转基因玉米MON87411实时荧光PCR定性检测方法的建立及其标准化

转基因玉米MON87411是孟山都远东有限公司研发的抗虫耐除草剂玉米转化体,该转化体已获得进口加工原料的农业转基因生物安全证书。以转基因玉米MON87411品系特异性序列为靶标设计引物和探针,经特异性测试、体系优化、灵敏度测试及检出限测试,建立了转基因玉米MON87411的实时荧光PCR定性检测方法。结果表明,该方法能检测出转基因玉米MON87411的转化体成分,检出限(limit of detection,LOD)可达0.05%,具有稳定性好、特异性强、灵敏度高的特点。国内8家转基因生物安全检测机构对本方法进行了特异性测试、检出限测试和再现性测试,循环验证报告显示该方法符合国家标准方法的各项要求,可在检测行业推广应用。研究建立的方法可为我国对转基因玉米MON87411品系的安全监管提供有效的技术支撑。

转基因抗虫耐除草剂玉米MON87411精准定量检测方法的建立

【目的】抗虫耐除草剂玉米MON87411是孟山都远东有限公司利用农杆菌介导方法研发的玉米转化体,已获得我国进口用作加工原料的农业转基因生物安全证书。为满足生物安全监管的要求,亟需建立该转化体的定量检测方法。【方法】根据抗虫耐除草剂玉米MON87411的两端旁侧序列信息设计引物和Taqman探针,进行引物筛选、特异性检测、PCR体系优化、标准曲线建立、正确度及精密度检测、检出限及定量限测试、微滴数字PCR方法验证等。【结果】该方法能特异、定量地检测出抗虫耐除草剂玉米MON87411转化体成分,检出限低至10拷贝,定量限为40拷贝。对测试样品定值准确,经微滴数字PCR方法验证结果一致。【结论】本方法为该新品种转基因玉米品系的精准定量提供了一种新的检测方法,为生物安全监管提供了有效的技术支撑。

转基因抗虫耐除草剂玉米MON87411PCR定性检测方法的建立及其标准化

转基因玉米MON87411是孟山都远东有限公司研发的玉米转化体,该转化体能耐受草甘膦除草剂,还具有防控玉米根虫的性状,已获得进口用作加工原料的转基因生物安全证书。文章旨在建立转基因玉米MON87411转化体的特异性定性检测方法,以MON87411转化体特异性序列为靶标,设计一系列特异性引物,进行了引物筛选、特异性测试、反应条件优化、灵敏度测试、检出限测试和再现性测试等试验。结果表明,该方法的主要技术参数全部符合相关转基因分子检测标准的要求。特异性片段大小为199 bp,品系特异性高,灵敏度达0.05%,检出限为0.1%,并具有良好的再现性和重复性。国内8家转基因生物安全检测机构对该方法进行了特异性测试、检出限测试和再现性测试。循环验证报告显示:该方法符合国家标准方法的各项要求,可在检测行业推广应用。该方法的建立为我国对该品系的安全监管提供有效技术支撑。