关于在MALDI-TOF MS技术背景下提高临床微生物检验实习教学能力的探讨

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(Matrix Assisted Laser Desorption Ionization Time of Flight Mass Spectrometry,MALDI-TOF MS)技术是临床微生物诊断中的一项革命性创新技术,给临床微生物诊断带来了极大的便利,同时也给临床微生物实习带教带来了新的挑战。本文阐述了MALDI-TOF MS技术在临床微生物检验实习带教中的应用探讨,旨在充分运用MALDI-TOF MS技术结合传统鉴定技术,提高临床微生物检验实习的教学能力。

基于LC-MS/MS技术的武平紫灵芝子实体化学成分分析

采用药典规定方法、测定试剂盒及LC-MS/MS方法对武平紫灵芝各类化学成分的组成及含量进行分析,结果表明:与同样来源赤灵芝相比,紫灵芝的灵芝多糖、总黄酮和总氨基酸含量更高,三萜酸含量较低。两者的化学组成成分相似,其主要三萜为灵芝酸B和灵芝酸C,灵芝酸A含量显著低于赤灵芝(P<0.05);多糖主要由葡萄糖、半乳糖、甘露糖、阿拉伯糖和岩藻糖组成,其中甘露糖、阿拉伯糖含量显著高于赤灵芝(P<0.05)。黄酮类中含有柚皮素、黄豆黄苷、山奈酚、表儿茶素、甘草素等成分,其中柚皮素和表儿茶素L含量显著高于赤灵芝(P<0.05)。氨基酸含量组成无显著差异(P>0.05)。LC-MS/MS分析表明,与同样来源赤灵芝相比,紫灵芝三萜类含量增加最多的是2,2'-脱水尿苷和刺囊酸,降低最多的是灵芝酸A;糖类增加最多的是阿拉伯糖,降低最多的是岩藻糖;黄酮类增加最多的是柚皮苷,降低最多的是山奈酚;氨基酸增加最多的是丙氨酸,未有差异2倍以上含量降低的氨基酸。

MALDI-TOF MS技术在微生物检验中的应用效果

目的探讨MALDI-TOF MS技术在微生物检验中的应用效果。方法选取2021年7月至2022年7月进行检验的540例血培养阳性样本为研究对象,每份样本分为2份,1份540例直接应用MALDI-TOF MS技术实施微生物检验,另1份540例进行标本接种后细菌鉴定,前者设为微生物检验组,后者设为细菌鉴定组,比较两组病原菌检出情况与感染检出情况。结果540份样本共分离出540株病原菌,革兰阳性菌分布如下,凝固酶阴性葡萄球菌有183例,金黄色葡萄球菌有37例,肠球菌有36例,链球菌有32例,革兰阳性杆菌9例,其他17例;革兰阴性菌分布如下,肠杆菌科细菌160株,革兰阴性非发酵菌44株,其他8株;酵母样真菌分布如下,白念9株,其他5株。细菌鉴定组的革兰阳性菌、革兰阴性菌、酵母样真菌检出率高于微生物检验组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论在微生物检验中应用MALDI-TOF MS技术可检出病原菌与感染性疾病,但检出价值低于细菌鉴定,如有必要可联合应用细菌鉴定,进一步明确患者的病原菌类型。

MS/MS技术快速发现和分析繁缕中的黄酮碳苷成分

目的 :快速发现和分析繁缕中的黄酮碳苷类成分 ,为今后的活性成分研究提供依据 ;同时 ,探讨天然活性成分研究的思路与方法。方法 :采用植化中的粗分离方法处理药材 ,进而以制备TLC与电喷雾串联质谱 (MS/MS)技术离线连接 ,获得目标成分并进行结构分析。结果 :从繁缕中分离得到并鉴定了三个黄酮碳苷类化合物。化合物I为 6 ,8 二葡萄糖基芹菜素 ;化合物II的苷元为芹菜素 ,苷元分别以碳苷键与两个糖连接 ,一个为五碳糖 ,一个为六碳糖 ;化合物III的苷元也是芹菜素 ,分别以碳苷键与两个糖连接 ,一个为五碳糖 ,一个为六碳糖 ,但六碳糖在A环上 ,五碳糖在B环上。在繁缕中 ,尚无这种黄酮碳苷的研究报道。结论 :制备TLC与串联质谱技术离线连接 ,可以较为快速地发现和分析天然活性成分。在苷类化合物的ESI MS/MS中 ,如果不首先出现脱糖基的碎片峰 ,而是有规律地产生脱去 6 0 ,90 ,1 2 0质量单位的碎片峰 ,就基本可以判断为六碳糖的碳苷类化合物。如果是五碳糖 ,则只能产生脱去 6 0 ,90质量单位的碎片峰 ,不产生脱1 2 0质量单位的碎片峰。

天然药物成分分析2D-LC/MS技术平台的初步建立

目的:建立二维液相色谱/质谱法分析天然药物的技术平台。方法:以苦参生物碱为例,采用强酸性阳离子交换柱作预分离柱,柱后流动相修饰,使生物碱在富集柱上浓集,然后切换至分析柱系统,以反相柱,碱性流动相分离生物碱,用光二极管阵列检测器和质谱检测。从猪脑中提取的神经节苷脂,以氨基柱作预分离柱,反相色谱系统进行分离分析。结果:从苦参碱中检出了氧化苦参碱等5个生物碱;从神经节苷脂中检测出了单唾液酸神经节苷脂等5个成分。结论:已建立的分离分析系统高效、快速、自动化,可用于天然药物复杂体系的分离分析。

应用LC-MS技术检测降糖保健品中非法添加的格列美脲

目的建立检测制剂中非法掺入的西药降糖成分的专属性方法。采用液相色谱-质谱联用法。方法选用VenusilMP C18柱,以0.02mol/L醋酸铵(含0.1%冰醋酸)-乙腈(45:55)为流动相,对非法制剂的提取液进行液相色谱-质谱联用分析。通过与对照品的色谱、紫外及质谱行为相比较,对非法此类药进行定量测定和定性鉴别。结果在生命糖安胶囊中检出格列美脲,且回收率为98.51%(n=6)。结论该方法选择性强,灵敏度高,可作为分析检测此类保健品制剂中的西药降糖成分。

SELDI-TOF-MS技术的改善和优化

表面增强激光解吸电离飞行时间质谱(Surface-enhanced laser desorption/ionization-time of flight,SELDI-TOF-MS)技术是目前蛋白质组学研究较为有效的手段之一,已被广泛的应用于肿瘤、传染性疾病、心血管病和神经系统等疾病的研究.然而SELDI-TOF-MS技术本身存在着一些问题,如分析结果有效性差和实验重复验证率低等,使其不能完全的应用于常规的临床诊断,现有许多研究致力于解决这些问题,如规范化实验室操作、预处理原始标本和数据、提高统计学方法等极大的改善和优化了这项技术.

LC-MS技术及其在炸药检测方面的应用

简述了液相色谱-质谱(LC-MS)联用技术的特点及发展,以及电喷雾电离(ESI)、大气压化学电离(APCI)两种最常用LC-MS接口的特点。重点介绍了LC-MS用于不同炸药检测的最新进展。LC-MS可以很好地应用于爆炸后土壤植物残体等复杂介质中的炸药分析。尽管大多数炸药的蒸汽压较低,但具有热不稳定性,在传统的气相色谱进样口高温下易发生分解。而LC-MS技术恰恰非常适合分析相对强极性和热不稳定的化合物。

ICP-MS技术在稀土元素测定中的应用

介绍了ICP-MS法的原理,以及在稀土元素测定中的应用,并就基体对待测稀土杂质元素的影响进行了阐述。

LC/MS/MS技术在药代动力学研究中的应用

介绍LC/MS/MS技术(liquid chromatography tandem mass spectrometry,液相色谱-质谱-质谱联用技术)在药代动力学研究中的应用进展.以国内外大量有代表性的论文为依据,进行分析、归纳和整理.结果表明,该项技术是一种快速灵敏的定量分析生物样品中微量药物及其代谢产物的有效方法,已成为药代动力学研究及新药开发的重要工具.在高通量测定生物样品、药代动力学研究等方面发挥着不可替代的作用.

MALDI-TOF MS技术在食品微生物领域的应用研究

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(Matrix-Assisted Laser Desorption Ionization Time of Flight Mass Spectrometry,MALDI-TOF MS)技术在食品、医药、化学等领域得到了广泛的应用.综述了MALDI-TOF MS技术的检测原理及特点,以及其在食品微生物鉴定、分型、溯源分析中的应用.MALDI-TOF MS技术在微生物检验检测上具有快速、准确、高效等优点,随着样本处理方式标准化、数据库的完善化、生物信息学工具使用化等问题的解决,这一技术将成为微生物检测鉴定领域的重要辅助工具.

基于UPLC-MS/MS技术的代谢组学方法研究铝胁迫下花生的根系代谢

为有效降低铝毒害,探讨铝胁迫下花生幼苗根系代谢变化,以花育23(H,铝敏感型)和粤油7号(Y,耐铝型)两个花生品种为材料,基于超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)的广泛靶向代谢组学,研究铝胁迫对花生根系的影响。结果发现,从两个花生品种的幼苗根系中检测出416种代谢产物,与对照(HC)相比,花育23(HA)共筛选出155个差异代谢物(即HC vs HA),其中上调代谢物为27种,下调为128种;粤油7号(即YC vs YA)共筛选出109个差异代谢物,其中上调代谢物为28种,下调为81种。铝胁迫下两个花生品种幼苗根系之间(即HA与YA之间)筛选出145个差异代谢物,其中上调代谢物为76种,下调为69种。代谢物主要集中在酚酸类、黄酮、有机酸、木脂素和香豆素、氨基酸及其衍生物和核苷酸及其衍生物等。KEGG代谢通路富集分析显示,这些差异代谢物主要富集在异黄酮生物合成代谢通路上。铝胁迫下,花生幼苗根系代谢物发生的明显改变,可为花生生产有效降低铝毒害提供依据。

MALDI-TOF MS技术在粮油与食品微生物快速鉴定领域的应用展望

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(Matrix-assisted laser desorption ionization time of fight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)技术,已在化工、医药、食品等领域得到广泛应用。其作为一种快速鉴定微生物的重要工具,高效、准确且结果可重复,且粮油与食品中的微生物种类繁多,数量差别大,分型复杂,故对其快速鉴定的要求高。因此,通过不断开发相关试剂盒、拓宽检测方法通用性及丰富数据库等手段,使得MALDI-TOF MS技术将在粮油与食品微生物快速鉴定领域有着更为广泛的应用空间。

应用SELDI-TOF-MS技术筛选结肠癌术后原位复发患者的血清诊断标志物

目的寻找结肠癌术后原位复发患者的特异性生物标志物。方法采用SELDI-TOF-MS技术(表面增强激光解析电离飞行时间质谱)对比分析30例结肠癌术后原位复发患者和30例结肠癌术后无复发患者的血清蛋白质谱,用Biomarker Wizard软件分析获得的蛋白质谱。结果结肠癌术后原位复发组与结肠癌术后无复发组有9个蛋白峰差异有统计学意义(P<0.05),其中有2个蛋白峰(7 731.3 D和8 266.5 D)差异有统计学意义(P<0.01),这2个蛋白峰在结肠癌术后原位复发患者中高表达,在结肠癌术后无复发患者中低表达。结论这2个蛋白峰有可能成为预测结肠癌术后原位复发患者的特异性生物蛋白标志物。

基于MALDI-TOF MS技术对面膜中污染日勾维多细菌源菌的鉴定分析

对149批面膜产品进行微生物检验,其中4批菌落总数不符合规定。对不合格样品中分离纯化的菌落用MALDITOF MS、16S rDNA测序比对、VITEK 2生化试验3种方法进行鉴定,结果均为日勾维多细菌源菌(Pluralibacter gergoviae);检出菌与日勾维多细菌源菌标准菌株CICC 24132和一株食品中检出的日勾维多细菌源菌共6株菌在MALDI Biotyper 3及VITEK 2生化反应基础上进行分析分型,经MALDI Biotyper 3对6株菌的蛋白图谱进行聚类分析,来源于面膜中的4株菌亲缘关系比较近;经对比VITEK 2生化试验发现,6株日勾维多细菌源菌生化反应存在差异,其中来源于同一生产厂家的3批面膜检出菌生化反应基本相同。结果表明,MALDI-TOF MS快速鉴定结果可信;经MALDI Biotyper 3聚类分析及生化反应的结果分析,可将4株面膜中分离的日勾维多细菌源菌分成两个亚型,从同一厂家3批不合格样品中检出的污染菌具有高度同源性。

探索MALDI-TOF MS技术及其在食品微生物检测方面的应用

MALDI-TOF MS技术是一种新型工具,可以使用该工具来检测生物大分子,具有较多优势,如准确性较高、通量较高、所需成本较低等。然而,在食品微生物检测方面,该技术仍存在一定的不足。基于此,本文对MALDI-TOF MS技术进行了分析,对MALDI-TOF MS技术在食品微生物检测方面的应用进行了探讨,希望能帮助到相关人士。

基于UHPLC-Q-Exactive Orbitrap MS技术的异绿原酸A大鼠体内代谢产物鉴定

为了解异绿原酸A在大鼠体内的代谢情况,对大鼠经灌胃给予异绿原酸A后粪便、尿液、血浆中的代谢产物进行鉴定。按20 mg/kg的剂量灌胃给予大鼠异绿原酸A,收集给药后不同时间点的粪便、尿液、血浆样品,经处理后采用UHPLC-Q-Exactive Orbitrap MS技术对样品进行分析。根据分析得到的化合物相对保留时间、质荷比、特征碎片离子以及相关文献报道,从大鼠粪便、尿液、血浆中共鉴定出包括异绿原酸A原形成分在内的10个成分,其中粪便中4个,尿液中6个。其代谢途径主要为氢化、甲基化、葡萄糖醛酸化、硫酸化等。本实验确证了异绿原酸A在大鼠体内的代谢产物,从而明确其药效物质基础,同时为异绿原酸A进一步研发提供实验依据。

LC-MS/MS技术在食品质量与安全研究中的应用

食品的质量和安全与人们的身体健康具有极大的联系,对食品质量和安全实行准确分析意义重大,所以,与此相关的检测技术是国内外高度重视的研究课题。食品中的有害含量较少在痕量分析极为困难,对于检测方式的准确性具有极大的要求。近几年来,LC-MS/MS技术得到了迅速推广,并且拥有分辨率高、扫描质量范围广、速度快以及灵敏度高等特点。在分离分析领域中获得了全面使用,特别是对于食品质量和安全的研究具有重要的影响。

基于UPLC定量指纹图谱与UPLC-QE-Plus-MS/MS技术的吴茱萸(石虎)标准汤剂量值传递研究

目的借助UPLC定量指纹图谱与UPLC-QE-Plus-MS/MS技术,研究吴茱萸Euodiae Fructus[石虎Euodia rutaecarpa(Juss.)Benth.var.officinalis(Dode)Huang]标准汤剂的量值传递规律。方法通过对18批吴茱萸(石虎)样品进行检测,获得吴茱萸(石虎)饮片和标准汤剂的对照指纹图谱,并采用UPLC-QE-Plus-MS/MS技术,对标定的吴茱萸(石虎)共有峰进行鉴定。通过峰个数传递、相似度比较、有效成分含量转移率、出膏率测定等,对吴茱萸(石虎)标准汤剂的量值传递规律进行研究。结果在饮片与标准汤剂中共标定25个对照指纹图谱共有峰,包括5个生物碱类化合物(去氢吴茱萸碱、evodiaxinine、吴茱萸酰胺、吴茱萸碱、吴茱萸次碱)、12个有机酸类化合物(咖啡酰葡萄糖酸及其同分异构体、阿魏酰葡萄糖酸及其同分异构体、绿原酸、新绿原酸、隐绿原酸、阿魏酰奎宁酸等)、7个黄酮类化合物(香树素-7-O-β-D-葡萄糖苷、芦丁、金丝桃苷、柠檬黄素-3-O-芸香糖苷、柯伊利素-7-O-芸香糖苷、水仙苷、异鼠李素-3-O-β-D-葡萄糖苷)、1个柠檬苦素类化合物(柠檬苦素)。经测定饮片中25个共有峰均传递到标准汤剂中,共有峰传递率为100%。以每批次吴茱萸(石虎)饮片的指纹图谱为对照,对应批次标准汤剂的指纹图谱相似度均大于0.9。以有效成分柠檬苦素、吴茱萸碱、吴茱萸次碱为指标,吴茱萸(石虎)标准汤剂中指标成分的转移率均在其均值±30%范围内。18批标准汤剂的出膏率也在其均值±30%范围内。结论制备过程量值传递情况稳定,制备工艺可行,可为吴茱萸(石虎)配方颗粒的质量标准研究提供依据。