敲除MT3R/Nqo2基因对大鼠睡眠/觉醒行为和EEG能谱的影响

目的利用CRISPR/Cas9基因编辑工具构建褪黑素3型受体(MT3R/Nqo2)基因敲除的SD大鼠,观察基因敲除后大鼠的睡眠/觉醒行为变化和EEG能谱改变,以探究褪黑素调控睡眠/觉醒的受体机制。方法利用非同源重组修复引入突变的方式,造成MT3R/Nqo2基因蛋白读码框移码突变,使该基因功能缺失,建立MT3R/Nqo2基因敲除的SD大鼠,并通过PCR、RT-PCR和FISH进行基因水平、转录水平和形态学的敲除验证,然后对敲除组与对照组大鼠进行睡眠/觉醒行为分析和睡眠/觉醒各时相脑电能谱分析。结果MT3R/Nqo2基因敲除后,与对照组大鼠相比,敲除组大鼠在黑暗期(活跃期)开始后的前3 h(ZT12~15)出现觉醒时长减少、NREM和REM睡眠时长增加(P<0.05)。另外,在该时期,敲除MT3R/Nqo2基因后大鼠还出现睡眠/觉醒转化次数显著增加,觉醒片段长度缩短,觉醒片段化现象(P<0.05)。脑电能谱分析显示,与对照组大鼠相比,敲除组大鼠NREM睡眠期θ波能量升高(P<0.05)。结论MT3R/Nqo2基因敲除使大鼠NREM睡眠期EEG高频能量异常升高,NREM睡眠期稳态恢复过程受损,导致大鼠在黑暗期(活跃期)开始后的前3 h(ZT12-15)觉醒减少,睡眠增加,觉醒片段化。

食管鳞状细胞癌中MT3基因CpG岛甲基化及其临床意义

目的 探讨食管癌中 MT3基因 Cp G岛甲基化的情况及其临床意义。方法 选取切除的食管鳞癌标本4 7例 ,提取肿瘤、上切缘、下切缘及转移淋巴结的标本蜡块 DNA,经重亚硫酸化处理后 ,进行 COBRA分析 ,所得结果与各临床病理参数及随访资料进行比较。结果 全组有 10例 (2 1.3% )肿瘤组织发现 MT3基因甲基化 ,其中 1例呈原位癌样改变的上切缘也检测到甲基化。全组 35枚转移淋巴结中共发现 15枚 (4 2 .9% )甲基化 ,与肿瘤组织相比 ,差异有显著性 (P=0 .0 37,χ2 =4 .35 5 )。原发肿瘤存在甲基化 10例患者中 ,每例有 (5 .7± 3.6 0 )枚转移淋巴结。而不存在甲基化的 37例转移淋巴结数为 (3.2± 2 .13)枚 ,两者比较差异有显著性 (P=0 .0 18)。肿瘤组织的甲基化情况与患者的性别、年龄、烟酒嗜好、肿瘤分期及分化程度均无关 (P值均 >0 .0 5 ,χ2 检验 )。结论 MT3基因Cp G岛甲基化与食管鳞癌的淋巴结转移状况关系密切 ,作为一个独立的预后因素 。

M4受体阻滞剂MT3抑制豚鼠形觉剥夺性近视的探讨

目的探讨高度选择性M4受体阻滞剂MT3对豚鼠形觉剥夺性近视的抑制作用及其潜在作用机理。方法 3周龄豚鼠随机分为三组:对照组、形觉剥夺组、形觉剥夺+MT3组。实验前后使用带状光检影测量屈光度,A超测量眼生物学参数,RT-PCR检测视网膜和脉络膜中TGF-β2的mRNA相对表达量。结果与对照组右眼相比,形觉剥夺+MT3组豚鼠右眼形成了(-1.44±0.50)D相对近视(右眼-左眼),玻璃体腔和眼轴长度分别延长(0.10±0.02)mm和(0.14±0.07)mm(P=0.001,P<0.001,P<0.001),但近视量、玻璃体腔和眼轴长度增加量均显著小于单纯形觉剥夺组(P<0.001,P<0.001,P<0.001)。单纯形觉剥夺可引起视网膜和脉络膜TGF-β2的mRNA相对表达量下调(P<0.001,P=0.014);而玻璃体腔注射MT3可导致形觉剥夺眼视网膜和脉络膜TGF-β2的mRNA相对表达量上调(P<0.001,P<0.001)。结论 MT3能抑制豚鼠形觉剥夺性近视的形成,其可能通过上调视网膜和脉络膜中TGF-β2的mRNA水平而发挥作用。

MT3DMS中混合欧拉-拉格朗日数值解法分析

MT3DMS是地下水溶质迁移模拟软件MT3D家族中较新的版本,其功能在原有版本的基础上有了很大的拓展。它包括了三类主要的溶质迁移求解技术,即：标准有限差分法、基于粒子示踪的混合欧拉-拉格朗日法以及高阶有限差分TVD法。本文在简要介绍几种解法后,重点介绍了MT3DMS中基于混合欧拉-拉格朗日法的MOC、MMOC和HMOC解法,并以实际算例来说明它们在不同条件下求解的差异。

抑制核因子-kB对糖尿病大鼠肾组织MT3-MMP mRNA表达的影响

【目的】研究抑制NF鄄资B活性对糖尿病大鼠肾组织膜3型基质金属蛋白酶(MT3鄄MMP)mRNA表达的影响。【方法】纯种雄性Wistar大鼠分为3组:A组为正常对照组(11只),B组为糖尿病大鼠未干预组(11只),C组为吡咯烷二硫基甲酸酯(PDTC,NF鄄资B活性抑制剂)干预组(9只)。以链脲佐菌素制备糖尿病模型。大鼠饲养18周后取出肾脏,以电泳迁移率变动分析技术检测NF鄄资B活性,RT鄄PCR检测MT3鄄MMPmRNA表达,以透射电镜检测肾小球基底膜厚度及系膜基质密度,并收集24h尿检测尿白蛋白排泄(UAE)。【结果】NF鄄资B活性在B组大鼠肾组织(1.85±0.54)×106明显高于A组(0.07±0.11)×106,P<0.01,C组(0.25±0.25)×106明显低于B组,P<0.01。肾组织MT3鄄MMPmRNA表达B组大鼠(1.37±0.96)明显高于A组(0.75±0.34),P<0.01,C组(0.75±0.36)明显低于B组(P<0.01)。与A组大鼠比较,肾小球基底膜厚度(531.6±107.6)nmvs(312.4±25.4)nm,P<0.01)及系膜基质密度(56.41±6.78)vs(33.95±5.22),P<0.01,均显著增高,C组肾小球基底膜厚度(315.8±21.4)nm及系膜基质密度(37.97±7.37)均显著低于B组,均P<0.01。UAE在B组大鼠(2.18±1.98)显著高于A组(0.41±0.47),P<0.05,以及C组(0.56±0.72),P<0.05。【结论】糖尿病大鼠肾组织NF鄄资B活性及MT3鄄MMPmRNA表达增加,抑制NF鄄资B活性可使肾组织MT3鄄MMPmRNA表达降低。

基于MT3DMS的某采煤厂污染物运移模拟

随着工业化发展速度加快,大量采煤带来的环境污染问题日益突出。为了保护安康石煤开采区域的生态环境,掌握当地污染物运移规律尤为重要。因此,基于安康市2018年2月地下水流场资料,利用Visual Modflow中的MT3DMS模块建立溶质运移模型,对采煤厂污染易发区域的多种特征污染物在不同情况下的运移进行研究,并提出相应的污染防治建议。结果表明:当未采取任何措施时,Al^(3+)、Fe^(3+)和NH_4^+这3种特征污染物在泄漏1 000 d后超标面积在1 893～5 975 m^2之间;当安装防渗层或加快检漏频率后,仅NH_4^+在泄漏1 000 d后出现1 693 m^2的超标,其余污染物浓度均低于超标限。

基于VM-MT3D的污染物质运移数值模拟预测分析

加强地下水溶质运移的数值模拟研究,对于地下水资源的保护、利用具有重要的现实意义。利用VM-MT3D数值模型,对研究区地下水NH 3-N溶质渗漏污染进行多年模拟、预测,分析渗漏处理站和处理站下游厂界区域的污染浓度历时变化过程,发现NH 3-N污染羽最远影响距离为496.2 m,污染羽范围为36800 m 2;另外,处理站和处理站下游厂界分别在7.4、14.8年后才能达到地下水Ⅲ类标准限值。最后,对地下水溶质运移模型就行验证识别,发现模型模拟的地下水位和实际水位差均在0~1.2 m之间,水位误差较小,满足模拟预测所需精度要求。

MT3-80型拖拉机的转向操纵机构(下)

四、差速器自动联锁机构 1.差速器及差速器联锁机构的功用和组成差速器用于为半轴传递扭矩,并在不平的道路上行驶或转弯时使两驱动轮具有不同的转速。差速器为行星齿轮机构。

MT3-80型拖拉机的转向操纵机构(上)

MT3-80型拖拉机是白俄罗斯共和国明斯克拖拉机厂生产的轮式拖拉机,功率为59kW,质量为2650kg。该机为前轮转向,转向操纵机构由转向盘、转向传动装置、液压助力器、转向梯形机构和液压差速器联锁机构等组成。

《我叫MT3》变身魔幻回合制手游

近日,通过内部渠道获得了《我叫MT3》的第一手资料。该游戏依旧延续了经典魔幻题材世界观作为游戏背景,依旧是玩家熟悉的职业、种族、副本。但是,《我叫MT3》在回合制、玩家交互、大型公会副本、种族坐骑、飞行坐骑、游戏剧情等方面走的更远,从原来相对简单的卡牌式回合制手游,彻底变成了国内唯一的大型魔幻题材回合制游戏。小编从MT3内部测试中看到令人震惊的一幕,整个游戏场景地图充斥着浓郁的魔幻气息,逼格!新鲜!

广西思的河流域重金属污染物溶质运移模拟

为评价广西阳朔县思的河流域矿区的重金属污染情况,将流域水文模型ArcSWAT与地下水模型(groundwater modeling system,GMS)中MT3DMS溶质运移模块相结合,定量分析污染物锌和镉的迁移过程,为进一步的治理措施提供参考依据。结果表明:采用ArcSWAT和GMS可以更准确地确定垂向入渗量,从而准确进行地下水数值模拟。在没有防治措施的情况下,矿井废水对地下水环境造成较大的污染威胁:尾砂矿矿洞出水口水样中锌和镉的含量分别为18.62 mg/L和0.096 mg/L,是流域重金属污染的源头。模拟期20 a内,锌和镉的污染晕分别在16 d和44 d之后到达河流,前端最远距离污染晕中心分别为2303.75 m和1887.04 m,两端最长处为3159.57 m和2478.57 m,最宽处分别为1533.54 m和1128.36 m。锌和镉进入流域的质量分别为3512.44 g和18.15 g,流出流域的质量为1640.49 g和8.47 g,残留在流域的比例分别为53.28%和53.33%。根据已有研究结果表明,龙葵对镉具有较强的富集能力,在植物体中的最高富集量为1084.4 mg/kg,并对锌具有较强的耐性,富集量也超过1000 mg/kg。因此,设置一个模拟情景对尾矿库生态修复工程进行评价。以尾矿积水塘中锌含量0.284 mg/L和镉含量0.002 mg/L为替代污染源强,模拟期内,锌沿河谷方向的迁移速度由94.38 m/a降低至80.78 m/a,最大污染晕面积由3.80×10^(6)m^(2)缩小至2.50×10^(6)m^(2);镉的迁移速度由86.09 m/a降低至69.13 m/a,最大污染晕面积由1.67×10^(6)m^(2)缩小至1.29×10^(6)m^(2),说明生态修复工程取得较好效果,建议继续投入建设。根据模拟预测结果,建议在矿洞出水口修建防渗帷幕等防治措施,划分污染防治区,并加强地下水水质监测,同时制定地下水风险事故应急预案,避免污染进一步加剧。

MT3基因启动子甲基化和肿瘤易感性与预后的相关性

目的探讨MT3基因启动子甲基化和肿瘤易感性与预后的相关性。方法选取2013年1月至2016年12月间邢台市人民医院收治的112例肿瘤患者,根据是否发生MT3基因甲基化分为研究组(发生基因启动子甲基化)23例与对照组(未发生基因启动子甲基化)89例。统计两组患者后代发生同样肿瘤的情况,对患者的近期效果进行评价,分析T3基因启动子甲基化和肿瘤易感性与预后的相关性,检测细胞周期和细胞凋亡率。结果研究组患者后代发生肿瘤比例显著高于对照组患者,差异有统计学意义(P<0.05)。对照组G0/G1期细胞比例显著高于研究组,S期的细胞比例显著少于研究组,凋亡率显著高于研究组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。研究组患者治疗有效率为78.3%,对照组患者为93.3%,两组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。MT3基因启动子甲基化与肿瘤易感性呈正相关,与预后状况、癌细胞周期和凋亡率呈负相关,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 MT3基因启动子甲基化和肿瘤易感性呈正相关,与患者预后情况呈负相关。

基于水量水质耦合模拟优化的渠井结合灌区多目标水资源优化配置模型与方法

为探究灌区考虑水质水量耦合模拟优化的水资源优化配置模型与方法,基于FloPy和Pymoo构建了水量水质耦合的多目标模拟优化模型。采用地下水数值模拟模型MODFLOW和溶质输移模型MT3D模拟了灌溉引起的地下水位变化和污染物的扩散过程,考虑灌溉收益、作物水分生产率、地下水位变幅和污染扩散4个目标,分别采用多目标遗传算法NSGA-Ⅱ和NSGA-Ⅲ对该问题进行求解,并对比分析了两种方法的实际应用效果。采用多准则分析评价方法TOPSIS(Technique for Order Preference by Similarity to Ideal Solution),推荐了灌溉方案。推荐灌溉方案在平水年和枯水年分别可以最大减少地下水位变幅56%和43%,最大减少污染扩散面积54%和40%。

沿海地区地下水模拟优化管理模型

针对中国一些沿海地区地下水超采及由此带来的海水入侵问题,将地表水补给、抽水量及地下水位等相嵌在一起,建立了沿海地区地下水模拟优化管理模型。将人工鱼群算法和基于MODFLOW2000的变密度地下水流及溶质运移模型耦合起来,对沿海地区地下水模拟优化管理模型进行求解。以山东省威海市节水示范区为例,验证模型的有效性和可靠性。结果表明,10、11、12月份抽水量最大,以后至第2年5月份依次是减少的;从区域分布上看,在临海区域1号井处抽水量是3500～1120m3/月,在其它井处是6540～2920m3/月;与现行方案相比,增加总有效供水1990m3,地下水平均水位升高0.29m,海水入侵问题能够得到解决。计算结果合理可行,为沿海地区地下水资源的科学管理和持续利用提供可靠依据。

TaqMan探针荧光定量PCR检测花生油中掺入棕榈油的研究

根据棕榈内源基因MT3-B设计引物和TaqMan探针，采用基因重组技术构建用于检测棕榈基因MT3-B的重组质粒作为绝对定量标准品，建立标准曲线，对花生油中掺入棕桐油1％～40％梯度混合油品提取DNA进行棕榈成分定量检测。结果表明，重组质粒标准品荧光定量标准曲线对数线性回归分析相关系数（R2）为0．996；花生油中掺入棕榈油达到5％时，可检出每亳升混合油品中棕榈MT3-B基因17．431copies，检测的重复性和特异性好。

干旱区竖井灌排下盐分运移对地下水质的影响——以新疆哈密盆地为例

利用MODFLOW和MT3DMS软件对竖井灌排下的地下水量与水质变化趋势进行了模拟。计算结果表明,尽管这一工程措施在一定时期内可起到控制地下水位与降低表层土壤盐分作用,但从长远来看,由于水平排水的缺失,盐分从土壤表层下移到了中下层而并未被彻底地排出灌区,仍会在包气带某一层位或地下水中富集。一旦灌区的外部条件发生变化,盐分上移则会使土壤盐碱化,下移则使地下水质恶化。因此,对于竖井灌排区来说,有必要建立一套相应的监测系统,实时调控地下水开采量与水位,寻求一个即可使耕作层盐分控制在一定范围内,地下水咸化速率不致过快,同时又保持一定径流排盐作用的平衡区域,可能是今后面临的一种选择,从而将水盐自然运移规律改变后引发的生态与环境危害限制在可控范围。

金属硫蛋白3对快速老化痴呆模型小鼠海马CA1区神经元细胞凋亡的影响

目的研究金属硫蛋白3(MT3)对快速老化痴呆模型小鼠(SAMP8)海马CA1区神经元细胞凋亡的影响及其机制。方法将7月龄SAMP8小鼠随机分成6组,分为痴呆组、3种浓度的MT3组、MT1组、空白对照组。快速老化小鼠对照(SAMR1)小鼠为正常对照组。连续腹腔注射28 d后灌注取脑,进行海马CA1区原位末端标记(Tunel)试剂盒和免疫组化(SP)试剂盒染色。结果痴呆组海马CA区神经元细胞凋亡指数明显高于正常对照组。高浓度MT3组凋亡指数最低,Bcl-2蛋白表达增强,Bax蛋白表达最低(P<0.01,P<0.05)。MT3组对Bax蛋白表达的抑制作用强于MT1对照组,而二组对Bcl-2蛋白表达的差异不显著。结论SAMP8小鼠海马结构存在大量神经元细胞凋亡,MT3通过减少Bax表达和增加Bcl-2表达,减少细胞凋亡,并有浓度依赖关系;且作用强于MT1。

快速老化痴呆模型小鼠海马细胞凋亡检测及金属硫蛋白3对其的影响

目的:研究快速老化痴呆模型小鼠(SAMP8)海马CA1区神经元细胞凋亡的变化及不同浓度的金属硫蛋白3(MT3)对其的影响,并且与金属硫蛋白1(MT1)作用相比较。方法:给予7月龄SAMP8小鼠腹腔注射3种浓度的MT3及MT1,28d后灌注取脑。进行海马CA1区Tunel试剂盒染色。结果:8月龄的SAMP8小鼠海马区神经元细胞凋亡指数明显高于对照组SAMR1小鼠。高浓度MT3组凋亡指数最低,差异有统计学意义。相同浓度MT3组和MT1对照组间差异无统计学意义。结论:SAMP8小鼠海马结构存在大量的神经元细胞凋亡;MT3有抑制细胞凋亡的作用,并有浓度依赖关系;MT3和MT1对细胞凋亡的影响无差异。

GMS在地下水污染迁移模拟中的应用

GMS(Groundwater Modeling System)作为目前国际上流行的三维地下水数值模拟的集成软件系统,具有模块多、功能全、使用范围广、建模过程直观、操作简便等特点。该研究详细介绍了GMS在地下水污染迁移模拟中的应用流程:首先,使用MODFLOW模块建立地下水流场模型;其次,使用MT3DMS模块建立溶质(污染物)运移模型;最后,使用MODPATH模块建立地下水流迹线示踪模型。使用GMS对污染物在地下水中的迁移进行模拟预测,对地下水环境的保护具有重要积极意义,也可为制定污染物防控方案提供科学支持和理论依据。

地表水-地下水溶质运移耦合模拟研究——以某赤泥堆场项目地下水环境影响评价为例

目前的地下水环境影响评价中,地表水体常作为边界条件,不能体现地表水中的溶质运移过程。本文以某一赤泥堆场项目为例,采用GMS软件中的MT3D-USGS模块的SFT程序包建立河流—地下水—溶质耦合模型,预测氟化物在运营期14年运移扩散情况,评价污染物对区域地表水和地下水的影响。结果表明:(1)模拟流场能较真实的反应研究区的地表水和地下水流动特征;(2)在正常工况条件下,氟化物对地表水和地下水的影响较小;(3)在岩溶塌陷的情况下,氟化物仅2d就可运移至季节性河流,在运移2369d后最大超标距离已经达到河流,且氟化物有沿河流向下游运移的趋势,第14年氟化物沿河流运移到下游河流及沿岸地下水含水层,形成一个随河流扩散的污染晕。