转基因耐除草剂玉米MON87419品系特异性定性PCR检测方法的建立

转基因耐除草剂玉米MON87419是由孟山都远东有限公司研发的玉米转化体,能够耐受麦草畏和草铵膦2种除草剂,已向我国申请进口用作加工原料的转基因生物安全证书。本文旨在建立转基因耐除草剂玉米MON87419转化体的特异性定性检测方法,以MON87419转化体特异性序列为靶标,设计一系列特异性引物,进行引物筛选、特异性测试、反应条件优化、灵敏度测试、检出限测试和再现性测试等试验。结果表明,本特异性检测方法的主要技术参数全部符合相关转基因分子检测标准的要求,特异性片段大小为216 bp,品系特异性高,灵敏度低至0.05%,检出限达到0.1%,具有良好的再现性和重复性。本方法的建立可为该转基因品系及其衍生产品的检测和安全监管提供有效技术支撑。

转基因玉米MON87419实时荧光PCR定性检测方法的建立

转基因玉米MON87419是孟山都远东有限公司研发的转化体,转入了dom和pat基因,能够耐受麦草畏和草铵膦两种除草剂。本研究以转基因耐除草剂玉米MON874193′端特异性序列为靶标设计引物和探针,经特异性测试、体系优化、灵敏度测试及检出限(LOD)测试,建立了MON87419的实时荧光PCR定性检测方法。结果表明,该方法能检测出转基因耐除草剂玉米MON87419转化体成分,具有稳定性好、特异性强、灵敏度高的特点,检出限可达0.05%。该方法主要技术参数全部符合相关标准的要求,可为转基因玉米的安全监管提供有效的技术支撑。

转基因玉米MON87419实时荧光定量PCR检测方法的建立

转基因玉米MON87419是耐受麦草畏和草铵膦两种除草剂的玉米新品系。为了建立转基因玉米MON87419实时荧光定量检测方法,本研究根据转基因玉米MON87419的3′端旁侧序列信息设计引物和Taqman探针,经引物筛选、PCR体系优化、特异性检测、标准曲线建立、正确度及精密度检测和定量限测试等试验,表明该方法能特异、定量检测出转基因玉米MON87419转化体成分,可以对0.1%以上的MON87419转基因成分进行准确定量。本研究结果可为该转基因玉米品系的安全监管提供有效技术支撑。