三氧化二砷对MRL/lpr狼疮鼠抗ds-DNA抗体和脾淋巴细胞亚群增殖的影响

目的研究三氧化二砷(ATO)对MRL/lpr狼疮鼠抗ds-DNA抗体和淋巴细胞亚群的影响。方法将MRL/lpr狼疮鼠随机分为:ATO组、生理盐水(NS)组和环磷酰胺(CTX)组。另设正常C57/BL小鼠,随机分为ATO治疗组(0.4 mg/kg.d)和对照组(0.25 mL)。以上每组各6只,隔日腹腔注射,给药2个月后处死,称体重和脾脏重量算出脾脏指数;ELISA法测各组小鼠血清抗ds-DNA抗体水平;流式细胞术测脾脏细胞亚群百分比。结果(1)MRL/lpr小鼠ATO治疗组脾脏指数、血清抗ds-DNA抗体水平和CD19+、CD3+、CD3+CD4+细胞百分比均低于NS对照组(P<0.01或P<0.05),NK细胞百分比明显高于NS对照组(P<0.05);(2)ATO治疗组小鼠的脾脏指数和CD3CD4双阳性细胞百分比显著低于CTX组(P<0.01),CTX治疗组小鼠血清抗ds-DNA抗体水平均较对照组明显降低(P<0.01),但ATO治疗组的抗体水平较CTX治疗组高(P<0.05);(3)在C57/BL小鼠中,ATO治疗组和NS治疗组之间以上指标均无差异。结论ATO抑制MRL/lpr狼疮鼠T、B淋巴细胞活化同时上调NK细胞功能,减少体内自身抗体产生;但是对正常小鼠的抗体水平和细胞亚群并无明显影响。

三氧化二砷对MRL/lpr狼疮鼠IFN-γ、IL-4表达和Th1/Th2平衡的影响

探讨三氧化二砷(ATO)对MRL/lpr狼疮鼠IFN-γ、IL-4表达和Th1/Th2平衡的影响。将发病早期和晚期的MRL/lpr狼疮鼠分别接受ATO、环磷酰胺(CTX)和生理盐水(NS)治疗2个月,然后用ELISA法测血清中IFN-γ、IL-4的浓度和抗ds-DNA抗体水平及四色流式细胞术测脾脏CD3+(T)细胞、CD3+CD4+(Th)细胞、CD3+CD4+IFN-γ+IL-4-(Th1)细胞和CD3+CD4+IL-4+IFN-γ-(Th2)细胞的百分率,从而研究ATO对MRL/lpr狼疮鼠IFN-γ、IL-4表达和Th1/Th2平衡的影响。发现给药后,3、5月龄ATO组MRL/lpr狼疮鼠血清抗ds-DNA抗体水平明显下降(P<0.05),其血清IFN-γ和IL-4浓度、Th1、Th2和CD3+细胞百分率均低于相应月龄的NS组(P<0.05),且NS组中5月龄组Th1/Th2值较3月龄组显著升高(P=0.003),而在ATO组中差异无统计学意义(P=0.187)。因此,研究显示ATO能显著降低发病早期和发病晚期的MRL/lpr狼疮鼠血清抗ds-DNA抗体的水平,可抑制T细胞和Th细胞增生和活化功能,降低IFN-γ和IL-4的血清水平和细胞诱生水平,并在一定程度上逆转发病晚期的MRL/lpr狼疮鼠的Th1偏移。

解毒祛瘀滋阴方对强的松治疗的MRL/lpr狼疮鼠肺、脾、腹腔巨噬细胞TLR4信号通路的影响

[目的]观察解毒祛瘀滋阴方对MRL/lpr狼疮鼠巨噬细胞TLR4信号通路的影响。[方法]MRL/lpr狼疮鼠分为模型组、强的松组、解毒祛瘀滋阴方组(以下简称:中药组)以及强的松加中药组(以下简称:中西药结合组),分别以生理盐水、强的松、解毒祛瘀滋阴方中药和强的松加解毒祛瘀滋阴方中药灌胃4周,收集肺、腹腔、脾脏巨噬细胞,RT-PCR检测相关基因的表达。[结果]经强的松治疗后狼疮鼠肺巨噬细胞TLR4 mRNA和脾巨噬细胞TLR4蛋白都显著升高(P<0.05),而中西药结合组则可以显著降低升高的脾巨噬细胞TLR4蛋白水平(P<0.05)。强的松还可以显著降低肺、腹腔巨噬细胞MyD88、IFN-α、iNOS mRNA等TLR4下游分子的表达(P<0.05),而中西药结合组可以显著升高已经降低的肺巨噬细胞MyD88 m RNA的表达(P<0.05)。[结论]MRL/lpr狼疮鼠应用糖皮质激素后,巨噬细胞TLR4信号通路发生改变,解毒祛瘀滋阴方中药可以降低糖皮质激素造成的TLR4蛋白的异常表达。

三氧化二砷对MRL/lpr狼疮鼠T-bet/GATA3信号通路的影响

目的:本文旨在探讨三氧化二砷(arsenic trioxide,ATO)对MRL/lpr狼疮鼠T-bet/GATA3信号通路的影响及其作用机制。方法:将20周龄MRL/lpr狼疮鼠和正常C57BL/6J小鼠随机分组,分别接受ATO(0.4mg·kg^(-1)·d^(-1))和同体积生理盐水(NS)治疗2个月,分离脾脏淋巴细胞,然后用实时荧光定量PCR法检测T-bet、GATA3、IFN-γ、IL-4的mRNA水平及T-bet/GATA3 mRNA的比值,Western blot法检测T-bet和GATA3的蛋白表达,ELISA法检测血清中IFN-γ和IL-4的浓度。结果:(1)MRL/lpr狼疮鼠NS组T-bet、IFN-γ的mRNA及蛋白表达、Tbet/GATA3 mRNA比值均高于C57BL/6J小鼠NS组(P<0.05),而GATA3、IL-4的mRNA及其蛋白表达均低于C57BL/6J小鼠NS组(P<0.05);(2)在MRL/lpr狼疮鼠中,与NS组相比,ATO组T-bet、IFN-γ的mRNA及蛋白表达、T-bet/GATA3 mRNA比值均下降(P<0.05),而2组中GATA3、IL-4的mRNA及蛋白表达无明显差异;(3)在C57BL/6J小鼠中,NS组和ATO组之间以上指标均无显著性差异。结论:ATO可能通过影响MRL/lpr狼疮鼠Tbet/GATA3信号通路,降低T-bet表达,从而减少Th1型细胞因子IFN-γ的表达和分泌。

青蒿鳖甲汤加减及糖皮质激素对MRL/lpr狼疮鼠体重的影响

目的:观察青蒿鳖甲汤加减以及糖皮质激素对MRL/lpr小鼠体重的影响。方法:将32只8-10周龄的雌性MRL/lpr小鼠随机分为中药组、激素组、联合用药(青蒿鳖甲汤加减+糖皮质激素)组、安慰剂组,每组8只,另取雌性C57BL/6小鼠8只为正常对照组;中药组予青蒿鳖甲汤加减浓缩药液灌胃,激素组予醋酸泼尼松片水溶液灌胃,联合用药组同时予青蒿鳖甲汤加减和糖皮质激素,安慰剂组和正常对照组予生理盐水灌胃,给药7周。每周测量并记录小鼠的体重,进行统计分析。结果:各组小鼠用药前与用药后体重的比较,差异均有统计学意义(P<0.01);各组小鼠用药前后体重增量(△Weight)比较,差异均有统计学意义(P<0.01);组间多重比较,安慰剂组、激素组△Weight均低于正常对照组(P<0.05),中药组、联合用药组与正常对照组△Weight比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:糖皮质激素治疗疾病早期MRL/lpr小鼠可能对其体重增长有不利影响,合用青蒿鳖甲汤加减可能减缓这种影响。

滋阴清热小复方对MRL/lpr狼疮鼠影响的实验研究

目的:观察滋阴清热小复方对MRL/lpr狼疮鼠的影响。方法:将40只MRL/lpr狼疮模型鼠随机分为4组,即模型对照组、滋阴狼疮方治疗组、强的松治疗组、滋阴清热复方+强的松治疗组,每组10只,分别给予生理盐水、中药滋阴清热复方、强的松悬液、滋阴清热复方+强的松悬液灌胃治疗10周。正常组:选用昆明种小鼠10只,生理盐水灌胃。均每日1次,每次0.5ml,连续用药饲养10周后,取血及肾脏标本。结果:与对照组相比,各治疗组动物死亡率、24h尿蛋白含量、血清抗-dsDNA水平、肾脏病理均有不同程度改善,以中西医结合治疗组最为明显。结论:中药滋阴清热复方及西药强的松对狼疮鼠模型均有良好的治疗作用,尤以中西医结合治疗效果最好。

雷公藤内酯醇对MRL/lpr狼疮鼠血清IL-2、IL-4、IFN-γ水平的影响

目的观察雷公藤内酯醇对MRL/lpr狼疮鼠外周血清IL-2、IL-4、IFN-γ水平的影响。探讨雷公藤内酯醇治疗红斑狼疮的可能机制。方法选择30只MRL/lpr狼疮鼠和10只野生对照型MRL/MPJ小鼠,分为4组,狼疮鼠雷公藤内酯醇组、生理盐水组、未干预组、野生对照组,分别予以尾静脉注射雷公藤内酯醇(100μg/kg/d)和等量的生理盐水5d后24h后常规分离血清后,采用双抗体夹心法(ELISA)测定各组小鼠血清IL-2、IL-4、IFN-γ水平的变化。结果与野生对照型MRL/MPJ小鼠相比,MRL/lpr狼疮鼠血清中IFN-γ、IL-4含量升高(P<0.05,P<0.05),IL-2水平降低(P<0.05),经过雷公藤内酯醇治疗后,血清IFN-γ、IL-4水平降低(P<0.01,P<0.05),IL-2水平升高(P<0.01)。结论通过调节Th1/Th2细胞因子的失衡可能是雷公藤内酯醇治疗红斑狼疮的机制之一。

新工艺乙醇提取法获取的三藤胶囊混悬液对MRL/lpr狼疮鼠影响的药效学研究

目的从"量-效"和"时-效"角度,探讨不同浓度三滕胶囊水混悬液对MRL/lpr狼疮鼠的影响。方法通过新型工艺乙醇提取法获取不同浓度三藤胶囊水混悬液。MRL/lpr狼疮样小鼠48只,随机等分为6组:三藤胶囊水混悬液高、中、低剂量(K、L、M)组、抗狼疮散(Q)组、强的松(R)组和MRL/lpr模型(S)组,连续饲养8周,每次灌胃容量0.10mL/10g体质量;于给药第0天、4周和8周(结束时),观察小鼠情况并留取小鼠的24h尿(尿蛋白定量测定,考马斯亮蓝法)、血清(抗ds-DNA抗体水平检测,ELISA方法)和肾脏组织(结束时,PAS染色,半定量分析)。另设8只C57B46小鼠为正常对照组。结果狼疮鼠给药4周和8周后,体质量变化:K、L和M组的小鼠体质量明显轻于R组(P<0.05);蛋白尿的纠正:L、M、R组的小鼠蛋白尿干预后均有一个下降过程(P<0.05),与S组相比有明显好转(P<0.05);血清抗ds-DNA抗体水平的改善:L、M、Q、R组的小鼠血清抗ds-DNA抗体水平均呈现下降趋势,以L组下降最为明显(P<0.05),且与S组相比有明显下降(P<0.05);肾脏病理变化(总活动指数):K、L、M组小鼠与R组相当,好于S组(P<0.05),肾脏组织PAS染色阳性强度灰阶比值,各干预组均好于模型组(P<0.05)。结论新工艺乙醇提取法获取的三藤胶囊混悬液各剂量组都能降低MRL/lpr狼疮鼠血清抗ds-DNA抗体的水平,纠正蛋白尿,改善肾脏病理严重度,以中剂量(0.880g/10g体质量)的疗效最佳,其作用效价与强的松相当,而无激素样的水钠潴留不良反应;并显示了一定的"量-效"和"时-效"关系。

三藤制剂的不同提取方法对MRL/lpr狼疮鼠影响的初步观察

目的观察三藤制剂(雷公藤、红藤和鸡血藤)的3种不同提取工艺对MRL/lpr狼疮鼠24 h尿蛋白、抗双链脱氧核糖核酸抗体(抗ds-DNA抗体)及肾脏病理改变的影响。方法 MRL/lpr狼疮鼠40只,雌性,20周龄,按5只1组随机分为8组,分别为高、低剂量的工艺1、2、3组和抗狼疮散水混悬液对照组及模型对照组,灌胃给药,每天1次,连续8周,灌胃容量0.1 mL/10 g体质量;分别于实验第0、第28和第56天留取小鼠的24 h尿液、血清,以及56 d时留取肾脏等,观察不同组别的24 h尿蛋白定量(考马斯亮蓝染色法测定)、抗ds-DNA抗体水平(ELISA方法检测)及肾脏病理改变(HE染色,半定量分析)。结果给药28 d时,三藤制剂工艺3高剂量组干预前、后比较,以及与模型组比较,24 h尿蛋白明显下降(P<0.05);给药56 d时,与模型组相比,工艺2和3的高、低剂量组均有明显下降(P<0.05)。给药28 d时,各药物干预组抗ds-DNA抗体水平较模型组低(P<0.05),以工艺3高剂量组改善最为明显;给药56 d时,工艺3高、低剂量组明显低于与模型组(P<0.05)。与模型组比较,各干预组肾脏的病理改变均有不同程度的改善,以工艺3高剂量组的最为明显(P<0.01)。结论三藤制剂的3种不同提取工艺提取物在干预后,均能不同程度改善MRL/lpr狼疮鼠的血清抗ds-DNA抗体水平、蛋白尿量及肾脏的病理改变,其中以工艺3高剂量组最为明显。

来氟米特对MRL/lpr狼疮鼠治疗作用的研究

目的研究来氟米特(Leflunomide,LEF)对MRL/lpr狼疮鼠免疫状况的影响。方法将MRL/lpr狼疮鼠随机分为3组:LEF组(10mg.kg-1.d)、生理盐水(NS)组(0.25mL)和环磷酰胺(CTX)组(50mg.kg-1.qw)。每组各6只,CTX组隔日腹腔注射,其余两组每天灌胃,给药2个月后处死,ELISA法测各组小鼠外周血测血清ANA、抗ds-DNA抗体水平,考马斯亮蓝法测24h尿蛋白定量和流式细胞术测脾脏淋巴细胞亚群比例。结果①MRL/lpr小鼠LEF治疗组血清抗ds-DNA抗体水平和24h尿蛋白量较NS组明显降低(P<0.01和P<0.05);②LEF治疗组小鼠NK细胞百分比明显高于NS对照组(P<0.05),而CD19、CD3、CD3CD4阳性细胞百分比显著低于NS对照组(P<0.05或P<0.01)。结论 LEF能抑制MRL/lpr狼疮鼠T、B淋巴细胞活化同时上调NK细胞功能,减少体内自身抗体和蛋白尿的产生,从而达到治疗狼疮的目的。

三氧化二砷对MRL/lpr狼疮鼠IFN-γ基因表达的调控

目的:探讨三氧化二砷(ATO)调控MRL/lpr狼疮鼠干扰素γ(IFN-γ)基因表达的机制。方法:将20周龄MRL/lpr狼疮鼠和正常C57BL/6J小鼠无菌条件下取出脾脏,制成脾脏淋巴细胞悬液。体外经植物血球凝集素P(PHA-P,终浓度20 mg/L)和白细胞介素-2(IL-2,终浓度106IU/L)常规刺激48 h后,随机分为PBS组(空白对照)和ATO(1.0μmol/L)组,继续培养24 h。酶联免疫吸附法(ELISA)测定各组培养上清液IFN-γ的表达量,采用实时荧光定量PCR(Q-PCR)检测各组IFN-γmRNA的表达情况,应用基于半定量PCR和Q-PCR的染色质免疫共沉淀(ChIP)技术检测各组细胞IFN-γ启动子区乙酰化组蛋白H3、H4(acH3,acH4)及启动子区结合RNA聚合酶Ⅱ(RNAPⅡ)的水平。结果:(1)MRL/lpr狼疮鼠PBS组IFN-γ的分泌和IFN-γmRNA的表达均高于C57BL/6J小鼠PBS组(分别P<0.01和P<0.05),并且IFN-γ启动子区acH3、acH4的水平及启动子区域富集RNAPⅡ水平高于C57BL/6J小鼠PBS组(均P<0.01)。(2)在MRL/lpr狼疮鼠中,与PBS组相比,ATO组IFN-γ的分泌和IFN-γmRNA的表达下降(分别P<0.01,P<0.05),IFN-γ基因启动子区域acH3、acH4的水平及启动子区域富集RNAPⅡ水平也下降(均P<0.01)。(3)在C57BL/6J小鼠中,PBS组和ATO组之间以上指标均无差异。结论:ATO下调MRL/lpr狼疮鼠IFN-γ的分泌和IFN-γmRNA的表达可能是通过降低基因启动子区域acH3、acH4的水平减弱了RNAPⅡ依赖的转录,而ATO对正常C57BL/6J小鼠无明显影响。

来氟米特对MRL/lpr狼疮鼠疗效及单核细胞趋化蛋白-1的影响

目的:观察来氟米特(LEF)对MRL/lpr狼疮鼠的疗效及与单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)之间的关系。方法:采用考马斯亮蓝染色、ELISA、HE染色及免疫荧光技术检测尿蛋白、抗ds-DNA抗体、血清肌酐;通过ELISA、免疫组化、Western Blot及RT-PCR技术了解LEF组及对照组血清、尿液、肾脏中MCP-1的表达水平。结果:(1)LEF组24h尿蛋白、抗ds-DNA抗体滴度、血肌酐均显著低于对照组,肾小球硬化、间质纤维化程度、炎性细胞浸润、新月体形成率、IgG及IgM沉积较对照组均显著降低;(2)LEF组血清、尿液及肾脏组织中的MCP-1水平较对照组显著降低。结论:LEF通过抑制MCP-1的表达而发挥治疗狼疮性肾炎(LN)的作用。

基于16S rRNA高通量测序技术初步探讨双歧杆菌乳杆菌三联活菌片对系统性红斑狼疮模型小鼠MRL/lpr肠道菌群的影响

目的:基于16S rRNA高通量测序技术初步探讨双歧杆菌乳杆菌三联活菌片(金双歧)对系统性红斑狼疮模型小鼠MRL/lpr肠道菌群的影响。方法:将12只6~8周龄雌性SPF级MRL/lpr小鼠随机分为模型对照组和金双歧高、中、低剂量组,每组3只,以3只雌性6~8周龄SPF级BALB/C小鼠作为空白对照组。适应性喂养3 d后,金双歧高、中、低剂量组分别以金双歧溶液234μg、78μg、26μg灌胃,模型对照组及空白对照组每日灌胃等量生理盐水。灌胃1周后,从12只MRL/lpr小鼠和3只BALB/C小鼠的粪便中提取DNA,对核糖体RNA V3-V4区进行扩增,进行高通量测序得到原始数据,通过生物信息学的方法对数据进行质控过滤,对样品Alpha/Beta多样性进行分析以及后续差异分析。结果:Chao1、ACE、Shannon、Simpson指数的Alpha多样性分析显示,5组之间差异无统计学意义(P>0.05)。灌胃后,金双歧高、中、低剂量组Neisseria、Pseudomonas、Haemophilus的相对丰度明显低于模型对照组(P<0.05);金双歧中剂量组Actinobacteriota的相对丰度高于模型对照组、金双歧高剂量组、金双歧低剂量组(P<0.05);与空白对照组比较,金双歧高、中、低剂量组及模型对照组unidentified-Blautia的相对丰度降低(P<0.05)。结论:金双歧高、中、低剂量灌胃后,使Neisseria、Pseudomonas、Haemophilus、Lachnospira等有害菌的丰度下调。金双歧低剂量灌胃后,有益菌Fusobacteriota上调,说明金双歧能影响系统性红斑狼疮模型小鼠MRL/lpr的肠道菌群。

BET蛋白抑制剂JQ1对MRL/lpr狼疮小鼠外周B细胞分化的影响

目的:探讨BET蛋白抑制剂JQ1对MRL/lpr狼疮小鼠外周B细胞分化的影响及其治疗作用。方法:12周龄MRL/lpr小鼠分别腹腔注射JQ150 mg/(kg·d)或10%DMSO;每2周检测24 h尿蛋白定量;6周后检测血清中尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、补体C3、补体C4、抗ds-DNA抗体、ANA及IgG、IgG1、IgG2a、IgM等免疫球蛋白水平;PAS染色观察肾脏组织病理学改变,免疫荧光染色观察IgG和C3免疫复合物沉积情况。利用流式细胞术检测小鼠B细胞各亚群细胞的比例;RT-qPCR检测脾脏prdm1 mRNA表达水平。结果:与DMSO组相比,JQ1治疗组小鼠24 h尿蛋白定量显著减少,血清BUN、Cr水平明显降低,补体C3、C4水平明显升高,抗ds-DNA抗体、ANA以及IgG、IgG1、IgG2a和IgM等免疫球蛋白水平明显降低;此外,JQ1治疗组小鼠肾小球、肾血管的病理损害程度均明显减轻,肾脏IgG和C3免疫复合物沉积显著减少。同时,JQ1治疗组小鼠脾脏、淋巴结、外周血B细胞中浆细胞和记忆B细胞亚群的比例显著下降;JQ1治疗亦显著抑制狼疮小鼠B细胞内调节浆细胞分化的关键转录因子prdm1 mRNA表达。结论:BET蛋白抑制剂JQ1对MRL/lpr狼疮小鼠具有显著的治疗作用,通过抑制Blimp1表达进而调节浆细胞分化可能是其发挥治疗作用的机制之一。BET蛋白可能是SLE治疗的新靶标。

基于NF-κB信号通路探究狼疮定对红斑狼疮MRL/lpr小鼠炎症反应的调节作用

[目的]研究狼疮定对系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)MRL/lpr小鼠炎症反应的影响,并分析其对核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)信号通路的调节作用。[方法]将12只MRL/lpr小鼠随机分为模型组(6只)、干预组(6只),另选取C57BL/6小鼠6只为对照组。干预组灌胃给予0.1 mL/10 g狼疮定浓缩液,对照组、模型组给予等体积0.9%氯化钠溶液,所有动物均干预8周。给药前后分别测定血清炎性因子白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、α-干扰素(interferon-α,IFN-α)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)及NF-κB信号通路相关蛋白NF-κB抑制蛋白α(NF-κB inhibitorɑ,IκBα)、NF-κB抑制蛋白αp50(NF-κB inhibitorɑp50,IκBαp50)、NF-κB抑制蛋白αp65(NF-κB inhibitorɑp65,IκBαp65)表达水平,采用扩增阻碍突变系统-聚合酶链式反应(amplification refractory mutation system Real time fluorescence-quantitative polymerase chain reaction,ARMS-q PCR)检测NF-κB信号通路相关mRNA表达情况。通过苏木精-伊红染色检测肾组织损伤情况,采用免疫印迹法检测肾组织中炎性因子表达水平。[结果]与对照组比较,模型组血清炎性因子IL-6、IFN-α、TNF-α、NF-κB信号通路相关蛋白(IκBα、IκBαp50、IκBαp65)水平、NF-κB信号通路相关mRNA(IκBα、IκBαp50、IκBαp65)水平均显著升高(P<0.05),肾组织中IL-6、IFN-α、TNF-α表达水平升高(P<0.05)。模型组小鼠肾组织损伤明显,主要表现为肾小管扩张,肾小球硬化,结构严重破坏,且肾小球、肾小管周围出现明显的炎症反应。干预后,MRL/lpr小鼠血清各指标水平均出现明显降低(P<0.05),肾组织炎性损伤较模型组减轻。[结论]狼疮定可抑制MRL/lpr小鼠炎症反应,从而减轻炎性肾损伤,其作用机制可能与下调NF-κB信号通路有关。

P-糖蛋白单克隆抗体改善MRL/lpr狼疮鼠肾脏病变的研究

目的 探讨P-糖蛋白（P-glyeoprotein,P-gp）单克隆抗体（UIC2）在改善MRL/lpr狼疮鼠肾脏病变中的作用.方法 24只14周龄雌性MRl/lpr狼疮鼠分为3组：P-gp单克隆抗体1次治疗组（G1）、P-gp单克隆抗体3次治疗组（G2）、对照组（G0）.观察体重;采用考马斯亮蓝法检测24 h尿蛋白定量;采用酶联免疫吸附法试验（enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）检测抗双链DNA（dsDNA）抗体水平;采用酶法检测血清肌酐水平;采用苏木素-伊红染色、免疫荧光和电镜观察肾脏病理改变.结果 ①22周时G1组和G2组体重高于G0组（P〈0.05）.② 24 h尿蛋白定量22周时Gl组[（1.9±1.1）mg]和G2组[（1.4±0.9）mg]低于G0组[（3.1±1.9）mg]（P〈0.05）;26周时G1组[（2.4±1.4）mg]和G2组[（1.8±1.1）mg]低于G0组[（5.3±2.2）mg]（P〈0.05）.③26周时血清肌酐G1组[（7.0±2.9）μmol/L]和G2组[（6.1±2.5）μmol/L]低于G0组[（12.7±1.3）umol/L]（P〈0.05）.④19周时,抗dsDNA抗体滴度G1组[（43±19）×10^2 U/mL]和G2组[（45±32）×10^2 U/mL]低于G0组[（87±39）×10^2 U/mL]（P〈0.05）;26周时G2组[（35±11）×10^2 U/mL]低于G0组[（59±35）×10^2 U/mL].⑤肾小球新月体形成率G1组（0.11±0.05）和G2组（0.09土0.01）低于G0组（0.23±0.07）,G2组较Gl组减低（P均〈0.05）.结论 P-gp单克隆抗体可改善MRl/lpr狼疮鼠肾脏病变的进展,减少尿蛋白、降低血清肌酐,对狼疮肾炎有显著疗效.

青蒿素对MRL/lpr狼疮鼠血清及肾组织MDA、TAOC水平的影响

目的探讨青蒿素干预治疗对MRL/lpr狼疮鼠血清和肾组织丙二醛和总抗氧化能力的影响。方法 20只MRL/lpr狼疮鼠随机分为青蒿素干预治疗组及生理盐水对照组,同等条件下持续喂养12周后采用化学比色法测定MRL/lpr狼疮鼠血清及肾组织MDA、TAOC水平。结果治疗组血清与肾组织MDA均高于对照组(P<0.01)。治疗组血清与肾组织TAOC均高于对照组,肾组织TAOC水平具有统计学意义(P<0.05)。结论青蒿素可能双向调节MRL/lpr狼疮鼠体内的氧化/抗氧化平衡机制。

白芍总苷对MRL/lpr小鼠狼疮性肾炎的影响

目的观察白芍总苷(TGP)对MRL/lpr小鼠狼疮性肾炎的影响。方法将MRL/lpr狼疮肾炎小鼠随机分为模型组和TGP组。考马斯亮蓝法检测尿蛋白含量,酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清IgG型抗dsDNA抗体、ANA水平,HE染色光镜下观察肾组织病理改变,称脾脏和胸腺湿重,并计算脾脏和胸腺指数。结果①与模型组相比,TGP组用药后15、30 d尿蛋白含量显著下降(P<0.05),用药后30 d抗dsDNA抗体、ANA水平和脾脏质量及其指数均显著下降(P<0.05),肾脏组织病理损害明显减轻。②TGP组用药后15、30 d与用药前相比,尿蛋白含量、抗dsDNA抗体水平、ANA水平显著下降(P<0.05),而模型组抗dsDNA抗体水平显著上升(P<0.05),尿蛋白含量、ANA水平无显著差异;TGP组用药后30d与用药后15d相比尿蛋白含量显著下降(P<0.05),抗体水平无显著差异。结论白芍总苷可以降低尿蛋白含量和血清抗dsDNA抗体、ANA水平,明显改善肾组织病理损害,对MRL/lpr小鼠狼疮性肾炎具有一定疗效。

解毒祛瘀滋肾方对MRL/lpr狼疮小鼠肾组织GRα的调控作用研究

目的探讨解毒祛瘀滋肾方对MRL/lpr小鼠肾组织糖皮质激素受体信号通路的作用机制。方法 30只MRL/lpr小鼠随机分为模型组、西药组和中药组,另选10只昆明鼠作为正常对照组。HE染色分析小鼠肾组织病理改变;RT-PCR和Western blot分析糖皮质激素受体α(GRα)的表达;免疫共沉淀检测GRα与亲环素A结合力的影响。结果两个用药组MRL/lpr小鼠肾损伤程度减轻。与模型组比较,西药组小鼠肾组织GRαmRNA及蛋白相对表达量降低,中药组两个指标增加,差异均有统计学意义(P<0.01)。解毒祛瘀滋肾方可显著提高GRα与亲环素A的结合力。结论上调GRα的表达并增强GRα与亲环素A的相互作用是解毒祛瘀滋肾方能够改善小鼠肾组织病变作用机制之一。