小鼠胰腺腺泡细胞系MPC-83中功能性G蛋白偶联受体的缺失

目的:研究小鼠胰腺肿瘤细胞系MPC-83细胞中功能性G蛋白偶联受体(G protein-coupled receptor,GPCR).方法:培养小鼠胰腺肿瘤细胞系MPC-83细胞,检测其刺激前后胞质游离钙离子浓度的变化.结果:ACh 25 nmol/L刺激新鲜分离的正常小鼠胰腺腺泡细胞,胞质钙离子浓度发生规则、振荡样升高:CCK 5 pmol/L具有类似作用.GPCR激动剂CCK 1μmol/L、VP 1μmol/L、P物质5μmol/L、组织氨10μmol/L、PE 10μmol/L和ACh 100μmol/L分别刺激MPC-83细胞,胞质钙离子没有发生任何增加.地塞米松100 nmol/L与MPC-83细胞共孵育72h,MPC-83细胞增殖速度明显降低,但GPCR配体CCK、VP、P物质仍然不引起胞质钙离子浓度的增加.结论:从昆明小鼠胰腺外分泌部肿瘤分离出来的胰腺腺泡细胞系MPC-83,正常的G蛋白偶联受体完全缺失,处于极度去分化状态.

白细胞介素-6对胰腺癌荷瘤小鼠移植瘤生长及Caspase-3/Bax/Bcl-2信号通路的影响

目的探讨白细胞介素(IL)-6促进胰腺癌MPC-83细胞荷瘤小鼠移植瘤生长的Caspase-3/Bax/Bcl-2凋亡信号通路的作用机制。方法取40只小鼠,腋部皮下注射小鼠胰腺癌MPC-83细胞制作胰腺癌荷瘤动物模型,随机分为空白对照组(A组),腹腔注射PBS 10 ml/kg;IL-6组(B组),腹腔注射重组小鼠IL-6200μg/kg;IL-6受体阻断剂组(C组),腹腔注射托珠单克隆抗体100 mg/kg;IL-6+IL-6受体阻断剂组(D组),腹腔注射托珠单抗100mg/kg,30 min后再注射重组小鼠IL-6200μg/kg,每组10只。各组小鼠每3 d给药1次,持续至28 d。于实验开始后第0、7、14、21及28天,记录瘤体积变化;采用ELISA法检测瘤组织生存素(survivin)和细胞色素C(Cyt-C)含量;采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blotting法检测瘤组织Caspase-3、Bax及Bcl-2 mRNA和蛋白表达水平。结果与A组比较,B组荷瘤小鼠瘤组织第7、14、21及28天生长较快,瘤组织生存素含量升高,细胞色素C含量下降,Caspase-3和Bax mRNA和蛋白表达水平下调,Bcl-2 mRNA和蛋白表达水平上调(P<0.05,P<0.01);与B组比较,C组与D组荷瘤小鼠瘤组织第14、21及28天生长缓慢,瘤组织生存素含量降低,细胞色素C含量升高,Caspase-3、Bax mRNA和蛋白表达水平升高,Bcl-2 mRNA和蛋白表达水平降低(P<0.05,P<0.01);C组与D组比较,各检测指标差异无显著性(P>0.05)。结论IL-6促进胰腺癌生长增殖的作用与其调控Caspase-3/Bax/Bcl-2细胞凋亡信号通路相关。