IncRNA MT1JP抑制乳腺癌细胞增殖并促进乳腺癌凋亡研究

目的探讨长链非编码RNA金属硫蛋白1J(IncRNA MT1JP)对乳腺癌细胞增殖凋亡的影响。方法收集人乳腺癌组织及对应的癌旁组织,体外培养乳腺癌细胞MCF-7、MDA-MB-231、HCC1569和人乳腺正常的上皮细胞MCF10A,RT-PCR检测组织和细胞中MT1JP水平。乳腺癌细胞转染MT1JP过表达载体和空载体分别命名为MT1JP组和NC组,同时以只加入转染试剂的细胞为对照组,RT-PCR检测细胞中MT1JP表达水平。噻唑蓝(MTT)检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测细胞中蛋白激酶B(Akt)、磷酸化的蛋白激酶B(p-Akt)、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved Caspase-3)表达水平。结果 MT1JP在乳腺癌组织中的表达水平明显低于癌旁组织(P<0.05)。MT1JP表达水平由高到低为:MCF10A、HCC1569、MDA-MB-231、MCF-7,后续选用MCF-7细胞继续研究。MT1JP组细胞存活率及p-Akt水平明显低于对照组,而凋亡率和Cleaved Caspase-3水平明显高于对照组(P<0.05)。结论 MT1JP在乳腺癌中表达下调,MT1JP能够抑制乳腺癌细胞增殖,促进乳腺癌细胞凋亡,作用机制可能与Akt信号通路有关。

过表达长链非编码RNA MT1JP抑制视网膜母细胞瘤SO-RB50细胞的增殖、侵袭和体内移植瘤的生长

目的探讨过表达长链非编码RNA MT1JP抑制视网膜母细胞瘤SO-RB50细胞的增殖、侵袭和体内移植瘤的生长机制。方法体外培养视网膜母细胞瘤SO-RB50细胞,并分为空白对照组(control组)、转染对照组(Vector组)及过表达组(MT1JP组);采用RT-PCR检测各组MT1JP的表达;克隆形成检测各组SO-RB50细胞生长情况;流式细胞仪检测细胞凋亡情况;Transwell检测细胞侵袭情况;Western blot检测Ki67、VEGF蛋白表达情况。小鼠皮下注射SO-RB50细胞,建立移植瘤模型;RT-PCR检测长链的表达;统计裸鼠生存时间,绘制生存曲线;检测小鼠肿瘤重量;免疫组化检测小鼠肿瘤组织中Ki67和VEGF的表达情况。结果与空白对照组比较,转染对照组的MT1JP表达、单位面积细胞侵袭数目、Ki67、VEGF蛋白表达均无显著变化(P>0.05);与转染对照组比较,过表达组MT1JP的表达、细胞凋亡率显著升高(P>0.05),克隆实验细胞形成率、Ki67、VEGF蛋白表达、单位面积细胞侵袭数目显著降低(P<0.05);小鼠体内实验显示:与空白对照组比较,转染对照组小鼠肿瘤质量、生存期、Ki67、VEGF蛋白表达均无显著差异(P>0.05);相比转染对照组,过表达组小鼠MT1JP表达、小鼠生存率显著提高(P<0.05);肿瘤质量、Ki67、VEGF蛋白表达显著降低(均P<0.05)。结论过表达长链非编码RNA MT1JP可以抑制视网膜母细胞瘤SO-RB50细胞的增殖、侵袭,促进SO-RB50细胞的凋亡并抑制体内移植瘤的生长。

长非编码RNA MT1JP调控p53抑制类风湿关节炎炎症反应作用及机制研究

目的:探讨长非编码RNA MT1JP调控p53抑制类风湿关节炎炎症反应的作用及机制。方法:qRT-PCR法检测类风湿关节炎患者和骨关节置换患者滑膜组织中长非编码RNA MT1JP相对表达;小分子干扰RNA干扰MT1JP研究其作用;ELISA检测炎症因子白细胞介素(IL)-1β、IL-6、IL-8水平;Western blot检测p53蛋白水平。结果:类风湿关节炎患者滑膜组织MT1JP水平明显低于骨关节置换患者,且类风湿关节炎患者滑膜组织MT1JP水平与血清中炎症因子IL-1β、IL-6、IL-8水平呈负相关;干扰MT1JP后明显促进MH7A滑膜细胞的IL-1β、IL-6、IL-8分泌和抑制p53表达。结论:类风湿关节炎患者滑膜组织MT1JP水平下调,通过调控p53进而促进炎症因子的分泌和炎症反应。

长链非编码RNA MT1JP通过FBXW7调控口腔鳞癌细胞生物学活性

目的:探讨长链非编码RNA-MT1JP(long non-coding RNA-MT1JP,LncRNA-MT1JP)通过FBXW7对口腔鳞癌细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭等生物学活性的影响。方法:qRT-PCR检测LncRNA-MT1JP在Cal-27、SCC-4、TSCCA口腔鳞癌细胞系和正常口腔上皮细胞系HOK中的表达,将TSCCA细胞系分成LncRNA-MT1JP基因沉默组和对照组,随后采用Lipofectamine TM 2000分别转染LncRNA-MT1JP-shRNA及对照序列LncRNA-MT1JP-NC;MTT法检测两组TSCCA细胞增殖;Transwell小室实验检测两组TSCCA细胞系迁移、侵袭能力;流式细胞仪检测两组TSCCA细胞系凋亡能力;Western blot法检测FBXW7基因蛋白的表达。结果:与正常口腔上皮细胞系HOK比较,LncRNA-MT1JP的相对表达量在口腔鳞癌细胞系Cal-27、SCC-4及TSCCA中显著增高(P<0.01)。TSCCA细胞系在转染24及48 h后,MT1JP基因沉默组与对照组比较OD值无显著的统计学差异(P>0.05);但在72及96 h后OD值显著降低(P<0.05)。与对照组比较,MT1JP基因沉默组TSCCA细胞迁移与侵袭数目显著降低(P<0.01)、凋亡率以及FBXW7基因蛋白相对表达量均显著升高(P<0.05)。结论:LncRNA-MT1JP在口腔鳞癌细胞系呈高表达,MT1JP基因沉默有效抑制了TSCCA细胞系的增殖、迁移、侵袭,促进其凋亡,该作用可能与MT1JP基因沉默后上调抑癌基因FBXW7的表达有关。

LncRNA MT1JP对葡萄膜黑色素瘤细胞迁移和侵袭的影响

目的研究LncRNA MT1JP对葡萄膜黑色素瘤细胞迁移和侵袭的影响及机制。方法实时荧光定量PCR测定LncRNA MT1JP在葡萄膜黑色素瘤细胞系SP6.5、M23及正常视网膜色素上皮细胞系ARPE-19中的表达,将SP6.5细胞分成3组,即MT1JP组、siMT1JP组和NC组,分别转染pcDNA3.1-MT1JP、pcDNA3.1-siMT1JP及pcDNA3.1空载体,采用细胞划痕实验和Transwell实验测定3组划痕愈合率和侵袭细胞数,Western blot测定P53蛋白表达水平。结果葡萄膜黑色素瘤细胞系SP6.5和M23中LncRNA MT1JP的相对表达量分别为0.20±0.02和0.31±0.01,均显著低于正常视网膜色素上皮细胞系ARPE-19的1.0(均为P<0.01)。siMT1JP组划痕愈合率为61.5%±3.7%,MT1JP组为10.6%±1.7%,NC组为20.0%±2.1%,3组间两两相比差异均有统计学意义(均为P<0.01)。在200倍视野下,siMT1JP组侵袭细胞数为(75.6±6.8)个,MT1JP组侵袭细胞数为(10.3±2.6)个,NC组为(29.50±3.9)个,3组间两两相比差异均有统计学意义(均为P<0.01)。siMT1JP组P53蛋白相对表达量为0.41±0.04,显著低于NC组的1.0(P<0.01);MT1JP组P53蛋白相对表达量为5.73±0.62,显著高于NC组的1.0(P<0.01)。结论 LncRNA MT1JP抑制葡萄膜黑色素瘤细胞的转移和侵袭,其机制可能与上调P53蛋白表达有关。

长链非编码RNA MT1JP低表达与结直肠癌进展的关系

目的:研究长链非编码RNA MT1JP在结直肠癌中的临床意义。方法:收集山东省千佛山医院和肥城矿业中心医院结直肠癌及对应癌旁组织临床标本,实时定量PCR检测结直肠癌组织中MT1JP表达量,分析MT1JP表达量与结直肠癌患者癌胚抗原(CEA)水平及临床病理特征之间的关系。结果:共收集结直肠癌及对应癌旁组织146例,MT1JP在结直肠癌组织中表达明显低于癌旁组织(P<0.01),MT1JP表达水平与患者CEA水平呈负相关(r=-0.45,P<0.01),并且MT1JP低表达与肿瘤大小(P<0.01)、浸润深度(P<0.01)、淋巴结转移(P<0.01)、远处转移(P=0.01)及TNM分期(P<0.01)相关。结论:长链非编码RNA MT1JP在结直肠癌中是一种抑癌基因,可抑制结直肠癌的临床进展,并且可能成为结直肠癌患者潜在的诊断标志物。

血清lncRNA MT1JP、CEA、TNF-α联合检测对早期肝硬化的预后评估价值

目的探究血清长链非编码RNA(long non- coding RNA,lncRNA)MT1JP、癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor,TNF-α)三项指标联合检测对肝硬化的预后评估价值。方法收集2010年1月至2013年1月在我院确诊的早期肝硬化患者共330例,检测患者血清lncRNA MT1JP、CEA、TNF-α水平,分别依据三项指标血清水平的中位数将患者分为高水平组和低水平组。依据患者纳入该研究的时间依次对其进行五年随访,统计随访期间的死亡人数、死亡日期。在随访前与随访结束后,对患者进行Child分级,并采集患者血液标本进行肝纤维化指标的检测。采用Kaplan- Meier法和对数秩检验进行生存分析。采用受试者工作特征曲线分析三项指标联合检测对肝硬化患者预后的判别能力。结果 330例早期肝硬化患者的血清平均lncRNA MT1JP、CEA、TNF-α水平分别为:12.77±0.20(-log), 8.12± 2.08pg/mL ,690.42±93.75 μg/L。血清低lncRNA MT1JP与高CEA、TNF-α水平组患者的五年生存率降低,肝纤维化指标水平与Child分级中C级患者所占比例增高,且差异均具有统计学意义(P<0.05)。ROC结果显示,联合三项指标在鉴别肝硬化患者是否生存五年的曲线下面积为0.937(95% CI:0.842~0.981,P<0.001),灵敏度为81.7%,特异性为 91.8%。结论肝硬化患者血清低lncRNA MT1JP与高CEA、TNF-α水平与其不良预后密切相关,可作为有效的监测指标以指导肝硬化患者的临床治疗。

长链非编码RNA MT1JP靶向微小RNA-18a-5p对非小细胞肺癌恶性细胞生物学的影响

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)MT1JP靶向微小RNA(miR)-18a-5p对非小细胞肺癌恶性细胞生物学的影响。方法选择2018年6月到2021年6月河南省人民医院收治的71例非小细胞肺癌和癌旁组织作为研究对象,采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析肿瘤组织和癌旁组织lncRNA MT1JP和miR-18a-5p表达水平。采用对照慢病毒和lncRNA MT1JP慢病毒感染A549细胞,建立lncRNA组和MT1JP组细胞,采用细胞计数试剂盒(CCK-8)和EdU染色分析两组细胞增殖;采用Transwell分析两组细胞侵袭;采用划痕实验分析两组细胞迁移能力。采用生物信息学和双荧光素酶报告基因分析lncRNA MT1JP的靶基因。组间比较采用t检验。结果癌旁组织lncRNA MT1JP表达水平(1.00±0.17)明显高于肺癌组织lncRNA MT1JP表达水平(0.37±0.18),差异有统计学意义(t=21.330,P<0.05)。癌旁组织miR-18a-5p表达水平(1.08±0.18)明显低于肺癌组织lncRNA MT1JP表达水平(2.23±0.20),差异有统计学意义(t=36.040,P<0.05)。lncRNA组细胞活力(1.67±0.09)和细胞EdU染色阳性率[(61.83±4.88)%]明显高于MT1JP组细胞活力(1.10±0.05)和细胞EdU染色阳性率[(33.17±3.31)%],差异有统计学意义(t=12.940、10.760,P<0.05)。miR-NC组细胞活力(1.63±0.06)和EdU染色阳性率[(61.33±4.46)%]明显高于miR-18a-5p沉默组细胞活力(1.14±0.09)和和EdU染色阳性率[(33.00±4.73)%],差异有统计学意义(t=10.760、10.680,P<0.05)。lncRNA组细胞划痕愈合率[(70.22±3.41)%]和侵袭数量[(111.83±10.09)个]明显高于MT1JP组[(35.42±3.82)%]和侵袭数量[(64.17±7.81)个],差异有统计学意义(t=16.620、9.153,P<0.05)。miR-NC组划痕愈合率[(73.72±3.82)%]和侵袭数量[(117.33±7.79)个]明显高于miR-18a-5p沉默组[(43.40±4.70)%]和侵袭数量[(56.67±10.29)个],差异有统计学意义(t=10.540、11.520,P<0.05)。结论lncRNA MT1JP在非小细胞肺癌中低表达,通过靶向miR-18a-5p,进而参与非小细胞肺癌的增殖、迁移和侵袭等过程。