HPLC-MS-MS法测定人血清中氟西汀、文拉法辛及其代谢产物与应用

建立可同时快速测定人血清中氟西汀(Fluoxetine, FXT)、文拉法辛(Venlafaxine, VEN)及其活性代谢产物N-去甲氟西汀(Norfluoxetine,N-FXT)、O-去甲文拉法辛(O-Desmethylvenlafaxine,O-VEN)浓度的方法,并应用于临床,监测相关药物在人体中的代谢情况。临床样本,以甲醇-甲酸混合溶剂作蛋白沉淀剂,处理后,离心后取上清,进样高效液相色谱-串联质谱系统(HPLC-MS/MS),使用Phenomenex Kinetex Biphenyl色谱柱(2.1 mm×50 mm, 2.6μm),流动相为含0.1%甲酸和1 mmol/L甲酸铵的水和甲醇,流速0.4 mL·min^(-1),柱温45℃,进样量5μL,采用电喷雾正离子多反应监测模式检测。检测方法特异性和选择性较好,血药质量浓度分别在10~1 000,32~3 200,18~1 800,18~1 800 ng/mL范围内线性良好,回收率在85%~115%之间,批内批间精密度RSD均小于15%,临床样本在室温放置24 h、反复冻融、长期冻存保存下,检测准确度在85%~115%之间,相对基质效应均在20%以内,临床检测患者血药浓度,VEN加O-VEN,结果平均(263.89±176.67) ng/mL;FXT加N-FXT结果平均(139.12±121.3) ng/mL。方法样品用量少,处理简便,准确度高,特异性强,稳定性好,适用于同时快速测定人血清中FXT、VEN及其活性代谢产物的浓度,为精准个性化用药提供可靠的方法学支持。

UPLC-MS-MS法同时测定颠茄片中2个有效成分的含量

目的 建立同时测定颠茄片中硫酸天仙子胺、东莨菪内酯含量的超高效液相色谱串联质谱(UPLC-MSMS)分析方法。方法 采用Waters Acquity UPLC HSS T3色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm),用0.1%甲酸水溶液-甲醇为流动相,进行梯度洗脱(0~1 min, 10%B;1~4 min, 10%B→90%B;4~6 min, 90%B;6~6.2 min,90%B→10%B;6.2~8 min, 10%B),流速为0.2 mL·min^(-1),柱温为40℃,进样量4μL;质谱采用电喷雾离子源,正负离子模式,多反应监测模式进行扫描。结果 硫酸天仙子胺、东莨菪内酯分别在193.6~968.0 ng·mL^(-1)(r=0.9996)、1.00~50.00 ng·mL^(-1)(r=0.9999)范围内呈良好线性关系;平均回收率(n=6)分别为94.3%,98.0%,RSD分别为1.18%,2.26%。结论 该方法简便、灵敏、准确、高效,可用于颠茄片的质量控制。

UPLC-MS-MS法同时测定饮用水中乙酰甲胺磷、稻瘟灵、敌百虫、甲霜灵

为推进新生活饮用水卫生标准的实施,建立了同时测定水中乙酰甲胺磷、稻瘟灵、敌百虫以及甲霜灵4种农药的直接进样超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS-MS)方法。水样过膜后采用C18色谱柱分离,以0.1%甲酸水溶液-甲醇为流动相进行梯度洗脱,采用多反应监测模式进行定性分析,采用外标法进行定量分析。结果表明,该方法线性范围为5~100μg/L,4种农药在出厂水、水源水、龙头水中的平均回收率为91.1%~114.1%,相对标准偏差(RSD)为4.1%~13.1%;乙酰甲胺磷、稻瘟灵、敌百虫、甲霜灵检出限分别为1.78、1.66、1.62、1.86μg/L,能满足实际的水质检测的需求。利用此方法对北京市有代表性的水源水、出厂水及管网水进行了分析与普查工作,4种农药均未检出。该方法简便快速,有较好的精密度和准确度,为保障我国供水安全提供技术支撑。

用HPLC-MS-MS快速分析和鉴定三尖杉植物内生真菌发酵液中的Brefeldin A

采用HPLC -MS -MS联用技术 ,分析了C56和C65两株具有抗肿瘤活性的三尖杉植物内生真菌发酵液抽提物 ,首次报道了这两株真菌都能产生BrefeldinA(BFA)。采用ESI-MS总离子流跟踪分析HPLC的洗脱液 ,并用低能量的CID -MS -MS(碰撞诱导裂解方式 )进一步确定目标离子峰为BFA分子离子峰 。

LC-MS-MS测定烤鳗中4种氟喹诺酮药物残留量

应用LC -MS -MS技术 ,建立了快速准确测定烤鳗中4种常见的氟喹诺酮药物残留量的方法 ,样品经简单的溶剂提取后即可上机测定 ,在10～50μg/kg范围内添加回收率良好 ,检出限10μg/kg。本文还讨论了流动相以及质谱碰撞能对4种氟喹诺酮药物的质谱行为的影响 ,并借助准MS -MS

基质固相分散萃取-高效液相色谱串联质谱法(HPLC-MS-MS)同时测定茶叶中11种农药的残留量

建立了茶叶中3类11种农药的分散固相萃取-高效液相色谱串联质谱（HPLC-MS-MS）的检测方法。茶叶样品以乙腈-乙酸（体积比99∶1）提取,以PSA为净化剂基质固相分散萃取,然后通过C18色谱柱,以甲醇/水（含甲酸铵）溶液进行梯度洗脱,采用电离喷雾电离方式（ESI＋）,通过多反应监测（MRM）定量。结果表明：11种农药的分析时间约为20 min,在0～500 ng·mL-1范围内线性相关,相关系数大于0.9995,方法检测限为0.1～1.7μg·kg-1。测定了茶叶样品中11种农药的残留量,加标回收率为62.4%～114.8%（添加水平分别为10～400μg·kg-1）,相对标准偏差（RSD）为3.28%～19.34%。选取了5个不同类型的茶叶样品,检测其中11种农药的残留量,检出结果差异较大。其中绿茶中11种农药的检出量为1.7～339.4μg·kg-1,加标回收率为86.1%～104.1%,相对标准偏差（RSD）均小于20%（n=6）。本方法准确、灵敏、简单、快速、安全,能满足茶叶样品中多种农药残留分析的要求。

白酒和调香剂中4种人工合成甜味剂的UPLC-MS-MS测定

目的:建立白酒及调香剂中人工合成的非营养性甜味剂--甜蜜素、糖精钠、安赛蜜、阿斯巴甜的超高效液相色谱-串联质谱检测法(UPLC-MS-MS),并用于市售白酒和调香剂中4种甜味剂的测定。方法:采用WatersACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(50mm×2.1mm,1.7μm),以乙腈-0.01g/100mL氨水为流动相,梯度洗脱,流速0.2mL/min,待测物经电喷雾离子源负离子化后,用三重四级杆串联质谱仪的多反应离子监测(MRM)方式进行定量分析。结果:4种甜味剂质量浓度在10～1000μg/L范围内均与峰面积呈良好线性关系(r≥0.997),检出限为0.03～0.35μg/L,平均加标回收率在75.2%～115.3%之间,相对标准偏差在8%以内。市售白酒和调香剂中甜蜜素、糖精钠和阿斯巴甜的含量分别为0～287、0～67.2、0～104.8μg/L,样品中没有发现安赛蜜。结论:本方法快速简便、检出限低,适合于白酒和调香剂中微量甜味剂的同时检测。

酶解法与LC-MS-MS相结合研究灯盏乙素在健康人体内的药代动力学

目的：建立β-葡萄糖醛酸苷酶解法与LC-MS-MS法相结合测定人体血浆中灯盏乙素的苷元,研究健康男性单剂量口服灯盏花素分散片的药代动力学。方法血浆样品经β-葡萄糖醛酸苷酶水解,甲醇蛋白沉淀,色谱柱为Agilent ZOR BAX SB C18（2．1 mm×150 mm,5μm）,运用乙腈-甲醇-水洗脱,多反应监测（MRM）灯盏乙素苷元（[M - H]-,m/ z 285．0/136．8）和内标槲皮素（[ M - H]-, m/ z 301．1/120．8）。12名健康男性单剂量口服灯盏花素分散片120 mg 后,采用该方法测定血浆中灯盏乙素苷元,使用DAS 1.0软件处理数据,计算药代动力学参数。结果灯盏乙素苷元在4．01～513．38μg·L-1范围内线性良好,日内日间精密度小于7．22%,提取回收率大于84．23%。12名健康男性单剂量口服灯盏花素分散片120 mg 后,以灯盏乙素苷元为检测对象的主要药动学参数为：Cmax （μg·L^-1）：159．97±58．14； AUC（0-19）（μg·L^-1·h）：1151．37±279．80；AUC（0- ∞）（μg· L^-1·h）：1194．13±264．51；Tmax （h）：6．33±1．67；T1/2（h）：2．83±0．60。结论建立的酶解与LC-MS-MS 相结合分析方法准确灵敏,适用于灯盏乙素人体内的药代动力学研究。

基于UPLC-MS-MS技术快速测定花生中4种黄曲霉毒素

建立了花生中4种黄曲霉毒素的超高液相色谱-三重四极杆串联质谱(UPLC-MS-MS)检测的方法。样品经80%乙腈-水溶液振荡超声提取后,采用多功能净化柱净化。待测物经Kinetex SB-C18色谱柱分离,甲醇-0.1%甲酸溶液为流动相,梯度洗脱,三重四级杆串联质谱多反应离子监测(MRM)方式检测,外标法定量。结果表明:4种黄曲霉毒素在各自的线性响应范围内线性关系良好,相关系数均大于0.999,方法的检出限为0.014~0.025μg/kg,空白样品中加标回收率为72.25%~89.46%,RSD在4.01%~9.56%之间。该方法前处理简单快速、净化效果好、检出限低,适合花生中多种黄曲霉毒素的同时快速测定。

LC-MS-MS分析烟草中氨基甲酸酯农药残留

为建立烟草样品中11种氨基甲酸酯农药残留的分析方法，采用液相色谱-质谱／质谱（LC-MS-MS）联用分析技术，使用丙酮／水溶液振荡提取烟草中的农药残留成分，萃取液经过二氯甲烷液液分配，然后采用固相萃取柱（NH2）净化。使用反相液相色谱对农残样品进行分离，以氘代甲萘威为内标，采用多反应监控模式（MRM）进行定量分析。结果表明，当加标质量浓度水平为0．05、0．2、0．4μg／g时，平均加标回收率为69．2％-121．0％，相对标准偏差为1．0％-12．0％。

LC-MS-MS法评价2种苯磺酸氨氯地平片的生物等效性

目的建立LC-MS-MS法测定人血浆中苯磺酸氨氯地平的浓度,并进行2个制剂间的生物等效性评价。方法采用随机交叉、自身对照试验设计,18名健康志愿受试者口服苯磺酸氨氯地平片受试制剂和参比制剂各10mg,以HPLC-MS-MS法测定服药后120h内不同时间点的血药浓度,计算主要药物动力学参数,以方差分析法对主要参数进行均数的差别检验,以双单侧t检验进行生物等效性判定。结果受试者分别口服受试制剂和参比制剂后主要动力学参数AUC0～120,AUC0～∞,tmax,Cmax,t1/2分别为(194.68±52.97)g.h.L-1、(192.74±49.56)μg.h.L-1、(209.29±51.85)μg.h.L-1、(209.45±55.38)μg.h.L-1,(7.0±1.3)h和(7.0±1.0)h、(6.23±1.86)μg.L-1和(6.27±2.41)μg.L-1、(32.7±10.0)h和(32.6±4.5)h。受试制剂对参比制剂的相对生物利用度为(101.0%±9.6%)。结论受试制剂与参比制剂为生物等效制剂。

HPLC-MS-MS法测定人血浆中苯磺酸氨氯地平的浓度及其药动学

目的：建立人血浆中苯磺酸氨氯地平高效液相色谱-质谱联用测定法（HPLC-MS-MS），并研究苯磺酸氨氯地平在健康人体内的药动学行为，评价两片剂的生物等效性．方法：采用双交叉试验设计，血样用乙醚-二氯甲烷（2：1）混合液提取，HPLC-MS-MS分离测定，根据血药浓度．时间数据估算主要药动学参数和相对生物利用度，评价生物等效性．结果：苯磺酸氨氯地平的线性范围为0．1986～15．8880ng/mL．苯磺酸氨氯地平受试片和参比片的主要药动学参数分别是：Cmax为（5．9511±2．3623）和（5．5517±1．9781）ng/mL，Tmax分别为（5．89±2．25）和（5．83±1．54）h，AUC（04）分别为（195．6±79．4）和（212．7±72．1）ng/mL·h，AUC（0-∞）分别为（226．1±91．2）和（240．3±82．3）ng/mL·h．结论：本法简便、灵敏、准确，统计分析结果表明两片剂具有生物等效性．

组合LC-MS-MS鉴定技术的生物活性导向研究合欢皮抗炎活性部位

目的：寻找合欢皮的抗炎活性部位。方法：以巴豆油引起小鼠耳肿胀模型做为抗炎筛选模型，同时，在LC-MS-MS分析的导向下，寻找合欢皮抗炎活性部位。结果：合欢皮乙醇提取物的正丁醇萃取部位（AJ-B）是主要活性部位。该部位进一步分离后的木脂素苷类部位（AJ-B-1）显示出明显的抗炎活性，并在5～20mg·kg^-1时表现出一定的剂量依赖关系。结论：LC-MS-MS导向与活性评价导向分离相结合，有助于较快和更理性地进行中药活性部位和成分的研究。

HPLC-MS-MS测定人尿液中黄芪甲苷浓度及其尿液药动学研究

目的 建立HPLC—MS—MS测定人尿液中黄芪甲苷的浓度。方法 使用C18（4．6mm×100mm，5μm）色谱分析枉，以98％CH3OH为流动相，流速0．3mL·min^-1尿液样品经甲醇沉淀后进样，选择黄芪甲苷离子对（807．3／627．3m／z）为选择性检测离子，按外标法定量。结果 尿液中黄芪甲苷线性范围为0．0125～2．0mg·L^-1，日内和日间RSD均小于6％，方法回收率在97．5％-104．2％，最低定量质量浓度为0．0125mg·L^-1。结论 本方法简便、快速、特异，适用于黄芪甲苷人体药动学研究。

LC-MS-MS测定血浆中河豚毒素

河豚毒素(tetrodotoxin,TTX)是一种小分子非蛋白类海洋生物毒素,具有极好的镇痛作用,临床用于戒毒治疗.由于TTX药效强而毒性大(肌注:LD50=19μg/kg),给药剂量很小,注射液每次给药仅为30μg,因此对检测方法的要求很高[1].本文初步建立了测定人血浆中TTX的LC-MS-MS方法,最低检测浓度为1 ng/mL,灵敏度比文献报道的方法提高了10倍[2].……

UPLC-MS-MS法测定花生中黄曲霉毒素的不确定度评定

对应用超高液相色谱串联质谱法测定花生中4种黄曲霉毒素含量的测量不确定度进行评定。根据JJF 1135-2005《化学分析测量不确定度评定》和JJF 1059.1-2012《测量不确定度评定与表示》中的有关规定和基本程序,建立测定花生中4种黄曲霉毒素含量的数学模型,依据影响测量不确定度的来源,对各个不确定度分量进行评定和分析,给出了1μg/kg的检测水平下,超高液相色谱串联质谱法测定花生中4种黄曲霉毒素测定结果的扩展不确定度。通过比较各个分量不确定度,发现实验过程中最小二乘法拟合带来的不确定度影响最大。

LC-MS-MS法同时测定黄芪注射液和黄芪口服液中5种成分

目的建立LC-MS-MS法同时测定黄芪注射液和黄芪口服液中黄芪甲苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花黄素5种有效成分的含有量。方法黄芪注射液和黄芪口服液甲醇稀释液在Agilent ZORBAX SB C18（2.1 mm×150 mm,5μm）色谱柱上分离,流动相为甲醇-水（含0.1%甲酸,70∶30,V/V）;体积流量为300μL/min。MS采用电喷雾离子源,多反应监测方式进行正离子扫描。结果 5种成分在测定浓度范围内均具有良好的线性关系,在黄芪注射液和黄芪口服液中的平均回收率分别为96.8%-102.3%和95.9%-101.5%。结论本法测得结果准确、可靠、灵敏度高,可用于黄芪注射液和黄芪口服液的质量控制。

响应曲面法在类固醇雌激素HPLC-MS-MS定量分析中的应用

雌酮(E1)、17β雌二醇(E2)和17α乙炔基雌二醇(EE2)是雌情活力最强的3种类固醇雌激素。通过响应曲面法(RSM)优化了3种雌激素在高效液相色谱串联质谱联用(HPLC-MS-MS)检测方法中的多离子监测反应(MRM)条件,获得E1、E2和EE2的最优碎片电压分别为205.0、196.0和182.0V,最优碰撞能分别为43.0、51.0和54.0V。配合固相萃取(SPE)预处理技术,采用HPLC-MS-MS内标检测方法检测了重庆主城区嘉陵江水样中E1、E2和EE2的浓度。3者在该方法中的定量检测限分别为0.5、0.4和0.1ng/L。

GC-MS-MS测定蔬菜中八种有机磷农药

用GC-MS-MS同时测定蔬菜中的甲拌磷、二嗪农、甲基对硫磷、毒死蜱、倍硫磷、喹硫磷、杀扑磷和亚胺硫磷.对各个化合物的特征离子对、碰撞电压进行了优化,并阐述了优化反应监测模式(MRM)条件的过程和方法,同时分析了各个化合物的线性范围和最低检出限.将该方法用于蔬菜样品的检测,测得加标回收率在90.4%—105.0%之间,RSD在3.2%—9.3%之间.

HPLC-MS-MS测定人血浆中的甘草次酸及生物利用度

目的 建立人血浆中的甘草次酸的HPLC-MSMS测定法，研究复方甘草甜素制剂的相对生物利用度。方法 以雷尼替丁为内标，血浆样品液液萃取后，经BDS Hypersil C18柱分离，采用质谱检测器检测。18名健康男性志愿者采用随机交叉方式分别单次口服复方甘草甜素制剂A、B或C各75mg，在不同时间点取血，样品以新建立的HPLC-MS-MS法测定，研究比较3种制剂的药动学及相对生物利用度。结果 甘草次酸在浓度2．0～200．0μg·L^-1与峰面积比线性良好，最低定量浓度为2．0μg·L^-1。方法回收率为97．2％～108．0%，日内精密度（RSD）〈4．2％，日间精密度（RSD）〈8．9%.单剂量口服复方甘草甜素片A、B或胶囊C75mg后3种制剂的Cmax分别为（130．4±40．3）、（132．1±43．6）、（128．6±44．7）μg·L^-1；tmax分别为（3．5±0．5）、（3．3±0．5）、（3．4±0．5）h；AUC0-48分别为（2097．6±744．8）、（2037．0±894．9）、（2075．0±734．0）μg·h·L^-1；t1／2分别为（6．0±2．1）、（5．9±1．5）、（5．7±2．1）h。结论 该方法选择性好，灵敏度高，可用于甘草次酸的体内过程研究。药动学参数经方差分析表明A、B和C中甘草次酸的主要药动学参数之间均无显著差异，双单侧t检验结果表明3制剂为生物等效制剂。