基于MPN原理的TEMPO/TVC法检测食品中的细菌总数及其测量不确定度的评定

细菌总数(也称需氧细菌数)的多少在一定程度上标志着食品卫生质量的优劣,是最常见的食品卫生指标之一。本文比较了传统的菌落计数方法和基于最大近似值(MPN)原理的TEMPO/TVC仪器法,对多个种类的190个食品样品进行了检测。实验数据的比对表明TEMPO/TVC法与菌落计数方法一致性程度较好(符合率97.4%,准确度和精确度无差异),测量不确定度相近,具有简便、快速、高效、人为误差较小的特点。

油田硫酸盐还原菌APS-MPN-PCR快速定量检测方法

为了解决现有油田污水中硫酸盐还原菌检测周期长、检测费用较高的问题，应用聚合酶链式反应（PCR）技术与倍比稀释法（MPN）相结合的APS-MPN-PCR法，对硫酸盐还原菌进行快速定量检测．从污水中制备了直接用于PCR扩增的菌液，保证了定量检测的准确性；建立以腺苷酰硫酸还原酶基因（APS）为靶位点的通用探针APS7F和APS8R的反应体系和扩增条件．研究结果表明，与液体稀释培养法相比，该方法检测灵敏度提高了两个数量级，操作时间缩短（整个检测过程只需要3～4h），检测费用也降低．该方法检测结果非常稳定，真实的表征了污水中实际的SRB菌数量，可以在生产中应用．

湖泊中军团菌的巢式PCR-MPN检测法

为了直接检测环境水体中军团菌的存在,文章将巢式PCR与倍比稀释法相结合(巢式PCR-MPN法),采用两对引物扩增环境样品基因组DNA。将检测到含有军团菌的样品DNA模板进行十倍梯度稀释,由最低检测的稀释度,计算出样品中军团菌的细胞数,同时确定方法检测的灵敏度。并用克隆建库、构建系统树的方法来验证该文研究方法的特异性。研究结果表明,巢式PCR第二步后获得的序列均为军团菌序列,该方法军团菌DNA的检出限可以低至2.74 fg/μL。该研究建立的水体军团菌检测方法具有简便快捷、特异性好、灵敏度高的特点。

应用概率理论拓宽MPN值的计算与实用性

应用多管法检测大肠菌群细菌数是一种适用各种水样的行之有效的检验方法，但此方法操作繁琐，数据处理较难。本文应用概率理论，推导出多种情况下大肠菌群最可能数ＭＰＮ值计算公式，并编制了方便可靠的ＨＢＧ程序，从而进一步提高了此法的实用价值。

对耐胆盐革兰氏阴性菌检验采用MPN法和平板法的比较

目的:比较MPN法和平板法对耐胆盐革兰氏阴性菌计数是否存在显著性差异。方法:采用单人四种方法计数和多人两种方法计数,通过统计学分析是否存在显著性差异。结果:MPN的离散性较大,预培养5h较2 h菌体有增殖。结论:检查耐胆盐革兰氏阴性菌应尽量在2 h内完成,MPN法较灵敏,更适合于污染轻的样品。

MPN法测定医疗保健产品生物负载的探讨

本文从医疗保健产品微生物检测的实际需要出发,详细介绍了生物负载MPN法测定的应用进展、使用前提、方法实施及验证。最后总结了MPN法的结果计算公式,并讨论了结果计算中的一些特殊情况,可为生物负载检测提供参考。

MPN计数法对肉类食品检测金黄色葡萄球菌的影响

目的:研究MPN计数法对肉类食品检测金黄色葡萄球菌的影响。方法:选择2017年5月至2018年12月期间,每月在武汉市农贸市场购买的生猪肉、生牛肉、禽肉类及散装熟肉4类肉类食品作为研究对象,分别利用MPN计数法检测其中的金黄色葡萄球菌,观察其检测结果。结果:经过MPN计数法检测后,其中生猪肉有10份阳性,检出率26.32%;生牛肉有10份阳性,检出率31.25%;禽肉类有26份阳性,检出率50.98%;散装熟肉有19份阳性,检出率35.19%。结论:MPN计数法在肉类食品检测金黄色葡萄球菌中具有重要意义,检出率较高,具有临床推广使用的价值。

多管法检测大肠菌群MPN值─—HBG程序的探讨

应用多管法检测大肠菌群细菌数是一种适用各种水样的行之有效的检验方法。但此方法操作繁琐，数据处理较难。本文应用概率理论，推导出多种情况下大肠菌群最可能数（ＭＰＮ值）计算公式。并编制了方便可靠的ＨＢＧ程序，从而进一步提高了此法的实用价值。

食品中蜡样芽孢杆菌检验方法验证结果分析

[目的]验证国标平板计数法、最大或然数(most probable numbe,MPN)计数法检测食品中蜡样芽孢杆菌的适用性。[方法]参照GB 4789.14—2014《食品安全国家标准食品微生物学检验蜡样芽孢杆菌检验》中平板计数法、MPN计数法检测样品中蜡样芽孢杆菌浓度,对比不同方法的检测结果。同时以蜡样芽孢杆菌为阳性对照,蕈状芽孢杆菌、苏云金芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌为阴性对照,验证方法的特异性。[结果]该方法具有特异性,能够准确检出蜡样芽孢杆菌的计数,方法精密度和重复性好,回收率在84%~100%。[结论]2种方法均具有适用性和可操作性,均能达到标准方法要求的技术指标水平,检验结果准确可靠。

不同加工类型样品大肠菌群检测方法选择研究

大肠菌群作为食品安全控制环节中重要指标之一,GB 4789.3—2016中提供了2种方法,分别为第一法(MPN法)与第二法(平板计数法),为研究不同类型样品最适宜的检测方法,将570份不同类型样本分别同时采用GB 4789.3—2016的第一法和第二法进行检测。结果表明,对于经过打磨、加热等破坏性生产加工的样品,第一法(MPN法)的检测灵敏度更高。对于未经打磨、加热等破坏性的样品,第一法(MPN法)与第二法(平板计数法)检测差异性不大。

基于纸片法评估水质样品的色度对粪大肠菌群测定的影响

为了评估水质样品的色度变化对粪大肠菌群测定的干扰,采用纸片法对7个色度样品进行检测分析。结果显示:在接种粪大肠菌群数一致且菌液无稀释的情况下,随着水质样品色度的增加,可判读的阳性纸片数会逐渐减少,当样品色度增加到32倍、64倍、128倍、256倍和512倍时其纸片的阳性反应均显示不可判读。以色度0样品的粪大肠菌群测定值为参比,色度1样品的粪大肠菌群测定值与其无显著性差异,其余5个样品(色度2、色度3、色度4、色度5和色度6)的粪大肠菌群测定值存在极显著差异。水质样品色度变化会干扰纸片法阳性纸片的判读,从而在一定程度上降低其测定有色水质样品粪大肠菌群结果的准确性和可靠性。

两种沙门氏菌定量计数方法的比较

目的为了准确计数生鲜肉中的沙门氏菌的数量,为微生物危险性评估提供精确的数据支持,探索一种实用性、准确性和选择性的沙门氏菌计数方法.方法将污染不同数量沙门氏菌的样品分别稀释,同时用平板计数法和MPN法分别计数,比对两方法的准确度、灵敏度和可操作性.平板计数选用CHROMagar显色培养基平板和XLD琼脂平板作分离平板,挑取可疑菌落经鉴定后,计算沙门氏菌数.MPN法选用TTB、MM和SC增菌液分别于(36±1)℃、(42±1)℃增菌后,接种CHROMaagar显色培养基平板和XLD琼脂平板,挑取可疑菌落鉴定后查MPN表.结果样品中污染沙门氏菌量在1～500 cfu/g时,平板计数法不能将沙门氏菌很好地区分;MPN法采用SC增菌液(42±1)℃培养效果最好,检出限10 cfu/g,检测值和理论值(在500 cfu/g)的符合率为92.0%.结论MPN法无论从可操作性或是检出的灵敏度都要优于平板计数法.

不同植被土壤好气性自生固氮菌的时空变化格局及其菌株的初步筛选

主要分析了青皮天然林与木麻黄人工林等其他植被类型在土壤好气性自生固氮菌数量分布方面的差异及较强固氮能力菌株的分离和筛选。在石梅湾的8种不同植被类型样地，于不同季节取样4次，每次均取0～10cm及10～20cnl两个土层的根际土与根外土，用改良阿须贝培养基、MPN法计数土壤好气性自生固氮菌并初步筛选具有较强固氮能力的菌株。结果表明：本区土壤好气性自生固氮菌的时间分布极不均匀，且空间分布明显受到时间的影响。从时间分布来看，在一个年周期中，4月固氮菌数量最多，而7月最少，两者差异显著，此后数量又逐渐增加；从空间分布来看，随采样时间不同，植被、取样深度、植物根系、样地地势等条件均对土壤好气性自生固氮菌数量分布也有所不同，这些条件归根到底是通过改变土壤的氮素营养供给，土壤的水、热、气条件来影响固氮菌的分布；同时各植被类型的好气性自生固氮菌数量季节变化幅度也有异，处于高级别演替阶段青皮过伐林及混交林的季节变化明显小于较低演替阶段的灌丛、次生青皮林及木麻黄林。研究还分离了15个具有潜在固氮能力的菌株，并筛选出4个固氮能力较强的菌株．为进一步在海防林的建设及青皮林的保护中研究利用植物促生菌做了初步探索和准备。

双层平板法对海产食品中副溶血性弧菌定量效果评价

评价了双层平板(DLAP)计数法对海产食品中副溶血性弧菌的定量分析效果。通过在混合菌悬液和鱼、虾、贝等生物体中人为模拟染菌,并进行冷冻受伤减菌处理,采用DLAP计数法对副溶血性弧菌处理前后的菌量变化进行分析,同时采用MPN法、BCVM平板计数法和TCBS平板计数法3种方法作为对照,运用SPSS软件分析4种方法测定结果的显著性差异(P<0.05)。试验结果表明,在理想的控制条件下,4种方法对不同基质条件中副溶血性弧菌的测定结果不存在明显差异;在菌体活力不强或受伤状态下,DLAP计数法对该菌的测定结果与MPN法在同一水平上且缩短了5d的检验周期,其准确性优于BCVM平板计数法和TCBS平板计数法,具有省时、准确的特点,适合广普应用。

3M纸片检测大肠菌群法与国标快速检测法的比较研究

[目的]比较用3M纸片法与用快速检测国标法(MEFH)对不同样品大肠菌群的检测结果。[方法]以花生、小米、玉米、大米和花生油为检测样品,以Aliz-gal和MUGal肉汤为培养基,设大肠菌群污染的自然状态未知浓度和模拟培养已知浓度的两种处理,进行3M纸片法与MEFH法对大肠菌群的检测结果对比试验。[结果]3M法与MEFH中MPN法检测自然状态的5种样品的大肠菌群结果比较符合率为90%,3M纸片法和MEFH中的平板法检测结果无明显差异。3M纸片法未出现假阳性现象,证明了3M纸片法有很强的选择性。[结论]3M纸片法操作简便,适合企业现场食品卫生检测。

沼气发酵过程中产甲烷菌快速计数方法的研究

文章采用MPN以及显微计数两种方法对不同样品中甲烷菌数目进行检测。试验结果表明:显微计数用于沼气发酵过程中的甲烷菌检测是可行的。该法比MPN计数更加快速简便,结果也更接近真实情况。

南极菲尔德斯半岛土壤氮循环微生物类群数量与功能活性的初步研究

南极乔治王岛南端的菲尔德斯半岛被认为是研究南极生态与生物资源的理想之地。本研究从该半岛全岛范围采集了3类不同类型的土壤样品,采用传统最大或然法(MPN)对其所含氮循环各类群微生物的总量进行了测定,同时利用常规Griess试剂、纳氏试剂等显色法初步估算了各菌群的功能活性强度,并结合土壤理化性质和采样点生态等进行了初步分析。目的是对该半岛土壤氮循环微生物进行先期初步了解,为进一步深入研究它们的其他特性奠定基础。结果表明:13个土样中所含氮循环微生物总量趋势为氨化菌>反硝化菌>硝化菌和固氮菌(活菌数),除极个别样品外均具有不同程度的硝化、反硝化、氨化活性。其中,所有土壤样品均具有比较高的氨化菌含量及氨化活性强度;丘陵山坡土壤的反硝化菌含量与反硝化活性强度要高于动、植物区土壤(极个别样品除外);动物区和植物区土壤的硝化菌含量较少,但硝化活性强度较高,预示着可能存在高效功能菌株;而丘陵山坡土壤的硝化菌含量及硝化活性强度则表现得高低不一。本结果为进一步深入研究该地区氮循环微生物提供了前期参考。

水中铁细菌检验方法研究

本文研究了生活饮用水中铁细菌的定性和定量检验方法，即用滤膜集菌，改良柠檬酸铵铁培养基增菌培养，MPN法定量，应用该方法从两个自来水厂水中检出了10铁细菌，并对电渗析水再矿化处理前后水中铁细菌的数量变化进行了评价。

宁夏紫花苜蓿土著根瘤菌的分布状况研究

从宁夏不同生态区域不同作物土壤入手,研究紫花苜蓿土著根瘤菌的分布状况,为根瘤菌在紫花苜蓿生产应用中提供科学依据。结果表明:宁夏南部半干旱区土壤中土著根瘤菌的数目为720-36 000个/g干土,中部半干旱区1700-3400个/g干土,北部灌区1 500-1 700个/g干土。土壤中土著菌的数量以南部半干旱区苜蓿地为最多,为36 000个/g干土;其次为南部半干旱区玉米地,达3 600个/g干土;再次为中部干旱区小麦地;为南部半干旱区马铃薯种植地最少。

熟肉制品受染阪崎肠杆菌情况调查

目的:了解熟肉制品中阪崎肠杆菌的受染情况,为预防和控制阪崎肠杆菌在人类感染疾病,为卫生监管提供科学依据。方法 :按照GB4789.40-2010《食品微生物学检验阪崎肠杆菌检验》和实时荧光PCR法进行检验并统计分析。结果 :152份熟肉制品检出阪崎肠杆菌14株,检出率为9.2%;染菌量在20MPN/100g浓度范围以下的占92.9%(13/14)。结论 :熟肉制品受染阪崎肠杆菌的情况应引起警惕。