维罗纳气单胞菌维管束状纤毛mshB基因突变体的构建

目的:构建维罗纳气单胞菌维管束状纤毛mshB基因突变体。方法:首先根据已知的近缘霍乱弧菌的mshB基因序列,设计PCR引物,扩增并克隆了mshB基因,亚克隆于自杀质粒后,通过同源重组替换野生型mshB基因。结果:经过PCR筛选证实重组质粒已插入细菌的基因组中。结论:成功构维罗纳气单胞菌维管束状纤毛mshB基因突变体,为研究mshB基因在其致病过程中所起的作用奠定了基础。

MshB基因突变对维罗纳气单胞菌菌毛动力的影响

目的:通过探索野生型(菌毛表达)和MSHB基因突变型(菌毛不表达)维罗纳气单胞菌动力方面的差别,证明菌毛在细菌运动方面的重要功能。方法:首先培养细菌长至对数生长期,让后进行半固体培养基穿刺与平板挖沟培养实验,最后对阳性率进行T分析。结果:两者之间具有显著差别(P<0.05)。结论:菌毛对维罗纳菌的动力具有重要作用。

紫花苜蓿MsHB1基因的克隆及表达分析

HD-Zip(Homologous structural Domain-leucine Zip,同源结构域-亮氨酸拉链)蛋白是植物特有的转录因子,其中HB1属于HD-ZIP I亚族。通过调节植物体内的内源激素含量变化,HB1转录因子可以提高植物对干旱、高盐等不利环境的抵抗能力。本文为探究紫花苜蓿HB1基因的生物学功能,采用RT-PCR技术成功克隆了MsHB1基因。其编码区长867 bp,编码288个氨基酸。氨基酸序列分析结果表明,HB1蛋白为不稳定蛋白。系统发育树分析表明HB1蛋白与蒺藜苜蓿(Medicago truncatula)同源蛋白的亲缘关系接近。构建MsHB1的原核表达载体,在大肠杆菌BL21中成功诱导紫花苜蓿MsHB1蛋白表达,Western Blot也证实MsHB1蛋白表达成功。表达分析显示:MsHB1基因在紫花苜蓿根、茎、叶中均有表达,在不同发育阶段中,幼嫩的叶片中表达最高。MsHB1在NaCl和ABA处理时的基因表达水平升高,推测MsHB1可能在紫花苜蓿高盐等胁迫应答方面发挥着重要的作用。

mshB基因对维罗纳气单胞菌粘结能力的研究

目的:探讨维罗纳气单胞菌mshB基因对粘结作用的影响。变异型表现出了粘结能力的非显著下降(T test,p>0.05)。mshB基因在维罗纳气单胞菌的msh基因座中是比较次要基因。