抑癌基因Rb、MTS_1的表达与膀胱癌的预后

目的 :研究抑癌基因 Rb、MTS1 的表达与膀胱癌的预后。方法 :用 S- P免疫组化法同步检测 6 0例膀胱移行细胞癌抑癌基因 Rb、MTS1的表达 ,观察其与预后的关系。结果 :PRb、p16表达阳性组生存率明显优于阴性组。结论 :PRb与 p16均具有膀胱癌的预后价值 ,而同步检测两者的预后价值优于单一检测。

肺癌中MTS1/p16和p53基因产物的表达与细胞增殖的关系

目的：研究肺癌中ＭＴＳ１／ｐ１６和ｐ５３基因产物的表达与细胞增殖的关系。方法：应用Ｓ－Ｐ免疫组织化学方法研究６２例肺癌组织中ｐ１６蛋白和ｐ５３蛋白的表达情况，并进行增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）检测，计算细胞增殖指数（ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｉｎｄｅｘ，ＰＩ）。结果：６２例肺癌组织中ｐ１６蛋白和ｐ５３蛋白阳性率分别为５８．１％和５９．７％。腺癌ｐ１６蛋白的阳性率明显高于小细胞癌（Ｐ＜０．０５）；淋巴结转移阳性组ｐ１６蛋白的表达显著低于阴性组（Ｐ＜０．０５）；ＰＩ分级为Ⅱ级的ｐ１６蛋白表达显著高于Ⅳ级（Ｐ＜０．０５）。不同组织类型肺癌中ｐ５３蛋白的表达未见明显差异，淋巴结转移阳性组ｐ５３蛋白的表达高于阴性组（Ｐ＜０．０１）；不同ＰＩ分级中ｐ５３蛋白的表达，Ⅳ级明显高于Ⅰ级（Ｐ＜０．０５）和Ⅱ级（Ｐ＜０．０５），Ⅲ级明显高于Ⅰ级（Ｐ＜０．０５）和Ⅱ级（Ｐ＜０．０１）。ｐ１６蛋白低表达和ｐ５３蛋白过表达之间未见明显相关。结论：ｐ１６蛋白低表达和ｐ５３蛋白过表达均有促进肺癌细胞增殖的作用，ｐ１６蛋白的表达与肺癌的细胞分化有关，ｐ５３蛋白过表达对肺癌细胞的转移起重要作用。抑癌基因ｐ５３对ＭＴＳ１／ｐ１６基因无明显调控作?

肿瘤转移相关基因mts1及nm23-H1在肺癌中的表达及其与淋巴结转移的关系

目的 探讨转移相关基因mts1及nm2 3 H1在人肺癌中的表达及其与淋巴结转移的关系。方法 对手术切除后新鲜的2 6例肺鳞癌和13例肺腺癌组织标本采用地高辛标记的mts1及nm2 3 H1cDNA探针进行原位杂交。结果 2 6例鳞癌中,淋巴结转移组11例,mts1mRNA阳性表达9例,阳性率82 % ,nm2 3 H1mRNA阳性表达8例,阳性率73 % ;无淋巴结转移组15例,mts1mRNA阳性表达4例,阳性率2 7% ,nm2 3 H1mRNA阳性表达10例,阳性率67%。13例肺腺癌中,淋巴结转移组5例,mts1mRNA阳性表达4例,阳性率80 % ,nm2 3 H1mRNA阳性表达4例,阳性率80 % ;无淋巴结转移组8例,mts1mRNA阳性3例,阳性率3 8% ,nm2 3 H1mRNA阳性表达6例,阳性率75 %。结论 mts1mRNA表达在肺鳞癌的淋巴结转移与非转移组之间相差显著,在肺腺癌的淋巴结转移组与非转移组之间差异性无统计学意义;nm2 3 H1mRNA表达在肺鳞癌、腺癌的淋巴结转移组与非转移组之间差异性不显著。

MT1M基因对肝癌细胞株Hep-G_2细胞周期及信号通路的影响

目的 :研究MT1M基因对肝癌细胞Hep G2 细胞周期的影响及可能参与的信号通路。 方法 :构建表达MT1M基因的真核质粒 ,转染Hep G2 肝癌细胞株 ,流式细胞术检测该基因对细胞周期的影响 ,通过双荧光素酶报告系统检测该基因对细胞信号通路的影响。 结果 :MT1M基因可诱导Hep G2 细胞停滞在G2 期的细胞增加 ,同时能促进NF κB的转录活化。 结论 :MT1M基因可以影响Hep G2 细胞的细胞周期并活化NF κB的信号通路。

胃癌中MTS1基因异常甲基化的研究

【目的】探讨多肿瘤抑制基因 (multipletumorsuppressorgene 1,MTS1) 5′端CpG岛异常甲基化与原发性胃癌发病机制之间的关系。【方法】PCR 甲基化检测法研究 31例胃癌标本和 19例正常胃组织中MTS1基因 5′端CpG岛异常甲基化情况。【结果】有 35 5 % (11/ 31)的胃癌标本和 5 3 % (1/ 19)正常胃组织出现MTS1基因 5′端CpG岛异常甲基化 ,两者之间有显著性差异 (P <0 0 5 )。【结论】MTS1基因 5′端CpG岛异常甲基化是其在原发性胃癌中的主要灭活机制 ,与胃癌的发生发展密切相关。

非小细胞肺癌中p16/MTS1基因失活及其意义

目的 :研究抑癌基因p16 /MTS1基因失活与肺癌发生发展的关系。方法 :采用双重PCR和免疫组化技术分析 48例原发性非小细胞肺癌中p16基因存在状态。结果 :2 5例p16蛋白表达阴性 (5 2 1% ) ,其中 14例p16基因第二外显子缺失。有淋巴结转移者和无淋巴结转移者的P16蛋白表达阴性率有显著性差异。p16基因缺失率亦如此。肺鳞癌中p16蛋白表达阴性率显著高于腺癌。结论 :p16基因存在状态与非小细胞肺癌的病理组织学分型有关 。

逆转录病毒介导的MTS1基因在人膀胱癌细胞中的表达

逆转录病毒介导的ＭＴＳ１基因在人膀胱癌细胞中的表达袁建林１，惠宏襄２，黄斌３，柴玉波２，于茂生１，王成济２（１第四军医大学西京医院泌尿外科，西安７１００３３，２第四军医大学分子生物学和生物化学教研室３西安空军电讯工程学院医院）关键词逆转录病毒载体ＭＴ...

新疆维吾尔族MT1XT20基因与微卫星不稳定结直肠癌相关性研究

检测临床手术切除43例新疆维吾尔族结直肠癌患者癌组织及相应癌旁正常组织中微卫星不稳定(MSI)状态,探讨MT1XT20基因与新疆维吾尔族MSI结直肠癌发生的关系。通过聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)技术对新疆维吾尔族MT1XT20基因与MSI结直肠癌检测及分析。在43例新疆维吾尔族患者中24例癌组织发生微卫星改变,总检出率为55.81%;8例发生一个微卫星位点改变,两个以上位点改变的有16例,癌旁正常组织中未检测到微卫星改变。在MT1XT20位点上存在较高频率的微卫星改变,提示可能存在MT1XT20基因与新疆维吾尔族MSI结直肠癌发病密切相关,为MSI结直肠癌的早期诊断提供了有意义的检测指标。

子宫内膜癌前病变中K-ras与MTS1/p16基因的表达及意义

目的 探讨K ras激活与MTS1/ p16基因突变 /缺失在子宫内膜癌中的发生发展关系。 方法 对子宫内膜癌及癌前病变组织K ras与MTS1/p16蛋白的免疫组化测定并用PCR技术对MTS1/ p16基因在子宫内膜癌中的纯合性缺失进行检测。结果 K ras、p16蛋白广泛存在于子宫内膜癌和癌前病变组织中 ,癌前病变K ras表达为 11.9% ,癌组为 6 2 .96 % (P <0 .0 5 ) ,而p16表达分别为 76 .5 9%与5 1.85 %。 13例 p16蛋白表达阴性子宫内膜癌PCR扩增 ,7例显示外显子 1缺失。K ras表达与细胞恶性程度呈正相关 ,p16表达则呈负相关。 结论 (1)K ras基因激活与MTS1/ p16基因突变 /缺失导致细胞周期增殖失控 ,是内膜癌发生发展的一个重要环节 ;(2 )子宫内膜癌中p16基因外显子 1纯合子缺失可能是p16蛋白表达降低的机制之一 ;(3)动态观测内膜增生组织中的p2 1ras表达阳性者 。

脑胶质瘤组织中P16MTS1基因缺失研究

目的 探讨人脑胶质瘤组织中多重肿瘤抑制基因 (P16 MTS1)异常。方法 用PCR方法扩增P16基因序列。结果 5 0例脑胶质瘤患者组织中P16基因纯合性缺失 16例 ,缺失率为 32 % ,以胶质瘤Ⅲ～Ⅳ级缺失率较高 (5 7.8% )。结论 P16

中国荷斯坦牛MT1和MT2基因多态性及其与泌乳性状关联性分析

探索MT1及MT2基因对中国荷斯坦牛泌乳性状的影响,为中国荷斯坦牛泌乳性状的提升提供理论基础。本试验采用直接测序法,将测序结果运用生物信息分析软件进行对比分析,寻找突变位点;将检测到的SNP位点与中国荷斯坦牛泌乳性状进行关联性分析。通过扩增MT1的第2外显子区域,检测到1个SNP位点;扩增MT2基因内含子区域,检测到2个SNP位点。将其与中国荷斯坦牛泌乳性状关联分析,结果显示:MT1基因g.22354G>A位点,GG基因型乳脂率、乳蛋白率、总蛋白、总乳脂均值均显著高于AA基因型均值(P<0.05);MT2基因的g.13647T>A与g.13810T>A位点,各基因型的泌乳性状之间差异均不显著(P>0.05)。MT1基因可以作为影响泌乳性状的候选基因,为中国荷斯坦牛辅助标记育种提供理论依据。

p16/MTS1抑癌基因与肿瘤

当前,肿瘤是危害人类生命的主要疾病之一。随着科学技术的进步,已从肿瘤遗传学、分子生物学水平来研究肿瘤的发生与发展。癌基因和抑癌基因的研究已成为热点,目前已发现100多种癌基因和12种抑癌基因。1994年,两个美国实验室(Kamb和Larson)几乎同时发表了有关p16基因的研究工作,报道一种新型的抑癌基因p16基因,对于分析探讨肿瘤增生具有重要意义。

TAP系统分离纯化MT1-MMP-hTAP融合基因蛋白复合物及表达效应评估

目的 应用TAP系统分离纯化的MT1 MMP hTAP蛋白复合物的表达效应。方法 应用TAP系统分子生物学特性采用IgG和钙调蛋白亲和胶粒二次亲和层析法分离纯化MT1 MMP hTAP蛋白复合物。PAP免疫染色及Westernblot法检测蛋白表达效应。结果 PAP免疫染色显示MT1 MMP hTAP融合基因在鸡成纤维细胞内有效表达 ,融合蛋白染色呈深蓝色 ,Westernblot法检测经TAP系统分离纯化后MT1 MMP hTAP蛋白复合物分子稳定表达在相应 68× 10 3 位置。结论 TAP系统分离纯化MT1 MMP hTAP蛋白复合物及其在动物细胞的构建成功并有效表达为在人类肿瘤细胞建立TAP纯化蛋白质体系和寻找MT1 MMP

MTS1基因ARF启动子基础转录调控区转录活性研究

目的 研究MTS1基因ARF启动子基础转录调控区的转录激活及其与E2 F1转录因子之间的关系。方法 以含ARF启动子基础转录调控区E2 F1结合位点野生型序列的W6重组质粒为模板 ,设计该片段中E2 F1A、B、C结合位点序列突变或缺失的引物 ,用聚合酶链反应构建该区域中E2 F1A、B、C结合位点序列突变或缺失的ZE、ZF、ZG重组质粒。再将W6、ZE、ZF、ZG重组质粒转染进Jurkat细胞 ,检测其荧光素酶报告基因的表达。结果 构建的ZE、ZF、ZG重组质粒经SacⅠ或NaeⅠ酶切鉴定和DNA序列分析得到证实。与E2 F1位点野生型重组质粒W6比较 ,突变型重组质粒ZE、ZF、ZG在Jurkat细胞中荧光素酶报告基因的表达量减少 ,以E2 F1A位点突变的重组质粒减少明显。结论 构建ARF启动子E2 F1A、B、C结合位点序列突变的重组质粒成功 ;MTS1基因ARF启动子基础转录调控区的转录激活可能与E2 F1转录因子的作用有关。

膀胱移行细胞癌组织中MTS1基因mRNA的检测及意义

目的 研究多肿瘤抑制基因MTS1在膀胱移行细胞癌组织中的表达方法。方法 应用原位分子杂交方法检测 46例膀胱移行细胞癌标本中抑癌基因MTS1的分布与表达。结果 46例膀胱癌组织中MTS1基因mRNA表达的阳性率为 52 .0 % ,其阳性率随膀胱癌病理分级、临床分期的上升而降低 ,MTS1mRNA表达阳性者 3年生存率明显高于阴性者。结论 MTS1mRNA的表达与膀胱移行细胞癌的分化程度相关 。

多重PCR对乳腺癌中MTS_1基因外显子2缺失的研究

为探索 Ｍ Ｔ Ｓ１ 基因变异在乳腺癌的发生及恶性进程中的作用，作者应用多重 Ｐ Ｃ Ｒ 技术对４７ 例原发性乳腺癌组织进行了检测。结果显示１７ 例纯合性缺失，变异率为３６２ ％ ，其中淋巴结转移组的变异率６０ ％ （９／１５） 显著高于未转移组２５ ％ （８／３２ ， Ｐ＜ ００５） ，浸润性导管癌变异率显著高于其它类型癌。本研究结果提示， Ｍ Ｔ Ｓ１ 基因在乳腺癌组织中有变异存在，其变异的频率与肿瘤的恶性程度及组织分型密切相关。

抑癌基因MTS_1在膀胱移行上皮癌中的表达和意义

为探讨抑癌基因MTS1的表达产物p16蛋白在膀胱移行上皮癌中表达的意义 ,用免疫组化方法 (SABC法 )对 3 5例膀胱移行上皮癌石蜡标本进行p16蛋白检测。结果 :3 5例标本 12例显色阴性 ( 3 4 3 % )。Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级膀胱肿瘤的阴性显色率分别为 45 5 % ( 5 /11)、 3 1 3 % ( 5 /16 )和 2 5 % ( 2 /8) ;浅表性肿瘤 (Tis -T1)和浸润性肿瘤 (T2 -T4)的阴性显色率为 3 6 8% ( 7/19)和 3 1 5 % ( 5 /16 )。不同分级、不同分期肿瘤的阴性显色率无显著差异性 (P >0 0 5 )。认为p16蛋白缺乏在膀胱移行上皮癌的发生中起一定作用 ,但与肿瘤的进展无关。

多重PCR对头颈部肿瘤中MTS_1基因外显子2的检测分析

目的 为了解MTS1基因变异在头颈部肿瘤发生发展中的作用。方法 采用多重PCR技术扩增MTS1基因外显子 2。结果 本组MTS1基因外显子 2纯合子缺失的频率为 37.3 % (17/4 5 ) ,分化较好鳞癌MTS1基因缺失频率 31.5 % (6 /19)明显低于分化较差的鳞癌的 5 7.1% (8/14) ,但差异无显著性 (P >0 .0 5 )。

乳腺癌中MTS_1基因外显子2及蛋白表达的初步研究

目的 :初步探测 MTS1 基因外显子 2缺失及其表达的 P16蛋白阴性在乳腺癌发生发展中的作用。方法 :采用多重PCR扩增 MTS1 基因外显子 2 ,免疫组化染色 (SP法 )检测 P16蛋白表达。结果 :本组乳腺癌中 MTS1 基因外显子 2的纯合子缺失频率为 35 .8% (19/ 5 3)。蛋白阴性占 19.4% (7/ 36 )。三种类型的乳腺癌中 MTS1 基因变异及 P16蛋白阴性频率有明显差异 ,淋巴转移组的基因变异及蛋白阴性频率极显著高于未转移组 (P <0 .0 1)。结论 :MTS1 基因外显子 2变异及 P16蛋白阴性与乳腺癌的病理组织分型相关 ,与乳腺癌的恶性进程密切相关。

MTS_1基因β启动子E_2F_1结合位点序列突变重组质粒的构建与表达

目的 :深入研究MTS1 基因 β 启动子的转录激活与E2F1 转录因子的相互作用关系 ,阐明该基因转录水平的调控机制。方法 :用PCR定点突变方法或酶切连接法 ,构建β 启动子0.38kbSacⅡ -SacⅠ酶切片段中E2F1 A、B、C任意2个位点或3个位点均突变的 pGL3 重组质粒。用脂质体介导的基因瞬时转染法 ,将构建的重组质粒转染MTS1 基因双等位缺失的急性T淋巴细胞白血病Jurkat细胞 ,检测pGL3 重组质粒中荧光素酶报告基因的表达。 结果 :构建的E2F1 A、B、C结合位点突变的重组质粒经SacⅠ或NaeⅠ酶切鉴定和DNA序列分析得到证实。与E2F1 位点野生型重组质粒比较 ,突变型重组质粒在Jurkat细胞中荧光素酶报告基因的表达量减少 ,以3个位点均突变的重组质粒为明显。 结论 :构建的E2F1 A、B、C2个或3个结合位点均突变重组质粒成功 ,可通过基因转染用于研究MTS1 基因的功能试验中 ;MTS1 基因β 启动子的转录活性可能与E2F1 转录因子的反式激活有关。