MST1/2抑制剂促进大鼠脊髓损伤修复的实验研究

目的探讨MST1/2抑制剂对大鼠脊髓损伤后Yes相关蛋白YAP、神经生长相关蛋白43、神经胶质纤维蛋白GFAP、细胞凋亡因子Caspase3表达及运动功能恢复的影响。方法选取105只体重180~200 g成年雌性SD大鼠,对35只仅做椎板切除手术且不注射药物为假手术组,对70只大鼠建立脊髓顿挫损伤模型,分为生理盐水组、MST1/2抑制剂组,腹腔注射生理盐水、1 mg/kg XMU-MP-1。在手术后第1、3、7、14、21、28天,进行斜板实验及BBB运动功能评分,然后处死大鼠收集脊髓损伤区周围组织,进行免疫荧光染色和免疫印迹检测,观察各组大鼠脊髓组织中YAP、GAP43、Caspase3、GFAP表达变化情况。结果斜板实验与BBB运动功能评分结果显示,从术后第7天起,MST1/2抑制剂组评分明显高于生理盐水组,一直持续到术后第28天,差异有统计学意义(P<0.05)。免疫印记结果显示,术后第14天MST1/2抑制剂组的YAP表达明显高于生理盐水组,差异有统计学意义(P<0.05);术后第14天MST1/2抑制剂组GFAP、Caspase3表达明显低于生理盐水组,同时发现GAP43出现表达,差异有统计学意义(P<0.05)。荧光染色显示,MST1/2抑制剂组较少炎症细胞浸润、形成神经组织结构框架,生理盐水组明显炎症细胞浸润、形成大量神经胶质瘢痕。免疫荧光染色结果显示,假手术组YAP在神经细胞中出现表达,生理盐水组和MST1/2抑制剂组YAP在神经胶质细胞出现表达,且MST1/2抑制剂组YAP、GAP43阳性细胞数量明显高于其他两组,MST1/2抑制剂组成熟肥大的星形胶质细胞数量明显少于生理盐水组;免疫荧光双标结果显示,YAP与GFAP出现共同表达。结论脊髓损伤后大剂量应用MST1/2抑制剂能明显促进YAP表达,减轻炎症损伤反应,抑制神经细胞凋亡,改善脊髓损伤区微环境,促进星形胶质细胞形成原始神经组织结构框架,有利于神经突起再生修复,促进运动功能恢复。