间充质干细胞及其培养上清与融冻产物对脐血CD34^+细胞扩增及分化的作用

【目的】探讨人骨髓间充质干细胞(MSC)及其培养上清、融冻产物对脐血CD34+细胞扩增及分化的作用。【方法】分离纯化人骨髓MSC,收集纯化三代的MSC培养上清,采用反复冻融法获得MSC融冻产物,采用免疫磁珠分选系统纯化脐血CD34+细胞。实验分为4组,分别为含MSC滋养层组、MSC上清组、MSC融冻产物组及单纯造血生长因子(HGFs)对照组。流式细胞仪检测人脐血CD34+细胞在这四种培养体系中第6天和第12天有核细胞数及CD34+、CD34+CD38-、CD41+、CD19+、CD3+细胞含量。【结果】①MSC滋养层组对脐血有核细胞和对脐血CD34+、CD34+CD38-的扩增能力最强,MSC培养上清组和MSC滋养层相比具有类似的作用,但其作用强度减弱(P<0.05)。②MSC培养上清和MSC均具有抑制脐血CD34+细胞分化为CD3+和CD19+细胞的作用,差异无显著性(P>0.05)。③MSC培养上清和MSC均具有促进脐血CD34+细胞向CD41+细胞分化的作用,MSC滋养层的作用强于MSC培养上清(P<0.05)。④MSC融冻产物已完全丧失对脐血CD34+细胞扩增和分化作用,与单纯因子对照组相似(P>0.05)。【结论】MSC培养上清对脐血CD34+、CD34+CD38-细胞均具有扩增作用,而且可促进脐血CD34+细胞向CD41+细胞分化。