MTHFR C677T基因多态性对干预Hhcy后脑梗死复发的影响

目的观察5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)C677T基因多态性对干预高同型半胱氨酸血症后脑梗死复发的修饰作用。方法 363例合并Hhcy脑梗死患者,180例给予干预Hhcy及标准二级预防治疗,183例给予标准治疗。随访1a观察不同MTHFR基因型脑梗死干预Hhcy后卒中复发的情况。结果 CC型患者标准治疗+干预Hhcy组1a卒中复发率19.64%,与标准治疗组(21.8%)比较差异无统计学意义。CT基因型患者中标准治疗+干预Hhcy组卒中复发率18.42%,与标准治疗组(19.5%)比较差异无统计学意义。TT基因型中标准治疗+干预Hhcy组1a卒中复发率10.20%,标准治疗组26%,两种卒中复发率比较差异有统计学意义(P<0.05)。在TT基因型患者中,对影响卒中复发的单因素给予Logistics多因素分析,显示干预Hhcy治疗降低TT基因型卒中复发风险,OR值0.678。结论 MTHFR 677位TT基因型患者干预Hhcy后能够降低缺血性卒中复发风险。

TaqMan探针实时PCR检测人MTHFR基因C677T多态性方法的建立

目的建立TaqMan探针实时PCR检测人MTHFR基因C677T多态性的方法。方法设计一对MTHFR基因C677T多态位点的引物及TaqMan探针,采用TaqMan探针实时PCR扩增SNP分型方法检测唇腭裂患者及其父母共100人的MTHFR基因C677T多态性,与常规PCR-RFLP方法进行一致率比较,并对其特异性、敏感性和重复性以及成本-效益等进行评价,同时对部分实时PCR产物样本进行测序验证。结果运用TaqMan探针实时荧光PCR技术对MTHFR基因C677T多态性检测结果准确,特异性好,与常规PCR-RFLP方法结果具有高度一致性,Kappa=0.922>0.75(P=0.000);检测灵敏度可达2×103拷贝;重复性好、高通量、无污染、安全性好;随机样品TaqMan探针分型结果与测序结果完全一致。结论成功建立了TaqMan探针实时PCR检测人MTHFR基因C677T多态性的方法;此方法是常规临床诊断及大规模群体研究的良好平台。