分离胶促凝管联合MALDI-TOF MS快速检测血培养阳性瓶中细菌的探讨

目的建立一种使用分离胶促凝管联合基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)的方法直接检测血培养中阳性菌的方法。方法收集阳性血培养标本318例,利用分离胶促凝管直接从血培养瓶中富集并提纯菌体,采用MALDI-TOF MS对革兰阴性菌进行菌种鉴定,同时分离纯菌落用Phoenix-100全自动微生物分析系统进行鉴定。结果 292例单菌株感染血培养瓶中,两种方法对菌株的种、属鉴定符合率分别为82.4%和22.7%。在26例复合菌感染中,两种方法鉴定出其中一种细菌的种、属鉴定率分别为79.3%和10.3%。结论本研究建立了采用分离胶促凝管联合MALDI-TOF MS法直接检测血培养中阳性菌的方法,与传统的培养鉴定方法相比,对血流感染具有更高灵敏度,适合在临床微生物实验室中推广应用。

ICP-MS测定龟甲胶和鹿角胶中Ca、Mg、Fe、Zn等8种微量元素的含量

目的建立电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)检测龟甲胶和鹿角胶中Ca、Mg、Fe、Zn等八种微量元素含量的方法,为龟甲胶、鹿角胶质量评价提供参考。方法龟甲胶、鹿角胶样品经微波消解后采用ICP-MS定量检测龟甲胶和鹿角胶中Ca、Mg、Fe、Zn、Mn、Cu、Sr、Se八种微量元素。结果8种元素加标回收率(n=6)为88.89%～105.31%,检测限较低,RSD均小于6.0%。该法快速、准确,可用于龟甲胶和鹿角胶中Ca、Mg等微量元素的含量测定。结论龟甲胶的Zn/Cu比值小于鹿角胶,鹿角胶的钙元素含量高于龟甲胶,龟甲胶的Mg元素含量明显高于鹿角胶,与鹿角胶长于补阳虚、益精养血止血,龟甲胶长于滋阴、养血的中医功效理论相一致。因此,龟甲胶和鹿角胶中Ca、Mg、Fe、Zn等微量元素的含量对其质量有一定的影响作用。

UPLC-MS/MS法快速测定鳖甲胶中4种主要氨基酸的含量

目的:用UPLC-MS/MS法建立鳖甲胶中羟脯氨酸、甘氨酸、丙氨酸、脯氨酸4种氨基酸的液质联用快速测定新方法。方法:样品以6 mol·L^(-1)盐酸于150℃水解1 h后,采用Shim-pack C_(18)色谱柱(2.1 mm×100 mm,2μm),以0.1%甲酸水:乙腈(95∶5,V/V)为流动相,流速0.2 mL·min^(-1),柱温40℃,采用电喷雾离子源(ESI)正离子模式,选择反应监测(MRM)进行检测。结果:羟脯氨酸、甘氨酸、丙氨酸和脯氨酸在一定质量浓度范围内线性关系良好(r>0.9983);平均加样回收率(n=6)为96.17%~98.11%。不同厂家鳖甲胶中4种氨基酸的含量差异较大,最低19.90%,最高37.57%。结论:本法经方法学验证,可用于鳖甲胶中羟脯氨酸、甘氨酸、丙氨酸和脯氨酸的测定。

基于超高效液相色谱串联质谱法特征肽检测技术的阿胶鉴别与6种动物异源性成分检查

目的 建立同时检测阿胶中马、牛、猪、骆驼、羊、鹿6种动物皮异源性成分的超高效液相色谱串联质谱(UPLC-MS/MS)法。方法 阿胶粉末加1%碳酸氢铵溶液超声溶解,滤过,采用胰蛋白酶酶解15 h。采用UPLC-MS/MS法,以阿胶特征肽段质荷比(m/z)539.8→924.3和驴源特征肽m/z 570.5→698.1、马源寡肽A m/z 386.4→377.3、牛皮特征肽A m/z 641.2→726.3、猪皮特征肽m/z 774.5→1 035.7、骆驼皮特征肽m/z 603.8→281.8、羊皮特征肽m/z 553.0→450.8、鹿皮特征肽m/z 733.1→962.5作为检测离子对,电喷雾电离(ESI)离子源、正离子模式进行多反应监测(MRM),对10批药用阿胶、6批食品级阿胶样品进行质量评价。结果 所选各动物源特征肽段均只在对应动物皮胶中检出,方法专属性强;方法灵敏度符合质量控制要求;酶解重复性、进样精密度及样品稳定性均满足方法学验证要求,结果的RSD均小于9.0%(n=6)。6批食用级阿胶样品中均未检出阿胶成分,判定主要成分为牛皮源、骆驼皮源、马皮源、猪皮源成分。8批药用阿胶检出阿胶成分,其中1批阿胶成分含量偏低,1批检出马皮源成分;2批药用阿胶未检出阿胶成分,判定为假冒产品。结论 所建立的6种动物皮胶检测方法的专属性强、灵敏度高,可用于阿胶鉴别及掺假杂皮胶的检测。

电感耦合等离子体质谱法测定烟用水基胶中硼酸

烟用水基胶样品采用硝酸（65＋35）和过氧化氢进行程序控制升温微波消解，用电感耦合等离子体质谱法测定样品溶液中硼酸的含量。采用B作为测量同位素来消除质谱干扰。方法的检出限（3S／N）为0．12tzg·L-1。方法用于烟用水基胶的分析。用标准加入法测得其回收率在102％～109％之间，测定值的相对标准偏差（n=6）小于5％。

龟甲胶中杂质成分驴皮源、牛皮源和重金属元素的含量分析研究

目的对不同公司五批次龟甲胶样品中的杂质性成分驴皮源、牛皮源和重金属含量进行检测分析。方法采用高效液相色谱-质谱联用法(Liquid chromatography-mass spectrometry,LC-MS)对龟甲胶中的牛皮源和驴皮源成分进行检测,原子吸收光谱法(Atomic Absorption Spectroscopy,AAS)对重金属汞、砷、铜、镉、铬、铅进行含量检测。结果湖南A公司的龟甲胶样品中牛皮源和驴皮源的检测结果均为阴性,其他3家公司含有驴皮源或牛皮源成分。用原子吸收法测定各公司龟甲胶样品中重金属的含量,根据进出口绿色行业标准,本实验中的结果显示各样品龟甲胶中的重金属含量均在合格范围内,未见明显超标产品。结论本文的检测方法简便、专属性强,检测得湖南A公司的龟甲胶不含驴皮源和牛皮源成分,且重金属含量均在要求范围内,表明龟甲胶产品较为优质可靠。

基于液质联用法同时检测龟甲胶饮片中牛皮源、驴皮源及龟甲胶成分

目的:建立龟甲胶饮片中牛皮源、驴皮源及龟甲胶成分同时检测方法。方法:采用胰蛋白酶对龟甲胶样品酶解处理,利用超高效液相色谱-串联质谱联用技术(UPLC-MS/MS)对样品中龟甲胶、黄明胶、阿胶的特征肽离子对进行检测。结果:龟甲胶、黄明胶、阿胶3种对照药材在所建方法下保留时间为3~8 min,无基质干扰,检测限分别为0.5,2.0,1.0 mg/L,且重复性好,用于18批市售龟甲胶饮片的检测分析。结论:所建方法专属性强、灵敏度高,实现了龟甲胶饮片中主成分鉴别与非法添加成分检查的同时检测,提高检验效率,可有效控制龟甲胶质量。

热裂解-气质联用技术分析资寿寺彩塑贴金

采用热裂解-气质联用技术对资寿寺彩塑贴金样品进行分析,通过和标准动物胶、干性油老化膜的特征峰对比,确定彩塑贴金样品中含有动物胶和干性油,由软脂酸和硬脂酸含量比确定该干性油为桐油.结合剖面显微分析确定彩塑贴金工艺过程中使用动物胶粘合剂粘贴金箔,贴金完成后又在金箔表面涂刷一层桐油以起到保护金箔的作用.这一研究为传统贴金工艺的科学解释提供了较有价值的参考.

超高效液相色谱-质谱联用法检测不同品种龟甲制龟甲胶的牛皮源成分

目的考察不同品种的龟甲原料对龟甲胶中牛皮源成分含量的影响。方法采用超高效液相色谱-质谱联用法(UPLC-MS),色谱柱为Zorbax C18柱(50 mm×2.1 mm,1.8μm),以0.1%甲酸水-0.1%甲酸乙腈为流动相梯度洗脱,流速为0.3 m L/min,柱温为40℃。分别以不同品种龟甲为原料熬制龟甲胶,并对其牛皮源的含量进行测定。结果纯草龟龟甲熬制的龟甲胶检测结果为牛皮源阴性,掺杂巴西龟龟甲的龟甲胶检测结果为牛皮源阳性。结论该方法简便,专属性强,灵敏度高,可有效控制龟甲胶质量。

山东青州香山西汉墓彩绘陶俑胶接材料研究

本文利用X射线荧光、红外光谱、热裂解气相色谱质谱(Py-GC-MS)和气相色谱质谱(GC-MS),对山东青州香山西汉墓出土彩绘陶俑紫色、红色和褐色彩绘层中使用的胶接材料,以及取自马腿与马身粘接处的胶接物进行了分析。分析结果显示彩绘颜料以及马腿粘接物中的有机物均为动物胶。此研究结果为同一时期此类陶质彩绘文物的胶接材料研究提供了很好的借鉴。

电感耦合等离子体质谱法测定桃胶中微量元素

通过硝酸-过氧化氢体系微波消解,采用电感耦合等离子体质谱法测定桃胶样品中的钛、钒、锰、铁、钴、镍、铜、锌、锗、硒、锶、钼、锡、锑、钡等15种微量元素,以钪、铟为内标物进行校正,消除基体的干扰,通过对2种国家标准物质的测定,结果表明试验测定值与标准值吻合。

超高效液相色谱-三重四级杆质谱法检测乌鸡白凤丸中鹿角胶特征肽及牛皮源成分

目的:建立含胶类中药乌鸡白凤丸中鹿角胶特征肽及可能掺杂的牛皮源成分的专属性检查方法。方法:利用胰蛋白酶对乌鸡白凤丸中所含的胶类特征肽进行酶解,采用超高效液相色谱-三重四级杆质谱,选择鹿角胶特征分子离子峰m/z 765.4(双电荷)→554.0、733.0及牛皮源特征分子离子峰m/z 641.3(双电荷)→726.2、783.3作为检测离子对,ESI+离子化模式,进行多反应监测模式检测。结果:5批乌鸡白凤丸样品均检出了鹿角胶的特征肽段,且均未检出牛皮源成分。结论:该检测方法专属性强、准确、可靠,可用于乌鸡白凤丸中鹿角胶特征肽及牛皮源成分的检测。

高效液相色谱串联质谱法检测阿胶枣中的阿胶成分

建立阿胶枣中阿胶成分的检测方法。采用胰蛋白酶对阿胶枣中阿胶中的蛋白进行酶解,利用高效液相色谱串联质谱对阿胶的特征肽段进行检测,选择电喷雾正离子(ESI^+)MRM模式对阿胶的特征肽段离子m/z539.8(双电荷)→612.4和m/z539.8(双电荷)→923.8进行检测。该方法可用于阿胶枣中阿胶的检测,最低可检出浓度为含2%阿胶的阿胶枣样品。

鞋用胶中正己烷及其异构体的气相色谱-质谱法检测

以十一烷为内标物，利用GC—MS（气相色谱-质谱联用仪）建立了鞋用胶中正己烷及其异构体含量的测定方法。研究结果表明：各标准样品在4-320μg／mL范围内呈良好的线性关系，其线性相关系数〉0．9990，平均加标回收率为90．65％～102．21％，相对标准偏差（RSD）为0．91％-3．92％；该方法具有重现性好、灵敏度高等优点，在部分市售鞋用胶中进行验证试验时，所得结果令人满意。

微波消解—电感耦合等离子体质谱法测定阿胶中14种元素含量

目的：建立微波消解一电感耦合等离子体质谱法（ICP—MS）测定阿胶中14种元素。方法：样品采用硝酸作为消解液微波消解，以ICP—MS专用级纯水定容，采用电感耦合等离子体质谱法测定阿胶中的K、Ca、Mg3种常量元素，Fe、Zn、Mn、Ba、Sr5种微量元素及cr、As、Cd、Pb、Cu、Hg6种重金属元素。结果：电感耦合等离子体质谱法测定阿胶中的14种元素的相对标准偏差（RSD）均在2．O％～5．0％，定量分析呈良好的线性关系，相关系数均I〉0．9998，加标回收率为90．0％～117．1％。结论：该方法具有快速、简便、精密度好、准确度高、灵敏度高、所用试剂少等优点，各项指标均满足检测的要求，适合阿胶中各种微量元素的检测。

超高效液相色谱-质谱法同时检测龟鹿补肾丸中龟甲胶、鹿角胶成分

建立检测龟鹿补肾丸中龟甲胶、鹿角胶成分的超高效液相色谱-质谱方法。恒温酶解样品中的胶类特征性肽段,采用超高效液相色谱-质谱识别技术分别对龟甲胶和鹿角胶进行鉴别,ESI+电离模式进行多响应监测。结果表明,本方法重复性好,精密度和稳定性考察RSD均小于6.0%,龟甲胶及鹿角胶检出限分别为0.02 mg/mL和0.01 mg/mL。用建立的检测方法测定6批次龟鹿补肾丸样品,均检测出了龟甲胶及鹿角胶特征性成分。说明该方法简便准确,灵敏度高,适用性强,可为龟鹿补肾丸中胶类成分的质量管控提供依据。

UPLC-QTOF-MS结合主成分分析法用于龟甲胶、鹿角胶中添加牛皮源成分的检测研究

目的:建立龟甲胶、鹿角胶中非法掺入牛皮源成分的检测方法。方法:采用胰蛋白酶对龟甲胶、鹿角胶、牛皮源成分进行酶解,利用超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱(UPLC-QTOF-MS)进行测定,采用Markerlynx软件对3种胶类的液质数据进行主成分分析,找出鉴别牛皮源成分的专属性特征肽段,并对特征肽的序列进行确认。结果:对19批样品进行检测发现,其中8批龟甲胶及8批鹿角胶中可检出牛皮源成分的特征肽段。结论:所建立的方法经验证,专属性较强,可用于龟甲胶、鹿角胶中非法掺入牛皮源成分的检测。

微波消解-ICP-MS测定黄明胶中6种有害元素

目的建立用微波消解-电感耦合等离子体质谱法测定黄明胶中铅、镉、砷、汞、铜、铬6种有害元素含量的方法。方法微波消解法处理黄明胶样品,用电感耦合等离子体质谱法同时测定样品中6种元素的含量。结果 6种元素线性关系良好（r≥0.999 0）;检出限为0.010-0.067μg·L^-1;加样回收率为92.6%-110.9%,RSD〈10%。结论该方法准确、灵敏、简便,可用于黄明胶中有害元素的含量测定。

UHPLC-MS/MS同时测定鳖甲煎丸中鳖甲胶和阿胶的特征肽含量

目的 建立同时测定鳖甲煎丸中鳖甲胶和阿胶特征肽含量的分析方法,为鳖甲煎丸的质量控制提供技术支持。方法采用胰蛋白酶对鳖甲煎丸提取溶液进行酶解,利用超高效液相色谱-串联质谱法(UHPLC-MS/MS),在电喷雾电离(ESI)正离子模式下采用多反应监测(multiple reaction monitoring,MRM),用外标法对鳖甲胶和阿胶的特征多肽进行含量测定。结果 方法学研究表明,该方法具有较好的专属性、精密度、稳定性、重复性。鳖甲特征肽A、驴源多肽A1、驴源多肽A2在线性范围内线性关系良好,相关系数均>0.999。3种特征多肽的平均回收率为97.08%~105.10%。结论 所建立的方法可用于鳖甲煎丸中鳖甲胶和阿胶的质量控制。鳖甲煎丸中鳖甲胶、阿胶的特征多肽含量低于拟定限度,应引起有关单位的重视。

Analysis of proteinaceous binding media used in Tang Dynasty polychrome pottery by MALDI-TOF-MS

The proteinaceous binding media used in Tang Dynasty polychrome pottery was determined using matrix-assisted laser desorption/ionization time of flight mass spectrometry (MALDI-TOF-MS). The optimum conditions for the extraction and subsequent enzymatic hydrolysis of the protein sample were established, and applied to the pretreatment of model and historical samples. Complexation of EDTA in combination with dialysis was determined to be the most effective method for eliminating interferences in polychrome layers taken from historical samples. Model samples were aged by burial in loess so as to more closely replicate the ageing process of the historical samples. Using the aforementioned optimized conditions, the "peptide mass fingerprint" of the binding media of historical and model samples was determined by MALDI-TOF-MS. Comparisons between the "peptide mass fingerprint" obtained for the historical sample and those of the model samples proved that animal glue was used as the binding media for the Tang Dynasty polychrome pottery. It also shows that animal glue used as binding media enjoys a long history in China.