its decomposition. In most agricultural systems in South Africa, maize litter is either left on the soil s... Unintended effects of genetic modification on chemical composition of Bt maize leaf litter may have impacts on its decomposition. In most agricultural systems in South Africa, maize litter is either left on the soil surface or incorporated into the soil during tillage. A litterbag experiment, using leaf litter of three maize hybrids (DKC80-12B, DKC80-10 and DKC6-125), was carried out at the University of Fort Hare Research Farm, South Africa, to determine the effects of genetic modification on decomposition of maize leaf litter when left on the soil surface under field conditions between July and November, the normal fallow period, in 2008. Another litterbag experiment was conducted at the University of Fort Hare Research Farm and Zanyokwe Irrigation Scheme, South Africa, using leaf ~itter of two maize hybrids genetically modified with the erylAb gene (MONS10), DKC75-15B and PAN6Q-3OSB, and their corresponding near isolines, CRN3505 and PAN6Q-121. The degradation of CrylAb protein in the litter, both surface-applied and soil-incorporated, was also investigated. Decomposition of Bt maize litter was similar to that of non-Bt maize litter both when applied on the surface and when incorporated into soil. Soil-incorporated litter, as well as its CrylAb protein, decomposed faster than that applied on the surface. The leaf litter C:N ratios of PAN6Q-308B and PAN6Q-121 were similar throughout the study, whereas those of DKC75-15B and CRN3505 declined by similar amounts during a 12-week period. These findings suggested that decomposition of leaf litter of Bt maize, with the MON810 event, was not affected by maize genetic modification, and that the CrylAb protein broke down together with plant leaf litter during the winter fallow regardless of whether the litter was applied on the soil surface or incorporated into soil. 展开更多
关键词 genetic modification litterbag experiment maize hybrid mon810 event protein degradation
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Farm-scale evaluation of the impact of CrylAb Bt maize on canopy nontarget arthropods: a 3-year study 被引量:2
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作者 Maria Arias-Martin Matias Garcia +2 位作者 Pedro Castanera Felix Ortego Gema P. Farinos 《Insect Science》 SCIE CAS CSCD 2018年第1期87-98,共12页
The cultivation of CrylAb-expressing genetically modified MON810 (Bt maize) has led to public concern in Europe, regarding its impact on nontarget arthro- pods (NTAs). We have assessed the potential effects of DKC... The cultivation of CrylAb-expressing genetically modified MON810 (Bt maize) has led to public concern in Europe, regarding its impact on nontarget arthro- pods (NTAs). We have assessed the potential effects of DKC 6451 YG (MON810) maize on canopy NTAs in a farm-scale study performed in Central Spain during 3 years. The study focused on hemipteran herbivores (leafhoppers and planthoppers) and hymenopteran parasitic wasps (mymarids) collected by yellow sticky traps, which accounted for 72% of the total number of insects studied. The dynamics and abundance of these groups varied among years, but no significant differences were found between Bt and non-Bt maize, indicating that Bt maize had no negative effect on these taxa. Nonetheless, the CrylAb toxin was detected in 2 different arthropods collected from Bt maize foliage, the cicadellids Zyginidia scutellaris and Empoasca spp. A retrospective power analysis on the arthropod abundance data for our field trials has determined that Z. scutellaris and the family My- maridae have high capacity to detect differences between the Bt maize and its isogenic counterpart. The use of these canopy NTAs as surrogates for assessing environmental impacts of Bt maize is discussed. 展开更多
关键词 CICADELLIDAE mon810 MYMARIDAE risk assessment surrogate species Zyginidia scutellaris
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