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miR-183通过靶向MRTF-A抑制乳腺癌细胞增殖、迁移、侵袭及上皮间充质转化 被引量:3
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作者 张雅敏 刘金鹏 +1 位作者 万伟 王甲林 《山西医科大学学报》 CAS 2023年第3期313-321,共9页
目的探讨miR-183通过靶向肌醇相关转录因子A(myo-inositol-related transcription factor A,MRTF-A)对乳腺癌细胞增殖和上皮间质转化的影响。方法收集本院收治的20例乳腺癌确诊患者的乳腺癌组织和癌旁正常组织,通过实时定量PCR检测miR-... 目的探讨miR-183通过靶向肌醇相关转录因子A(myo-inositol-related transcription factor A,MRTF-A)对乳腺癌细胞增殖和上皮间质转化的影响。方法收集本院收治的20例乳腺癌确诊患者的乳腺癌组织和癌旁正常组织,通过实时定量PCR检测miR-183的表达水平。MCF-7细胞分为4组:NC组、miR-con组、miR-183 mimics组和miR-183 inhibitor组。NC组MCF-7细胞不做转染处理,miR-con组、miR-183 mimics组和miR-183 inhibitor组MCF-7细胞分别转染空质粒、miR-183模拟物和miR-183抑制剂。通过实时定量PCR检测miR-183和MRTF-A的mRNA表达水平;采用CCK-8法检测细胞增殖水平;采用Transwell实验分析细胞迁移和侵袭情况;采用蛋白质印迹实验检测N-cadherin、Vimentin和E-cadherin蛋白表达水平。将si-MRTF-A序列插入到报告基因质粒(pRL-TK)中,构建重组pRL-TK-si-MRTF-A质粒,然后将实验分为3组:MRTF-A-NC组、MRTF-A-con组和si-MRTF-A组。MRTF-A-NC组MCF-7细胞不做转染处理,MRTF-A-con组和si-MRTF-A组MCF-7细胞分别转染pRL-TK空质粒和pRL-TK-si-MRTF-A质粒。采用CCK-8法检测细胞增殖水平;采用Transwell实验分析细胞迁移和侵袭情况;采用蛋白质印迹实验检测N-cadherin、Vimentin和E-cadherin蛋白表达水平;通过荧光素酶报告基因检测分析目标基因的靶向关系。结果与癌旁正常组织相比,乳腺癌组织中miR-183的表达水平降低(P<0.01)。与miR-con组或NC组相比,miR-183 mimics组MCF-7细胞中miR-183表达水平升高(P<0.01),N-cadherin和Vimentin的蛋白表达水平和MCF-7细胞的增殖水平均降低(P<0.01);miR-183 inhibitor组MCF-7细胞中miR-183表达水平降低(P<0.01),N-cadherin和Vimentin的蛋白表达水平和MCF-7细胞的增殖水平均升高(P<0.01)。与miR-con组或NC组相比,miR-183 mimics组MCF-7细胞迁移和侵袭水平均降低(P<0.01);miR-183 inhibitor组MCF-7细胞迁移水平和侵袭水平均升高(P<0.01)。双荧光素酶报告基因检测证实MRTF-A是miR-183的靶标。与MRTF-A-con组或MRTF-A-NC组相比,si-MRTF-A组MCF-7细胞的增殖、迁移和侵袭水平均降低(P<0.01),N-cadherin和Vimentin蛋白表达水平降低(P<0.01),E-cadherin蛋白表达水平升高(P<0.01)。结论miR-183通过靶向MRTF-A在乳腺癌细胞增殖、上皮间质转化和转移中发挥重要作用,是治疗乳腺癌的潜在靶点。 展开更多
关键词 miR-183 mrtf-A EMT 细胞迁移 细胞侵袭
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MRTF-A通过HOTAIR调控非小细胞肺癌细胞A549的增殖及迁移 被引量:5
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作者 张琨 周渝斌 +1 位作者 冯刚 曾富春 《中国肺癌杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期82-89,共8页
背景与目的非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)作为肺癌的一种,由于其高发病率一直备受关注。准确揭示其发病机制对于NSCLC的诊断以及治疗具有重要的指导意义。MATF-A作为转录调控因子在多种肿瘤的发生发展过程中发挥着... 背景与目的非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)作为肺癌的一种,由于其高发病率一直备受关注。准确揭示其发病机制对于NSCLC的诊断以及治疗具有重要的指导意义。MATF-A作为转录调控因子在多种肿瘤的发生发展过程中发挥着重要作用,可以调控多种肿瘤细胞的迁移过程。HOTAIR是近年研究发现的一个长链非编码RNA,在多种肿瘤中异常表达并参与多种肿瘤的增殖及迁移的进程。本研究旨在探究MRTF-A通过HOTAIR调控NSCLC的增殖及迁移进程。方法构建MRTF-A的过表达质粒及干扰质粒,检测对A549细胞增殖及迁移的影响。设计合成HOTAIR的si RNA检测对A549细胞增殖及迁移的作用。q RT-PCR检测MRTF-A对HOTAIR表达的调控作用。构建HOTAIR的启动子检测MRTF-A对HOTAIR启动子活性的影响。结果过表达MRTF-A促进A549细胞的增殖,沉默MRTF-A的表达抑制A549细胞的增殖及迁移。干扰HOTAIR的表达抑制A549细胞的增殖及迁移。MRTF-A能够影响HOTAIR的表达,同时能够调控HOTAIR启动子的活性。结论 MRTF-A通过HOTAIR调控NSCLCA549细胞的增殖及迁移进程。 展开更多
关键词 肺肿瘤 mrtf-A HOTAIR 增殖 迁移
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MRTF-A通过NF-κB参与AGEs诱导肾小球系膜细胞中FN、ICAM-1的表达 被引量:7
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作者 陈秋红 陈志泉 +1 位作者 黄佳妮 黄河清 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期572-577,共6页
目的该研究观察在糖基化终末产物(AGEs)诱导大鼠肾小球系膜细胞(GMCs)中,心肌素相关转录因子MRTFA的变化及其对细胞黏附分子(ICAM-1)及纤维连接蛋白(FN)的影响,探讨MRTF-A是否通过影响NF-κB信号通路参与糖尿病肾病。方法 AGEs条件下,... 目的该研究观察在糖基化终末产物(AGEs)诱导大鼠肾小球系膜细胞(GMCs)中,心肌素相关转录因子MRTFA的变化及其对细胞黏附分子(ICAM-1)及纤维连接蛋白(FN)的影响,探讨MRTF-A是否通过影响NF-κB信号通路参与糖尿病肾病。方法 AGEs条件下,抑制剂CCG-1423抑制MRTF-A,或对MRTF-A进行过表达,干扰处理,通过Western blot检测MRTF-A、ICAM-1和FN的蛋白水平变化及p65在细胞核内的水平。结果在AGEs诱导的GMCs中,MRTF-A的蛋白表达增加;干扰或抑制MRTF-A能够下调AGEs诱导的FN和ICAM-1的蛋白表达及p65入核水平;而过表达MRTF-A则进一步上调FN和ICAM-1的蛋白表达及p65入核水平。结论 AGEs能够上调GMCs中MRTF-A的表达,且MRTF-A通过影响NF-κB信号通路参与介导了AGEs诱导的FN和ICAM-1的蛋白表达。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 肾小球系膜细胞 AGES mrtf-A P65 FN ICAM-1
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MRTF-A参与一氧化氮诱导的乳腺癌迁移相关基因表达
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作者 卢玉琳 胡娟 +1 位作者 李智 何红鹏 《天津科技大学学报》 CAS 2020年第5期8-14,共7页
为研究NO对乳腺癌细胞迁移能力的影响及其分子机制,本研究首先用梯度浓度NO供体SNP处理乳腺癌细胞MCF-7,MTT法检测细胞活性,发现高浓度SNP抑制细胞增殖;PI-Annexin V和Hoechst细胞核染色检测结果显示,高浓度NO促进细胞凋亡.用低浓度SNP... 为研究NO对乳腺癌细胞迁移能力的影响及其分子机制,本研究首先用梯度浓度NO供体SNP处理乳腺癌细胞MCF-7,MTT法检测细胞活性,发现高浓度SNP抑制细胞增殖;PI-Annexin V和Hoechst细胞核染色检测结果显示,高浓度NO促进细胞凋亡.用低浓度SNP处理细胞,划痕愈合及小室迁移实验结果显示,低浓度SNP促进细胞迁移;RT-qPCR和Western blot结果显示,低浓度SNP上调转录调控辅因子MRTF-A及其下游的迁移相关基因MYL9、MYH9和CYR61的表达.在MCF-7细胞敲低NOS2基因同样导致MRTF-A、MYL9、MYH9及CYR61表达下降;敲低MRTF-A则SNP不再促进上述迁移相关基因的表达.以上实验结果提示:NO的肿瘤生物学效应与NO浓度密切相关,细胞内源性或外源性低浓度NO可能通过刺激迁移相关基因表达而促进乳腺癌细胞转移,而MRTF-A参与了NO诱导的迁移相关基因表达. 展开更多
关键词 一氧化氮 乳腺癌 mrtf-A 细胞迁移
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MRTF-A transactivates COMT gene and decreases the anti-tumor effects of tamoxifen
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作者 Zhi-Peng Liu Xue-Gang Luo +5 位作者 Shu Guo Jian-Xin Wang Xin Zhang Nan Wang Yong Jiang Tong-Cun Zhang 《Journal of Biomedical Science and Engineering》 2009年第7期559-563,共5页
Myocardin-related transcription factors A (MRTF-A) is a myocardin-related transcription factor that have been found strongly activated CarG box–containing genes through its direct binding to serum response factor (SR... Myocardin-related transcription factors A (MRTF-A) is a myocardin-related transcription factor that have been found strongly activated CarG box–containing genes through its direct binding to serum response factor (SRF). In the present study, the MRTF-A ex-pression vector was constructed. The MTT assay showed that transfection of MRTF-A could significantly decrease the anti-tumor effect of tamoxifen on MCF-7 breast cancer cells. The bioinformatics analysis found that the CarG element existed in the pro-moter region of COMT gene of many familiar verte-brates, including of human, rhesus macaque, chimpanzee, etc. The results of RT-PCR assay further showed that MRTF-A could enhance the transcrip-tion level of COMT. These results are the first to indicate that COMT might be a target gene which could be regulated by MRTF-A/SRF, and such transactivation event might be involved in the process of tamoxifen resistance. 展开更多
关键词 mrtf-A TAMOXIFEN COMT BREAST CANCER
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人源MRTF-A重组腺病毒构建及其对平滑肌细胞小窝蛋白表达的影响
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作者 朱宝益 陈告煌 +4 位作者 陈少娟 曾鹏 曾健文 蒋重和 莫鉴锋 《北京生物医学工程》 2020年第3期285-289,共5页
目的探讨心肌素相关转录因子(MRTF)-A对膀胱平滑肌细胞小窝蛋白(caveolin)及小窝关联蛋白(cavin)表达的影响,有望为膀胱出口梗阻所致膀胱壁病理改变提供新的治疗靶点。方法首先从人源MRTF-A表达质粒pcDNA3.1-MRTF-A-3flag扩增MRTF-A基... 目的探讨心肌素相关转录因子(MRTF)-A对膀胱平滑肌细胞小窝蛋白(caveolin)及小窝关联蛋白(cavin)表达的影响,有望为膀胱出口梗阻所致膀胱壁病理改变提供新的治疗靶点。方法首先从人源MRTF-A表达质粒pcDNA3.1-MRTF-A-3flag扩增MRTF-A基因序列并构建重组穿梭质粒AdEasy-h-MRTF-A,将成功构建的MRTF-A穿梭质粒与骨架质粒pHBAd-BHG共转染HEK293细胞通过AdEasy系统实现重组,获得HBAd-h-MRTF-A毒种后继续扩增、纯化及滴度测定。然后将正常构建的HBAd-h-MRTF-A重组腺病毒(MRTF-A组)与空载腺病毒(空载组)分别感染人膀胱平滑肌细胞,RT-qPCR检测两组细胞caveolin-1(CAV1)及cavin-1(CAVIN1)的mRNA表达水平,Western blot检测两组细胞MRTF-A、caveolin-1及cavin-1的蛋白表达水平。结果经测序分析验证重组腺病毒HBAd-h-MRTF-A含有正确的MRTF-A基因序列,其在人膀胱平滑肌细胞中过表达的蛋白在大约145 kDa水平可被MRTF-A特异性抗体所识别。与空载组相比,MRTF-A组CAV1的mRNA表达水平上调1.90±0.26倍;CAVIN1的mRNA表达水平上调1.77±0.12倍,差异均具有统计学意义(P<0.05)。同样,与空载组相比,MRTF-A组的caveolin-1蛋白表达水平上调1.84±0.31倍;cavin-1的蛋白表达水平上调2.14±0.28倍,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论成功构建人源MRTF-A重组腺病毒载体HBAd-h-MRTF-A;且过表达MRTF-A可促进膀胱平滑肌细胞caveolin-1及cavin-1的表达;MRTF-A可能成为调控平滑肌细胞小窝结构的重要靶点。 展开更多
关键词 心肌素相关转录因子 小窝蛋白-1 小窝关联蛋白-1 平滑肌细胞 重组腺病毒
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MRTF-A在体内和体外调控乳腺癌发展过程中COL1A1基因的表达 被引量:2
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作者 王琳 曹晓焱 王少华 《临床和实验医学杂志》 2018年第23期2487-2490,共4页
目的探讨心肌素相关转录因子-A (MRTF-A)对乳腺癌中I型胶原蛋白基因(COL1A1)基因表达的调控机制。方法选取18例经彩色多普勒超声确定为乳腺肿块的患者,后经病理检查,8例为良性,10例为恶性。实时定量PCR检测乳腺肿块及人乳腺癌细胞中MRT... 目的探讨心肌素相关转录因子-A (MRTF-A)对乳腺癌中I型胶原蛋白基因(COL1A1)基因表达的调控机制。方法选取18例经彩色多普勒超声确定为乳腺肿块的患者,后经病理检查,8例为良性,10例为恶性。实时定量PCR检测乳腺肿块及人乳腺癌细胞中MRTF-A和COL1A1的表达。MRTF-A干扰RNA转染乳腺癌细胞后,检测COL1A1的表达,荧光素酶报告检测MRTF-A与COL1A1启动子的结合。染色质免疫共沉淀(Ch IP)检测MRTF-A对COL1A1转录的影响。Wnt 3a和-catenin干扰RNA转染乳腺癌细胞后,检测MRTF-A和COL1A1的表达。结果MRTF-A和COL1A1在恶性肿块的表达显著高于其在良性肿块的表达。MRTF-A沉默可以抑制COL1A1 mRNA的表达,且降低COL1A1启动子荧光素酶活性。MRTF-A可与COL1A1启动子上CAr G DNA片段有效结合,MRTF-A沉默可降低乙酰化组蛋白H3K9和RNA聚合酶Ⅱ在COL1A1启动子处富集。Wnt 3a及-catenin在恶性肿块中的表达显著高于其在良性肿块中的表达,且无论是Wnt 3a沉默还是-catenin沉默均可显著抑制MRTF-A和COL1A1的表达。结论MRTF-A通过激活COL1A1的转录促进乳腺癌转移,Wnt/-catenin信号可调控此过程。 展开更多
关键词 乳腺癌 心肌素相关转录因子-A I型胶原蛋白基因
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MRTF-A经TLR4/TRIF通路抗心肌缺血-再灌注介导的炎症损伤 被引量:9
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作者 钟泽 罗秀英 +4 位作者 相鹏 季红慧 吴新东 崇爱国 胡新央 《中华急诊医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期473-477,共5页
目的研究转录因子MRTF-A对心肌缺血-再灌注介导的炎症损伤的影响及机制。方法30只大鼠采用随机数字表分为假手术组、模型组、MRTF-A感染组。假手术组大鼠实行开胸手术但不构建缺血-再灌注模型,模型组结扎冠状动脉30min再松开2h建立在体... 目的研究转录因子MRTF-A对心肌缺血-再灌注介导的炎症损伤的影响及机制。方法30只大鼠采用随机数字表分为假手术组、模型组、MRTF-A感染组。假手术组大鼠实行开胸手术但不构建缺血-再灌注模型,模型组结扎冠状动脉30min再松开2h建立在体心肌缺血-再灌注损伤模型,MRTF-A感染组经慢病毒感染至心肌组织过表达MRTF-A后构建模型。采用生化检测评价血清心肌酶活性、TTC染色评价心肌梗死面积、HE染色测定心肌损伤程度、免疫组织化学和qPCR检测TLR4和TRIF的表达。结果与假手术组比较,心肌缺血30min后再灌注2h明显增加血清心肌酶CK-MB、LDH活性(P<0.05);心肌组织梗死面积成灰白色,梗死面积为(54.31±3.07)%(P<0.05);心肌纤维变形和紊乱,心肌细胞肿胀破裂,炎性细胞浸润明显;TRL4、TRIF的蛋白和mRNA表达明显上调(P<0.05)。与模型组对比,心肌感染MRTF-A至心肌后,CK-MB、LDH水平明显降低(P<0.05);心肌梗死面积显著减少,梗死面积为(16.74±4.26)%(P<0.05);心肌结构接近正常,轻度水肿,少量炎性细胞浸润;TRL4、TRIF的蛋白和mRNA表达显著下降(P<0.05)。结论转录因子MRTF-A在心肌细胞过表达后,通过抑制TLR4/TRIF信号通路,降低血清心肌酶活性和梗死面积,减轻心肌缺血-再灌注损伤。 展开更多
关键词 转录因子mrtf-A 心肌缺血 再灌注损伤 心肌炎症 TLR4 TRIF 信号通路 基因治疗
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基于LTE网络的CSFB语音业务设计与实现
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作者 李慧明 崔丽珍 《信息通信》 2015年第10期201-203,共3页
针对LTE建网初期覆盖不足的现状,提出了基于LTE网络的CSFB语音业务方案和实现办法。目前,CSFB回落方案采用3GPP R8重定向回落方案,同时要求终端支持缓读System Information 13系统消息功能以缩短呼叫建立时延、优化方案性能。总体来说,C... 针对LTE建网初期覆盖不足的现状,提出了基于LTE网络的CSFB语音业务方案和实现办法。目前,CSFB回落方案采用3GPP R8重定向回落方案,同时要求终端支持缓读System Information 13系统消息功能以缩短呼叫建立时延、优化方案性能。总体来说,CSFB呼叫建立过程包括三个阶段:UE在LTE网络发起呼叫/被叫接收寻呼、UE在LTE网络指引下回落并搜索合适的W小区接入、UE读取W小区系统广播消息并建立语音通话。在CSFB部署过程中,因参数配置或者设备功能缺陷,将导致CSFB呼叫建立过程出现异常情况。解决了被叫语音用户由4G网络回落到3G网络过程中出现的"被叫关机"问题,对于今后的网络优化具有参考价值。 展开更多
关键词 LTE CSFB 被叫关机 mrtf
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Myocardin-related transcription factor A cooperates with brahmarelated gene 1 to activate P-selectin transcription 被引量:2
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作者 Mingzi Song Mingming Fang +1 位作者 Liming Yu Yong Xu 《The Journal of Biomedical Research》 CAS CSCD 2016年第1期60-66,共7页
Expression of P-selectin in injured or activated endothelia cells serves as a permissive step towards leukocyte recruitment and perpetuation of inflammation in the pathogenesis of atherosclerosis.P-selectin can be ind... Expression of P-selectin in injured or activated endothelia cells serves as a permissive step towards leukocyte recruitment and perpetuation of inflammation in the pathogenesis of atherosclerosis.P-selectin can be induced by pro-inflammatory stimuli via the transcription factor NF-κB,but the epigenetic mechanisms remain incompletely understood.Previously we reported that myocardin-related transcription factor A(MRTF-A)mediates the transactivation of a slew of adhesion molecules by oxidized low-density lipoprotein(oxLDL),likely through a crosstalk with brahma-related gene 1(BRGl),a chromatin remodeling protein.Here,we show that MRTF-A was both sufficient and necessary for the transactivation of P-selectin gene in endothelial cells treated with TNF-α.Depletion of MRTF-A using small interfering RNA(siRNA)abrogated the binding of BRGl on the P-selectin promoter.Overexpression of BRG1 up-regulated the activity of P-selectin promoter activity while BRGl knockdown attenuated P-selectin expression.Finally,BRGl silencing suppressed the accumulation of acetylated histone H3 and methylated histone H3K4,and altered the binding of NF-κB on the P-selectin promoter.Therefore,our data demonstrate an essential role for MRTF-A and BRGl in P-selectin transactivation in endothelial cells. 展开更多
关键词 myocardin-related transcription factor A(mrtf-A) brahma-related gene 1(BRG1) P-selectin endothelial cell
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Transforming growth factor-β3 induced rat bone marrow-derived mesenchymal stem cells differentiation into smooth muscle cells by activating Myocardin
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作者 Lin-Lin Ma Nan Wang +4 位作者 Zhen Zhou Jun-Yun Zhang Xue-Gang Luo Yong Jiang Tong-Cun Zhang 《Journal of Biomedical Science and Engineering》 2009年第8期651-655,共5页
Bone marrow mesenchymal stem cells (MSCs) can differentiate into smooth muscle cells (SMCs) and have tremendous potential for cell therapy and tissue engineering. In this study, to understand the effects of TGF-β3 on... Bone marrow mesenchymal stem cells (MSCs) can differentiate into smooth muscle cells (SMCs) and have tremendous potential for cell therapy and tissue engineering. In this study, to understand the effects of TGF-β3 on rat bone marrow-derived MSCs and the underlying molecular mechanism of this differentiation process, we investigated that the changes of myocardin-related transcription factors (MRTFs) at the transcriptional level after rat MSCs were treated with TGF-β3. The results showed that TGF-β3 increased the expression of contractile genes, such as SM22, smooth muscle-myosin heavy chain (SM- MHC), SM-α-actin in MSCs. When TGF-β3 induced MSCs differentiation into SMCs, myocardin and MRTF-A were activated. The data indicated that TGF-β3 induced rat bone marrow-derived MSCs differentiation into SMCs by activating mypcardin and MRTF-A. 展开更多
关键词 MESENCHYMAL Stem CELLS SMOOTH Muscle CELLS TGF-β mrtfs
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Myocardin-Related Transcription Factor A Mediates OxLDL-Induced Endothelial Injury 被引量:12
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作者 Fang, Fei Yang, Yuyu +4 位作者 Yuan, Zhibin Gao, Yuqi Zhou, Jiliang Chen, Qi Xu, Yong 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期842-842,共1页
关键词 动脉粥样硬化 内皮损伤 低密度脂蛋白 细胞反应
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