HPLC-MS-MS法测定人血清中氟西汀、文拉法辛及其代谢产物与应用

建立可同时快速测定人血清中氟西汀(Fluoxetine, FXT)、文拉法辛(Venlafaxine, VEN)及其活性代谢产物N-去甲氟西汀(Norfluoxetine,N-FXT)、O-去甲文拉法辛(O-Desmethylvenlafaxine,O-VEN)浓度的方法,并应用于临床,监测相关药物在人体中的代谢情况。临床样本,以甲醇-甲酸混合溶剂作蛋白沉淀剂,处理后,离心后取上清,进样高效液相色谱-串联质谱系统(HPLC-MS/MS),使用Phenomenex Kinetex Biphenyl色谱柱(2.1 mm×50 mm, 2.6μm),流动相为含0.1%甲酸和1 mmol/L甲酸铵的水和甲醇,流速0.4 mL·min^(-1),柱温45℃,进样量5μL,采用电喷雾正离子多反应监测模式检测。检测方法特异性和选择性较好,血药质量浓度分别在10~1 000,32~3 200,18~1 800,18~1 800 ng/mL范围内线性良好,回收率在85%~115%之间,批内批间精密度RSD均小于15%,临床样本在室温放置24 h、反复冻融、长期冻存保存下,检测准确度在85%~115%之间,相对基质效应均在20%以内,临床检测患者血药浓度,VEN加O-VEN,结果平均(263.89±176.67) ng/mL;FXT加N-FXT结果平均(139.12±121.3) ng/mL。方法样品用量少,处理简便,准确度高,特异性强,稳定性好,适用于同时快速测定人血清中FXT、VEN及其活性代谢产物的浓度,为精准个性化用药提供可靠的方法学支持。

UPLC-MS-MS法同时测定饮用水中乙酰甲胺磷、稻瘟灵、敌百虫、甲霜灵

为推进新生活饮用水卫生标准的实施,建立了同时测定水中乙酰甲胺磷、稻瘟灵、敌百虫以及甲霜灵4种农药的直接进样超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS-MS)方法。水样过膜后采用C18色谱柱分离,以0.1%甲酸水溶液-甲醇为流动相进行梯度洗脱,采用多反应监测模式进行定性分析,采用外标法进行定量分析。结果表明,该方法线性范围为5~100μg/L,4种农药在出厂水、水源水、龙头水中的平均回收率为91.1%~114.1%,相对标准偏差(RSD)为4.1%~13.1%;乙酰甲胺磷、稻瘟灵、敌百虫、甲霜灵检出限分别为1.78、1.66、1.62、1.86μg/L,能满足实际的水质检测的需求。利用此方法对北京市有代表性的水源水、出厂水及管网水进行了分析与普查工作,4种农药均未检出。该方法简便快速,有较好的精密度和准确度,为保障我国供水安全提供技术支撑。

酶解法与LC-MS-MS相结合研究灯盏乙素在健康人体内的药代动力学

目的：建立β-葡萄糖醛酸苷酶解法与LC-MS-MS法相结合测定人体血浆中灯盏乙素的苷元,研究健康男性单剂量口服灯盏花素分散片的药代动力学。方法血浆样品经β-葡萄糖醛酸苷酶水解,甲醇蛋白沉淀,色谱柱为Agilent ZOR BAX SB C18（2．1 mm×150 mm,5μm）,运用乙腈-甲醇-水洗脱,多反应监测（MRM）灯盏乙素苷元（[M - H]-,m/ z 285．0/136．8）和内标槲皮素（[ M - H]-, m/ z 301．1/120．8）。12名健康男性单剂量口服灯盏花素分散片120 mg 后,采用该方法测定血浆中灯盏乙素苷元,使用DAS 1.0软件处理数据,计算药代动力学参数。结果灯盏乙素苷元在4．01～513．38μg·L-1范围内线性良好,日内日间精密度小于7．22%,提取回收率大于84．23%。12名健康男性单剂量口服灯盏花素分散片120 mg 后,以灯盏乙素苷元为检测对象的主要药动学参数为：Cmax （μg·L^-1）：159．97±58．14； AUC（0-19）（μg·L^-1·h）：1151．37±279．80；AUC（0- ∞）（μg· L^-1·h）：1194．13±264．51；Tmax （h）：6．33±1．67；T1/2（h）：2．83±0．60。结论建立的酶解与LC-MS-MS 相结合分析方法准确灵敏,适用于灯盏乙素人体内的药代动力学研究。

基于UPLC-MS-MS技术快速测定花生中4种黄曲霉毒素

建立了花生中4种黄曲霉毒素的超高液相色谱-三重四极杆串联质谱(UPLC-MS-MS)检测的方法。样品经80%乙腈-水溶液振荡超声提取后,采用多功能净化柱净化。待测物经Kinetex SB-C18色谱柱分离,甲醇-0.1%甲酸溶液为流动相,梯度洗脱,三重四级杆串联质谱多反应离子监测(MRM)方式检测,外标法定量。结果表明:4种黄曲霉毒素在各自的线性响应范围内线性关系良好,相关系数均大于0.999,方法的检出限为0.014~0.025μg/kg,空白样品中加标回收率为72.25%~89.46%,RSD在4.01%~9.56%之间。该方法前处理简单快速、净化效果好、检出限低,适合花生中多种黄曲霉毒素的同时快速测定。

LC-MS-MS法评价2种苯磺酸氨氯地平片的生物等效性

目的建立LC-MS-MS法测定人血浆中苯磺酸氨氯地平的浓度,并进行2个制剂间的生物等效性评价。方法采用随机交叉、自身对照试验设计,18名健康志愿受试者口服苯磺酸氨氯地平片受试制剂和参比制剂各10mg,以HPLC-MS-MS法测定服药后120h内不同时间点的血药浓度,计算主要药物动力学参数,以方差分析法对主要参数进行均数的差别检验,以双单侧t检验进行生物等效性判定。结果受试者分别口服受试制剂和参比制剂后主要动力学参数AUC0～120,AUC0～∞,tmax,Cmax,t1/2分别为(194.68±52.97)g.h.L-1、(192.74±49.56)μg.h.L-1、(209.29±51.85)μg.h.L-1、(209.45±55.38)μg.h.L-1,(7.0±1.3)h和(7.0±1.0)h、(6.23±1.86)μg.L-1和(6.27±2.41)μg.L-1、(32.7±10.0)h和(32.6±4.5)h。受试制剂对参比制剂的相对生物利用度为(101.0%±9.6%)。结论受试制剂与参比制剂为生物等效制剂。

LC-MS-MS测定血浆中河豚毒素

河豚毒素(tetrodotoxin,TTX)是一种小分子非蛋白类海洋生物毒素,具有极好的镇痛作用,临床用于戒毒治疗.由于TTX药效强而毒性大(肌注:LD50=19μg/kg),给药剂量很小,注射液每次给药仅为30μg,因此对检测方法的要求很高[1].本文初步建立了测定人血浆中TTX的LC-MS-MS方法,最低检测浓度为1 ng/mL,灵敏度比文献报道的方法提高了10倍[2].……

GC-MS-MS测定蔬菜中八种有机磷农药

用GC-MS-MS同时测定蔬菜中的甲拌磷、二嗪农、甲基对硫磷、毒死蜱、倍硫磷、喹硫磷、杀扑磷和亚胺硫磷.对各个化合物的特征离子对、碰撞电压进行了优化,并阐述了优化反应监测模式(MRM)条件的过程和方法,同时分析了各个化合物的线性范围和最低检出限.将该方法用于蔬菜样品的检测,测得加标回收率在90.4%—105.0%之间,RSD在3.2%—9.3%之间.

HPLC-MS-MS测定人血浆中的甘草次酸及生物利用度

目的 建立人血浆中的甘草次酸的HPLC-MSMS测定法，研究复方甘草甜素制剂的相对生物利用度。方法 以雷尼替丁为内标，血浆样品液液萃取后，经BDS Hypersil C18柱分离，采用质谱检测器检测。18名健康男性志愿者采用随机交叉方式分别单次口服复方甘草甜素制剂A、B或C各75mg，在不同时间点取血，样品以新建立的HPLC-MS-MS法测定，研究比较3种制剂的药动学及相对生物利用度。结果 甘草次酸在浓度2．0～200．0μg·L^-1与峰面积比线性良好，最低定量浓度为2．0μg·L^-1。方法回收率为97．2％～108．0%，日内精密度（RSD）〈4．2％，日间精密度（RSD）〈8．9%.单剂量口服复方甘草甜素片A、B或胶囊C75mg后3种制剂的Cmax分别为（130．4±40．3）、（132．1±43．6）、（128．6±44．7）μg·L^-1；tmax分别为（3．5±0．5）、（3．3±0．5）、（3．4±0．5）h；AUC0-48分别为（2097．6±744．8）、（2037．0±894．9）、（2075．0±734．0）μg·h·L^-1；t1／2分别为（6．0±2．1）、（5．9±1．5）、（5．7±2．1）h。结论 该方法选择性好，灵敏度高，可用于甘草次酸的体内过程研究。药动学参数经方差分析表明A、B和C中甘草次酸的主要药动学参数之间均无显著差异，双单侧t检验结果表明3制剂为生物等效制剂。

LC-MS-MS法同时测定黄芪注射液和黄芪口服液中5种成分

目的建立LC-MS-MS法同时测定黄芪注射液和黄芪口服液中黄芪甲苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花黄素5种有效成分的含有量。方法黄芪注射液和黄芪口服液甲醇稀释液在Agilent ZORBAX SB C18（2.1 mm×150 mm,5μm）色谱柱上分离,流动相为甲醇-水（含0.1%甲酸,70∶30,V/V）;体积流量为300μL/min。MS采用电喷雾离子源,多反应监测方式进行正离子扫描。结果 5种成分在测定浓度范围内均具有良好的线性关系,在黄芪注射液和黄芪口服液中的平均回收率分别为96.8%-102.3%和95.9%-101.5%。结论本法测得结果准确、可靠、灵敏度高,可用于黄芪注射液和黄芪口服液的质量控制。

UPLC-MS-MS法同时测定颠茄片中2个有效成分的含量

目的 建立同时测定颠茄片中硫酸天仙子胺、东莨菪内酯含量的超高效液相色谱串联质谱(UPLC-MSMS)分析方法。方法 采用Waters Acquity UPLC HSS T3色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm),用0.1%甲酸水溶液-甲醇为流动相,进行梯度洗脱(0~1 min, 10%B;1~4 min, 10%B→90%B;4~6 min, 90%B;6~6.2 min,90%B→10%B;6.2~8 min, 10%B),流速为0.2 mL·min^(-1),柱温为40℃,进样量4μL;质谱采用电喷雾离子源,正负离子模式,多反应监测模式进行扫描。结果 硫酸天仙子胺、东莨菪内酯分别在193.6~968.0 ng·mL^(-1)(r=0.9996)、1.00~50.00 ng·mL^(-1)(r=0.9999)范围内呈良好线性关系;平均回收率(n=6)分别为94.3%,98.0%,RSD分别为1.18%,2.26%。结论 该方法简便、灵敏、准确、高效,可用于颠茄片的质量控制。

从中药繁缕中几个黄酮碳苷成分的分离和分析看LC-MS-MS技术的优势与不足

繁缕[Stellaria media(L)Cyr.]为石竹科植物繁缕的茎、叶,具有活血、去瘀、下乳、催生作用,主要含皂苷、黄酮、酚酸、氨基酸等成分[1～3].贵州民间作为降血脂药物应用,效果很好.文献调研表明,其活性成分可能为黄酮苷类化合物[4].……

LC-MS-MS法研究消糖灵分散片中格列本脲人体生物等效性

目的:建立人血浆中格列本脲的LC-MS-MS测定方法,研究中成药消糖灵分散片中格列本脲在男性健康志愿者体内的药代动力学行为,评价其生物利用度和生物等效性。方法:20名健康成年男性志愿者采用随机分组自身交叉对照试验设计,单剂量口服参比制剂格列本脲片1片(2.5 mg)或试验制剂消糖灵分散片4片(每片含格列本脲0.7 mg)后,用LC-MS-MS联用法测定血浆中药物浓度。结果:试验制剂和参比制剂的主要药代动力学参数:Tm ax分别为(3.8±1.0)和(3.3±0.9)h;Cm ax分别为(84.09±21.90)和(97.30±20.99)μg/L;AUC(0-36)分别为(577.99±150.92)和(530.76±98.25)μg/L.h;T1/2分别为(6.2±1.6)和(6.6±1.8)h。以AUC(0-36)计算的试验制剂的相对生物利用度为(94.94±13.6)%。结论:建立的分析方法准确灵敏,测得的数据可靠,统计学分析表明两种制剂生物等效。

基于UPLC-MS-MS检测白酒中辛硫磷含量及安全评估

建立了UPLC-MS-MS测定白酒中辛硫磷含量的测定方法。试样以ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱为分离柱,以甲醇和5m M乙酸铵水溶液作为流动相进行梯度洗脱,多反应（MRM）模式检测。结果表明,辛硫磷在10~200ng/m L范围内线性关系良好,线性相关系数（R2）为0.998。3个添加水平的回收率范围为98.50%~101.80%,相对标准偏差均控制在5%以内。方法简单快捷、准确可靠,可用于白酒产品质量安全控制和风险评估。

超高压液相色谱-串联质谱法(LC-MS-MS)测定鱼肉中磺胺类兽药残留的基质效应

采用提取后添加法从提取溶剂、净化方法、同位素内标、基质标曲等方面对超高压液相色谱-串联质谱法测定鱼肉中的磺胺类兽药残留进行基质效应的研究。结果表明:以乙腈为提取溶剂,经MCX固相萃取柱净化和液液萃取净化可以降低基质效应的影响,采用基质添加标准曲线和同位素内标可以对基质效应的影响进行补偿。

GC/Cl-MS-MS技术用于蔬菜中痕量甲胺磷、氧乐果和克百威的确认

近年来,甲胺磷、氧乐果、克百威等高毒药剂,因急性毒性问题,已被禁止在蔬菜和水果上使用[1].为确保人们的饮食安全,建立准确有效的残留分析方法势在必行.有机磷等农药在各种农作物样品中残留量很低,且样品中(如蔬菜、水果、茶叶等)的基质干扰较大,使得目标化合物易被基质掩盖.……

基于QuEChERS-UPLC-MS-MS技术测定人参中醚菌酯残留量的不确定度评估

采用QuEChERS-UPLC-MS-MS技术测定人参中醚菌酯残留量,分析测定过程中不确定度来源,建立不确定度分析的数学模型,依据影响测定结果的不确定度来源,对各个不确定度分量进行评定分析,以4μg/kg的添加水平,给出QuEChERS-UPLC-MS-MS技术测定人参中醚菌酯残留量的相对合成标准不确定度以及扩展不确定度。通过分析比较各个不确定度的分量,结果显示实验过程中曲线拟合带来的不确定度影响最大。

UPLC-MS-MS法快速测定大白菜和土壤中氰氟虫腙残留

建立大白菜和土壤中氰氟虫腙残留的超高效液相色谱-三重四极杆串联质谱（UPLC-MS-MS）快速检测的方法。样品用酸化乙腈提取、QuEChERS法净化,超高效液相色谱-串联质谱电喷雾正离子模式检测。结果表明,氰氟虫腙在5-500μg/L范围内浓度和响应峰面积线性关系良好,相关系数为0.999。在0.005、0.01、0.05、0.2和1.0 mg/kg添加浓度下,平均回收率87.2%-113.4%,相对标准偏差（RSD）为0.6%-9.3%（n=5）,氰氟虫腙在大白菜和土壤中的定量限（LQD）均为0.005 mg/kg。该方法适用于大白菜和土壤中氰氟虫腙的检测。

基于UPLC-ESI-MS-MS与FTIR技术的一清胶囊化学成分分析及体外抗炎活性

目的:采用超高效液相色谱-电喷雾离子化串联质谱联用(UPLC-ESI-MS-MS)及傅里叶变换红外光谱(FTIR)技术对一清胶囊化学成分进行分析,并初步探讨其体外抗炎活性。方法:采用ESI离子源,正离子扫描模式下采集数据,并对一级质谱、二级质谱信息进行分析;采用FTIR技术测定10批次一清胶囊光谱图,并进行主成分聚类分析,比较不同批号样品的差异;采用脂多糖(LPS)诱导的RAW 264.7小鼠巨噬细胞模型,观察一清胶囊对巨噬细胞释放NO的影响。结果:根据一级质谱、二级质谱信息及相关文献共推测了12个化合物;FTIR主成分聚类分析表明批号为120703的样品与其他批次样品存在明显差异;体外抗炎实验表明一清胶囊在1～100μmol/L范围内能显著降低细胞上清液中NO的含量,且呈一定的剂量依赖性。结论:UPLC-ESI-MS-MS与FTIR技术为一清胶囊的质量控制提供了快速、简便、有效的手段;一清胶囊具有一定的体外抗炎活性。

2-氨基-3-硝基吡啶和2-氨基-5-硝基吡啶的CI-MS-MS分析

2-氨基-3-硝基吡啶和2-氨基-5-硝基吡啶的EI-MS质谱图接近,单纯通过EI-MS质谱图较难区分这两种异构体,作者以甲烷为反应气对2-氨基-3-硝基吡啶和2-氨基-5-硝基吡啶进行化学电离,并利用离子阱质谱的串联质谱技术在离子阱内以He作碰撞气进行碰撞诱导裂解,所得的CI-MS-MS质谱图表明,两者之间存在明显的差别,可用于2-氨基-3-硝基吡啶和2-氨基-5-硝基吡啶的鉴别。

GC-MS-MS方法在快速检测食物中毒样品中克百威的应用

目的建立GC-MS-MS方法快速检测中毒样品中的克百威,及时应对突发性克百威中毒事件。方法液体或半固体样品加无水硫酸钠吸水后,加乙酸乙酯萃取;固体样品和血液样品直接加乙酸乙酯萃取;萃取液氮吹后,正己烷定容。使用串联四级杆EI离子源离子扫描,多反应监测(MRM)模式检测定性。结果共测定中毒样品13份,检出克百威的样品6份,分别为血液1份、呕吐物1份、馒头1份和洗胃液3份。结论该方法检测克百威结果定性准确,对血液、呕吐物、食物等均能检测快速,方法操作简单、易行,能够推广到食物中毒中其它农药组分的检测。