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马鹿MORF4L2组织表达、基因克隆及生物信息学分析
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作者 韩青 高仰 +3 位作者 吴玄烨 索婧媛 金庆梅 刘学东 《野生动物学报》 北大核心 2024年第4期774-780,共7页
MORF4L2是一种转录因子,通过形成NuA4组蛋白乙酰转移酶复合物来参与异染色质组装和组蛋白修饰,对细胞生长、增殖和凋亡起重要作用。为了探究马鹿(Cervus elaphus)鹿茸中MORF4L2所发挥的功能,使用qPCR技术检测鹿茸不同组织中MORF4L2基因... MORF4L2是一种转录因子,通过形成NuA4组蛋白乙酰转移酶复合物来参与异染色质组装和组蛋白修饰,对细胞生长、增殖和凋亡起重要作用。为了探究马鹿(Cervus elaphus)鹿茸中MORF4L2所发挥的功能,使用qPCR技术检测鹿茸不同组织中MORF4L2基因的表达水平,采用PCR克隆马鹿MORF4L2基因的CDS序列,通过多物种比对MORF4L2基因mRNA序列进行相似性分析并构建系统进化树,利用生物信息学方法预测分析MORF4L2编码蛋白的结构与理化性质。结果显示:MORF4L2在马鹿鹿茸的前软骨层中表达量最高;马鹿MORF4L2的mRNA序列较为保守,与加拿大马鹿(C.canadensis)中MORF4L2的相似性最高;马鹿MORF4L2基因CDS区全长为864 bp,编码287个氨基酸,理论等电点为9.73,为碱性蛋白;预测发现马鹿MORF4L2蛋白不存在信号肽,有30个潜在磷酸化位点;蛋白质结构主要由无规则卷曲和α-螺旋构成,主要定位在细胞核中。研究结果可为MORF4L2在马鹿鹿茸生长发育过程中所起的作用提供重要基础数据。 展开更多
关键词 马鹿 MORF4L2 组织表达 基因克隆 生物信息学
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细胞衰老相关基因的研究进展 被引量:2
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作者 曲丹 蔡东联 《国外医学(卫生学分册)》 2008年第2期75-78,共4页
衰老是自然界一种复杂的、不同器官和系统呈现一系列特定变化的生命现象,是生命运动的自然过程,其机制很复杂。细胞衰老与个体衰老及细胞癌变等重要生理、病理现象密切相关。本文将对参与、影响和调控细胞衰老过程的重要基因,如MORF4、... 衰老是自然界一种复杂的、不同器官和系统呈现一系列特定变化的生命现象,是生命运动的自然过程,其机制很复杂。细胞衰老与个体衰老及细胞癌变等重要生理、病理现象密切相关。本文将对参与、影响和调控细胞衰老过程的重要基因,如MORF4、p21、p16和p53等近年来的研究进展作一综述。 展开更多
关键词 衰老 基因 MORF4 P53 P21 P16
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原核生物基因组的CDS与ORF序列的几点分析
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作者 沈世镒 高建召 +1 位作者 胡刚 王奎 《生物数学学报》 CSCD 北大核心 2009年第1期33-39,共7页
基因组的开放阅读框(ORF)是基因识别与基因组分析的基础,有多种软件包给出了它们的生成算法,但结果与指标并不统一.本文给出了po-MORF的定义与它的生成算法,证明了由基因组所确定的po-MORF集合的存在与唯一性,并由该生成算法可以得到全... 基因组的开放阅读框(ORF)是基因识别与基因组分析的基础,有多种软件包给出了它们的生成算法,但结果与指标并不统一.本文给出了po-MORF的定义与它的生成算法,证明了由基因组所确定的po-MORF集合的存在与唯一性,并由该生成算法可以得到全部po-MORF序列.我们还比较了若干原核生物基因组中所有CDS与po-MORF序列的相互关系,并讨论了关于基因识别中的有关问题. 展开更多
关键词 基因组的p_0-MORF序列 MORF生成算法 CDS与ORF序列集合的相互关系
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Bna A02.YTG1,encoding a tetratricopeptide repeat protein,is required for early chloroplast biogenesis in Brassica napus
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作者 Haiyan Zhang Xiaoting Li +8 位作者 Yebitao Yang Kaining Hu Xianming Zhou Jing Wen Bin Yi Jinxiong Shen Chaozhi Ma Tingdong Fu Jinxing Tu 《The Crop Journal》 SCIE CSCD 2022年第3期597-610,共14页
Chloroplasts are essential for plant growth and development,as they play a key role in photosynthesis.The chloroplast biogenesis process is complex and its regulatory mechanism remains elusive.We characterized a spont... Chloroplasts are essential for plant growth and development,as they play a key role in photosynthesis.The chloroplast biogenesis process is complex and its regulatory mechanism remains elusive.We characterized a spontaneous Brassica napus(rapeseed)mutant,ytg,that showed a delayed greening phenotype in all green organs and retarded growth.We identified Bna A02.YTG1 encoding a chloroplastlocalized tetratricopeptide repeat protein widely expressed in rapeseed tissues.We speculated that the ytg phenotype was caused by the deletion of Bna A02.YTG1 based on sequence comparison of 4608(with normal green leaves,isolated from the elite Chinese rapeseed cultivar ZS11)and ytg combined with transcriptome data and CRISPR/Cas9 gene editing results.The homologous gene(Bna C02.YTG1)restored the phenotype of the mutant.Bna A02.YTG1 interacted with MORF2,MORF8,and OZ1.RNA editing of the ndh D-2,ndh F-290,pet L-5,and ndh G-50 plastid transcripts was affected in ytg.These findings suggested that Bna A02.YTG1 participates in RNA editing events.We predicted 29 RNA editing sites in the chloroplast of Brassica napus by comparison with the Arabidopsis chloroplast genome.We conclude that Bna A02.YTG1 affects the posttranscriptional regulation of plastid gene expression and suggest that a tetratricopeptide repeat protein is involved in the chloroplast RNA editing in rapeseed. 展开更多
关键词 Brassica napus CHLOROPLAST morfs RNA editing TPR
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MORF4基因诱导HeLa细胞衰老
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作者 蔡哲 石超 +2 位作者 范林洋 李晓阳 杨春蕾 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期2544-2546,共3页
目的建立MORF4基因高表达诱导HeLa细胞衰老模型,探索MORF4基因对HeLa细胞衰老的影响。方法分别将pcDNA3.1(+)/Flag-MORF4和pcDNA3.1(+)空载质粒转染人宫颈癌HeLa细胞株。SA-β-Gal染色检测细胞衰老,MTT法及流式细胞术检测细胞周期变化... 目的建立MORF4基因高表达诱导HeLa细胞衰老模型,探索MORF4基因对HeLa细胞衰老的影响。方法分别将pcDNA3.1(+)/Flag-MORF4和pcDNA3.1(+)空载质粒转染人宫颈癌HeLa细胞株。SA-β-Gal染色检测细胞衰老,MTT法及流式细胞术检测细胞周期变化及细胞的增殖活力,两者共同确定MG-132处理的最适条件。Western印迹检测MORF4、PCNA基因的表达。结果质粒经酶切和测序鉴定,证明pcD-NA3.1(+)/Flag-MORF4质粒中含有目的基因序列;经浓度梯度1.25、2.5、5、10μmol/L MG-132处理转染细胞2、4、24、48 h后,SA-β-Gal染色和MTT检测结果显示10μmol/L MG-132处理24 h的转染细胞明显衰老,细胞活力降低;细胞周期被阻滞在G0/G1期,S期细胞明显减少,增殖受到抑制;Western印迹检测结果显示MORF4蛋白在细胞中的含量明显升高,而与增殖相关基因PCNA表达下调。结论构建的pcDNA3.1(+)/Flag-MORF4质粒在HeLa细胞中表达;并在MG-132作用下,使MORF4基因的表达产物积累,从而影响PCNA蛋白的表达量,抑制HeLa细胞的增殖活性,阻滞细胞周期的进行,导致细胞进入衰老状态。 展开更多
关键词 细胞衰老 MORF4基因 PCNA 细胞增殖
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兔抗鼠MORF4L1 a多克隆抗体的制备与鉴定
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作者 李芳 章元 张业 《基础医学与临床》 2022年第5期726-731,共6页
目的制备兔抗鼠MORF4L1 a变体的多克隆抗体以区分MORF4L1的a、b变体。方法根据对小鼠MORF4L1 a、b变体差异序列的抗原性、同源性的分析结果,合成MORF4L1 a的N端第52~66位的序列作为抗原肽(15肽,KSAVRPRRSEKSLKT),偶联KLH载体作为抗原免... 目的制备兔抗鼠MORF4L1 a变体的多克隆抗体以区分MORF4L1的a、b变体。方法根据对小鼠MORF4L1 a、b变体差异序列的抗原性、同源性的分析结果,合成MORF4L1 a的N端第52~66位的序列作为抗原肽(15肽,KSAVRPRRSEKSLKT),偶联KLH载体作为抗原免疫家兔,用Dot blot鉴定抗血清的特异性。对特异性良好的1号家兔抗血清进行抗原亲和层析纯化,用间接ELISA测定抗体效价。此外,构建MORF4L1 a、b变体的原核表达质粒和真核表达质粒。利用原核表达系统表达纯化后和在细胞中表达的MORF4L1 a、b蛋白进行Western blot鉴定抗体的特异性。结果1号免疫兔抗血清能特异性识别多肽;纯化后抗体的效价达到1∶512000;成功构建pGEX-4T-2-M4S、pGEX-4T-2-M4L原核表达质粒和pCMV-3Tag-6-M4S、pCMV-3Tag-6-M4L真核表达质粒,并在原核系统和真核系统中成功表达。该抗体能与MORF4L1 a特异结合。结论成功制备了效价高、特异性较强的兔抗鼠MORF4L1 a抗体,为进一步揭示MORF4L1可变剪接的生物学意义和不同变体的生物学功能奠定了实验基础。 展开更多
关键词 MORF4L1 多克隆抗体 变体
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MORF4L1蛋白抗体制备及生物信息学分析
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作者 丁圆圆 陈泽锋 +5 位作者 邱腾 施雯 任德续 王伟玲 吉敬 刘彬 《生物技术》 CAS 2024年第1期20-26,75,共8页
[目的]构建MORF4L1原核表达载体和纯化表达产物,制备MORF4L1蛋白抗体并进行生物信息学分析。[方法]利用PCR将MORF4L1基因片段酶切、克隆、转化至大肠杆菌Bl21(DE3),经IPTG诱导表达蛋白。利用His-Tag技术纯化重组蛋白,用重组蛋白免疫新... [目的]构建MORF4L1原核表达载体和纯化表达产物,制备MORF4L1蛋白抗体并进行生物信息学分析。[方法]利用PCR将MORF4L1基因片段酶切、克隆、转化至大肠杆菌Bl21(DE3),经IPTG诱导表达蛋白。利用His-Tag技术纯化重组蛋白,用重组蛋白免疫新西兰白兔,采集抗血清后通过硫酸铵沉淀法将多克隆抗体从抗血清中纯化,应用Western Blotting验证多克隆抗体与内外源性MORF4L1蛋白的结合特异性。利用在线软件(GEPIA、UALCAN)进行生物信息学分析。[结果]成功构建了重组蛋白,蛋白纯化后在相对分子质量(Mr)43000位置处有单一条带,重组His-MORF4L1蛋白与His抗体发生特异性结合。制备的抗血清与MORF4L1蛋白特异性结合,纯化后仅在相对分子质量(Mr)55000和25000位置处有条带。纯化的多克隆抗体与内外源性MORF4L1蛋白发生特异性反应。MORF4L1的表达与肝癌不良预后相关。[结论]成功构建MORF4L1蛋白及抗体,MORF4L1在肝癌中高表达预后差,对进一步研究MORF4L1蛋白的结构和生物学功能具有重要意义。 展开更多
关键词 致死因子4样蛋白1(MORF4L1) 载体构建 重组蛋白 原核表达 蛋白纯化 多克隆抗体 抗体制备 生物信息学分析
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A Framework on Fast Mapping of Urban Flood Based on a Multi-Objective Random Forest Model 被引量:1
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作者 Yaoxing Liao Zhaoli Wang +1 位作者 Chengguang Lai Chong-Yu Xu 《International Journal of Disaster Risk Science》 SCIE CSCD 2023年第2期253-268,共16页
Fast and accurate prediction of urban flood is of considerable practical importance to mitigate the effects of frequent flood disasters in advance.To improve urban flood prediction efficiency and accuracy,we proposed ... Fast and accurate prediction of urban flood is of considerable practical importance to mitigate the effects of frequent flood disasters in advance.To improve urban flood prediction efficiency and accuracy,we proposed a framework for fast mapping of urban flood:a coupled model based on physical mechanisms was first constructed,a rainfall-inundation database was generated,and a hybrid flood mapping model was finally proposed using the multi-objective random forest(MORF)method.The results show that the coupled model had good reliability in modelling urban flood,and 48 rainfall-inundation scenarios were then specified.The proposed hybrid MORF model in the framework also demonstrated good performance in predicting inundated depth under the observed and scenario rainfall events.The spatial inundated depths predicted by the MORF model were close to those of the coupled model,with differences typically less than 0.1 m and an average correlation coefficient reaching 0.951.The MORF model,however,achieved a computational speed of 200 times faster than the coupled model.The overall prediction performance of the MORF model was also better than that of the k-nearest neighbor model.Our research provides a novel approach to rapid urban flood mapping and flood early warning. 展开更多
关键词 Coupled model Designed rainfall events Multi-objective random forest(MORF)method Rainfall-inundation database Urban flood prediction
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雌、雄驯鹿鹿茸顶端表皮组织Morf4l1基因cDNA克隆与表达分析 被引量:3
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作者 王强辉 翟健程 +1 位作者 夏彦玲 李和平 《中国农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期77-84,共8页
为探索驯鹿(Rangifer tarandus)Morf4l1基因的生物学特性以及雌、雄驯鹿茸顶端表皮组织表达差异,揭示Morf4l1对鹿茸生长的重要生物学意义,采用RT-PCR技术和分子克隆技术成功获得驯鹿Morf4l1基因cDNA,以驯鹿Morf4l1基因cDNA为依据,展开... 为探索驯鹿(Rangifer tarandus)Morf4l1基因的生物学特性以及雌、雄驯鹿茸顶端表皮组织表达差异,揭示Morf4l1对鹿茸生长的重要生物学意义,采用RT-PCR技术和分子克隆技术成功获得驯鹿Morf4l1基因cDNA,以驯鹿Morf4l1基因cDNA为依据,展开生物信息分析和雌、雄驯鹿鹿茸表皮组织中表达差异的研究。结果表明:1)驯鹿Morf4l1基因CDS区全长为972bp,共编码323个氨基酸。2)驯鹿Morf4l1蛋白是一种相对分子量为37.20ku的不具跨膜结构的亲水性蛋白质,其二级结构主要以β转角为主。3)驯鹿Morf4l1编码蛋白氨基酸序列与其他18个物种该蛋白氨基酸序列发现相似度介于85%~100%,其中与白尾鹿相似度最高为100%,与原鸡相似度最低为85%,与其他亲缘关系较近物种(如牛、羊)的相似度能达到99%;结合系统进化树发现驯鹿Morf4l1基因在进化中高度保守,各物种之间的遗传距离不超过0.035。4)荧光定量结果显示雌性驯鹿茸顶端表皮组织Morf4l1基因相对表达量是雄性的2.127±0.032倍。本研究发现驯鹿Morf4l1基因在进化中高度保守,是鹿茸生长发育的关键基因,其在驯鹿鹿茸表皮组织中相对表达量受性别影响较为明显。 展开更多
关键词 驯鹿 Morf4l1基因 CDNA克隆 生物信息分析 基因表达
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