下丘脑褪黑素受体亚型基因及蛋白表达的研究(英文)

目的 :应用 PT- PCR技术和免疫组织化学染色显示人胚胎下丘脑褪黑素受体及其亚型的分布。方法 :取人胚胎下丘脑组织 ,抽提总 RNA并应用 RT- PCR方法检测其 m RNA,扩增所得阳性产物用自动测序仪测序 ;石蜡包埋下丘脑组织 ,应用鼠抗人 m t1 和 MT2 受体单克隆抗体分别检测褪黑素 mt1 和 MT2 受体亚型 m RNA及其蛋白的表达。结果和结论 :人胚胎下丘脑组织中存在 m t1 和 MT2 受体亚型 m RNA的表达及其蛋白的翻译 ,提示在该组织中有 m t1 和 MT2

人HUT78细胞褪黑素受体的基因与蛋白表达的研究

为了检测人HUT78细胞是否存在褪黑素受体(melatoninreceptor,MR)及其亚细胞分布特点 ,采用异硫氢酸胍 苯酚 氯仿一步法抽提总RNA ,进一步通过RT PCR方法检测MR亚型mt1和MT2 的mRNA ,并将RT PCR的阳性产物通过自动测序仪测序 ;同时应用免疫组化染色方法检测mt1和MT2 受体亚型蛋白在HUT78细胞内的分布特点。RT PCR方法则得到了 3 68bpmt1cDNA片段 ,无 3 2 1bpMT2 cDNA片段 ,同时将mt1阳性条带通过胶回收、测序 ,结果显示扩增产物与人mt1受体亚型的基因序列相吻合 ;免疫组化结果显示 ,人HUT78细胞存在mt1受体蛋白 ,主要分布于细胞膜和细胞浆 ,呈棕褐色阳性颗粒 ,而细胞核上未见阳性颗粒 ,MT2 受体蛋白则未检出。提示褪黑素 (melatonin,Mel)对T淋巴细胞具有直接调节作用 。