精子抗原MSH27参与精卵膜融合过程

利用单克隆抗体技术 ,从抗顶体反应后精子头的单克隆抗体库中 ,筛选出一株单抗MSH2 7.在顶体反应后 ,抗原定位于精子与卵子质膜融合的起始位置———精子的赤道段和顶体后区 ;此抗体能够阻断精卵膜融合 ,但不影响精子与卵子质膜的结合 .这种阻断作用呈现抗体剂量依赖性 ,用含 6 0 0 μg/mLIgM型单抗MSH2 7处理精子 ,受精指数下降 90 % .免疫亲合层析分离纯化的抗原 (分子量 39ku)作用于卵子质膜 ,也可使精卵膜融合指数明显地降低 .这些结果说明MSH2

小鼠精子睾丸后成熟过程中单克隆抗体MSH27抗原表位的显露

MSH2 7是一株抗小鼠精子的单克隆抗体 ,此抗体及其纯化的抗原分子在体外受精实验中均可以阻止精卵膜融合 ,因而推测其抗原在精卵膜融合过程中具有重要的作用 .这里探讨了抗原分子在精子睾丸后成熟过程中MSH2 7识别表位的显露条件 .MSH2 7抗原分子在睾丸中产生 ,定位于精子顶体后区的质膜上 ;但MSH2 7所识别的抗原表位只在顶体反应后的精子上表露 .在受精过程中 ,精子必须完成顶体反应并穿过卵子的透明带才能接近卵子质膜并与之融合 .同时还研究了顶体反应和穿透明带作用对MSH2 7表位显露的影响 .在附睾成熟过程中 ,随着精子在附睾中的转运 ,它们发生顶体反应的能力不断增加 ;精子抗原表位的显露呈现顶体反应依赖性 ,且两者呈现线性回归关系 .钙离子载体A2 3 187诱发顶体反应后 ,MSH2 7染色阳性的精子远远少于顶体反应的精子 ;但穿过透明带后绝大多数精子 ( 98% )呈现MSH2 7染色阳性 .总之 ,在睾丸后成熟 (附睾成熟、获能、顶体反应 )和精子穿透明带的过程中 ,对整个精子群体来讲 ,单抗MSH2 7所识别的抗原表位的显露和精子最终获得穿入卵子质膜的能力是同步发生的 .

MSH 27抗原在小鼠睾丸中的定位

目的 ＭＳＨ２７是与精、卵质膜融合相关的针对精子抗原的单克隆抗体，本研究检测了此抗体所识别的睾丸抗原分子及其分布。 方法 用免疫亲和层析和聚丙烯酰胺凝胶电泳纯化、分析了ＭＳＨ２７ 识别的小鼠睾丸抗原，并用免疫组织化学和免疫电镜进行了定位。 结果 单抗ＭＳＨ２７ 可识别睾丸提取蛋白中分子量为１２６ｋＤ和１１６ｋＤ的抗原分子，此抗原在睾丸的精原细胞至球形精子细胞的胞质内部均有表达，分布于内质网囊泡内或囊泡膜上。在精子形成过程中，此抗原由胞质内均匀分布变为聚集于顶体帽旁侧的区域，这一区域将形成顶体后区。 结论 １２６ｋＤ和１１６ｋＤ蛋白是单抗ＭＳＨ２７ 在睾丸中识别的抗原分子，它们可能是单抗ＭＳＨ２７在成熟精子中识别的３９ｋＤ抗原的前体分子。