目的本研究首先观察N-烷基嘧啶DNA糖基化酶(MPG)在人体骨肉瘤中的表达特点及其与患者预后的关系,进而构建复制缺陷型腺病毒MPG表达载体,探讨人骨肉瘤细胞HOS过表达MPG及其对DNA损伤药物MMS,MNNG和TMZ敏感性的影响。方法应用免疫组化方...目的本研究首先观察N-烷基嘧啶DNA糖基化酶(MPG)在人体骨肉瘤中的表达特点及其与患者预后的关系,进而构建复制缺陷型腺病毒MPG表达载体,探讨人骨肉瘤细胞HOS过表达MPG及其对DNA损伤药物MMS,MNNG和TMZ敏感性的影响。方法应用免疫组化方法检测60例骨肉瘤组织和3株骨肉瘤细胞中MPG的表达。按染色强度将其分为低表达组和高表达组,统计分析它们与临床病理及患者预后的关系。应用流式细胞术、蛋白印迹和HEX标记寡核苷酸方法确定MPG腺病毒表达载体Ad5 HA-MPG在人体骨肉瘤细胞HOS中的感染效率,MPG蛋白表达和MPG酶活性;MTS、SRB和[3H]胸腺嘧啶掺入法检测细胞存活;PE-Annexinv/7-AAD流式细胞术检测细胞凋亡。结果3株骨肉瘤细胞MPG均呈弱阳性表达。60例骨肉瘤中MPG 40例(65%)为高表达,MPG表达和WHO分型和患者预后显著相关。10 MO I Ad5 HA-MPG可使90%以上HOS感染,感染细胞高表达MPG并具有MPG酶活性。MPG过表达HOS显著地提高DNA损伤性化疗药物MMS、MNNG和TMZ的敏感性,其IC50值分别下降了6.0、4.5和2.5倍。结论Ad5 HA-MPG瞬时MPG过表达,可能是一种提高骨肉瘤细胞对DNA损伤性化疗药物敏感性的潜在治疗方法。展开更多
Mpg文件是采用MPEG方式压缩的数字视频文件格式,主要用于常见的VCD、SVCD以及多媒体课件等.不同的用途,会采用不同的压缩编码标准,像V C D采用的是M P E G-1,而SV C D采用的是MPEG-2.使用Premiere 6.0可以导入并生成mpg文件,但都要依赖...Mpg文件是采用MPEG方式压缩的数字视频文件格式,主要用于常见的VCD、SVCD以及多媒体课件等.不同的用途,会采用不同的压缩编码标准,像V C D采用的是M P E G-1,而SV C D采用的是MPEG-2.使用Premiere 6.0可以导入并生成mpg文件,但都要依赖插件的支持.展开更多
文摘目的本研究首先观察N-烷基嘧啶DNA糖基化酶(MPG)在人体骨肉瘤中的表达特点及其与患者预后的关系,进而构建复制缺陷型腺病毒MPG表达载体,探讨人骨肉瘤细胞HOS过表达MPG及其对DNA损伤药物MMS,MNNG和TMZ敏感性的影响。方法应用免疫组化方法检测60例骨肉瘤组织和3株骨肉瘤细胞中MPG的表达。按染色强度将其分为低表达组和高表达组,统计分析它们与临床病理及患者预后的关系。应用流式细胞术、蛋白印迹和HEX标记寡核苷酸方法确定MPG腺病毒表达载体Ad5 HA-MPG在人体骨肉瘤细胞HOS中的感染效率,MPG蛋白表达和MPG酶活性;MTS、SRB和[3H]胸腺嘧啶掺入法检测细胞存活;PE-Annexinv/7-AAD流式细胞术检测细胞凋亡。结果3株骨肉瘤细胞MPG均呈弱阳性表达。60例骨肉瘤中MPG 40例(65%)为高表达,MPG表达和WHO分型和患者预后显著相关。10 MO I Ad5 HA-MPG可使90%以上HOS感染,感染细胞高表达MPG并具有MPG酶活性。MPG过表达HOS显著地提高DNA损伤性化疗药物MMS、MNNG和TMZ的敏感性,其IC50值分别下降了6.0、4.5和2.5倍。结论Ad5 HA-MPG瞬时MPG过表达,可能是一种提高骨肉瘤细胞对DNA损伤性化疗药物敏感性的潜在治疗方法。