MTH1抑制剂TH588对人恶性黑色素瘤A375细胞增殖与迁移的影响

目的探讨MTH1抑制剂TH588对人恶性黑色素瘤A375细胞增殖、迁移的影响。方法利用细胞培养手段培养人恶性黑色素瘤A375细胞;应用倒置显微镜法观察TH588对细胞形态的影响;采用CCK-8法检测不同浓度TH588(0、4、8、16、32、64μmol/L)对A375细胞的增殖抑制作用;采用集落克隆形成抑制试验观察对比高中低三种浓度(12.8、6.4、3.2μmol/L)TH588对A375细胞的增殖抑制作用;细胞划痕实验检验TH588对A375细胞迁移能力的影响。结果CCK-8检测结果显示,同一时间段不同浓度TH588组与空白对照组比较,细胞存活率均降低;32、64μmol/L TH588浓度下培养48、72 h时细胞存活率均低于同TH588浓度下培养24 h时。倒置显微镜法观察TH588作用于人恶性黑色素瘤A375细胞后,细胞明显皱缩,且边缘变得模糊,有碎片颗粒产生。集落克隆形成抑制实验表明,TH588对人恶性黑色素瘤A375细胞增殖有明显抑制作用。细胞划痕实验表明,经TH588作用后A375细胞划痕迁移距离在48 h内均较无干预的A375细胞迁移距离更短。结论TH588对人恶性黑色素瘤A375细胞的增殖及迁移有明显抑制作用,且低浓度的TH588便有较好的抑制效果。

MTH1抑制剂TH588对人乳腺癌细胞增殖及相关蛋白表达的影响

目的观察MTH1抑制剂TH588对人乳腺癌MCF-7及MDA-MB-231细胞增殖的影响,探讨其作用机制。方法MTT法检测不同浓度的TH588(0,8,16,32,64,128μmol/L)对乳腺癌MCF-7及MDA-MB-231细胞增殖的抑制作用,倒置显微镜观察TH588处理乳腺癌MCF-7及MDA-MB-231细胞后细胞形态学变化。集落克隆形成抑制实验观察不同浓度的TH588(0,3.2,6.4,12.8μmol/L)对乳腺癌MCF-7及MDA-MB-231细胞增殖的抑制作用。PI单染流式细胞术检测不同浓度TH588(0,32,64,128μmol/L)对乳腺癌MCF-7及MDA-MB-231细胞死亡的影响,Western blot检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达。结果在128μmol/L的TH588作用下,MCF-7细胞24,48,72 h的存活率分别为(67.32±4.34)%、(56.81±0.93)%和(30.86±1.46)%,MDA-MB-231细胞24,48,72 h的存活率分别为(63.35±0.49)%、(41.11±0.75)%和(29.15±0.85)%,与对照组(0μmol/L)比较,细胞的存活率明显降低(P<0.05)。在倒置显微镜下可观察到TH588作用于乳腺癌细胞后,细胞数目明显减少,细胞形态发生改变,细胞皱缩,有细胞碎片及颗粒物质形成,细胞边缘不清晰。集落克隆实验结果表明,TH588对乳腺癌MCF-7和MDA-MB-231细胞有明显的增殖抑制作用。PI结果显示,128μmol/L TH588处理MCF-7细胞和MDA-MB-231细胞48 h,细胞死亡率分别为52.8%和55.6%,与对照组相比细胞死亡率明显增高(P<0.05)。Western blot结果显示,TH588可下调Bcl-2蛋白的表达,并上调Bax蛋白的表达。结论 TH588对乳腺癌MCF-7和MDA-MB-231细胞有明显的增殖抑制作用,其机制可能是TH588抑制了MTH1的修复作用,激活Bax和抑制Bcl-2,从而引起乳腺癌细胞的凋亡。

EZH2抑制剂对恶性淋巴瘤细胞放疗抵抗、Th细胞分化及PD1/PD-L1表达的作用机制

目的探究Zeste基因增强子同源物(EZH)2抑制剂对恶性淋巴瘤细胞放疗抵抗、Th细胞分化及程序性死亡(PD)1/PD1配体(PD-L1)表达的作用机制。方法取对数生长恶性淋巴瘤放疗抵抗细胞株将其分为恶性淋巴瘤(A)组、多柔比星(B)组、EZH2抑制剂(C)组、EZH2抑制剂联合PD1/PD-L1抑制剂(D)组,酶联免疫吸附试验(ELISA)及流式细胞仪检测Th细胞分化相关因子,Western印迹检测PD1/PD-L1蛋白表达,Hoechst33258染色法、噻唑蓝(MTT)法及小室法检测恶性淋巴瘤细胞活性。结果与A组相比,B、C、D组细胞凋亡率、干扰素(INF)-γ水平明显升高,细胞增殖率、侵袭数量、白细胞介素(IL)-4水平、PD1、PD-L1蛋白表达明显降低(P<0.05),且C组比B组变化更明显,D组比C组变化更明显(P<0.05)。结论EZH2抑制剂可显著抑制恶性淋巴瘤细胞放疗抵抗,有效调控Th细胞分化,并抑制PD1/PD-L1蛋白表达。

核酸氧化损伤修复酶MTH1及其抑制剂的研究进展

MTH1酶属于Nudix水解酶,具有清理细胞核苷酸池内氧化嘌呤核苷酸,防止核酸氧化损伤的功能。多项研究表明MTH1酶在神经退行性疾病、抗衰老等,尤其是抗肿瘤方面发挥关键作用,有望成为抗肿瘤药物的新靶标。近年国内外有关MTH1酶抑制剂的研究也逐渐增多,该文概述了MTH1酶的转录和翻译、结构特点、催化机制、应用等各方面信息,特别是对其各类抑制剂的研究现状进行了较为全面的综述。

五元杂环并嘧啶类MTH1抑制剂的设计、合成及生物活性评价

在MTH1抑制剂TH287的基础上,采用闭环、骨架跃迁和生物电子等排等药物设计策略,结合计算机辅助药物设计方法,设计并合成了17个五元杂环并嘧啶类目标化合物(I_(1~10),II_(1~7))。采用孔雀石绿显色法评价了目标化合物对MTH1酶活性的影响,结果表明该类化合物具有良好的MTH1抑制活性,其中7个化合物的(I_3,I_4,I_(7~9))IC_(50)低于1μmol/L,可以作为新型MTH1抑制剂开展进一步的研究。

MTH1抑制剂TH287对胃癌细胞BGC-823的抑制作用及其机制

目的观察MTH1小分子抑制剂对胃癌细胞株BGC-823的作用及其机制。方法体外培养胃癌细胞株BGC-823,用不同浓度MTH1抑制剂TH287干预BGC-823细胞。CCK-8法和克隆形成实验检测BGC-823细胞增殖;划痕实验和Transwell实验检测BGC-823细胞迁移能力;流式细胞仪和线粒体膜电位检测细胞凋亡水平;Western blot检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax及PI3K/AKT信号通路相关蛋白表达水平;AKT磷酸化激活剂SC79预处理细胞验证TH287对PI3K/AKT信号通路的作用。结果CCK-8检测结果显示,TH287抑制BGC-823细胞活力,效果呈剂量和时间依赖性(P<0.05)。克隆形成实验结果显示,随着药物浓度的增加,细胞克隆形成数减少。划痕实验和Transwell实验结果显示,随着TH287浓度增加,BGC-823细胞迁移能力下降(P<0.05)。Annexin-Ⅴ/PI双染实验和线粒体膜电位检测结果显示,TH287诱导BGC-823细胞凋亡增加和线粒体膜电位下降(P<0.05);Western blot结果显示,TH287诱导凋亡相关蛋白Bcl-2/Bax比值下降(P<0.05),并且促进PI3K表达增加,AKT磷酸化水平上升(P<0.05);AKT磷酸化激活剂SC79预处理胃癌细胞发现,TH287对胃癌的抑制作用减弱,细胞凋亡减少,细胞活力增加。结论MTH1抑制剂TH287能够抑制BGC-823细胞增殖及迁移,并且可能通过调控PI3K/AKT信号通路调控BGC-823细胞凋亡。

MTH1抑制剂在癌症治疗中的研究进展

MTH1 (MutT homolog 1)作为一种焦磷酸酶,能够高效清理核苷酸池中的氧化核苷酸,从而保护快速增殖的癌细胞免受高水平ROS带来的致命损伤,但是正常细胞在缺乏MTH1酶时依旧能够通过其他替补途径修复DNA氧化损伤得以存活。在正常细胞及癌细胞中MTH1必要性的显著差异使得靶向MTH1治疗癌症这一疗法成为可能,临床前研究表明,MTH1活性被抑制后或者当MTH1缺乏时能够抑制多种癌症细胞的增殖,且未观察到明显的毒副作用,完美地弥补了传统癌症疗法的种种不足,为癌症疾病的彻底根治带来希望。本文将围绕癌症治疗的瓶颈、ROS与癌症及MTH1的关系、MTH1与癌症相关的功能作用、MTH1抑制剂的发展几点进行综述,旨在阐明癌症治疗手段的新发展,为新药开发奠定理论基础。

靶向MTH1抑制多发性骨髓瘤细胞增殖和诱导凋亡的作用研究

目的:检测MTH1在多发性骨髓瘤(MM)患者CD138阴性细胞(CD138^-)及CD138阳性细胞(CD138^+)中的表达,探讨MTH1抑制剂对MM细胞株U266细胞的形态、增殖和凋亡等细胞生物学特性的影响。方法:分离MM患者CD138^-及CD138^+并提取RNA,应用Q-PCR分别检测NUDT家族的表达情况。利用MM细胞系U266观察白细胞介素-6(IL-6)对MTH1表达变化的影响。在荧光显微镜下观察TH588作用于U266细胞48 h后的形态变化,用DAPI染色法观察细胞核的变化。应用荧光素酶活性检测TH588对U266细胞增殖的影响,应用流式细胞术检测TH588对U266细胞凋亡的影响。结果:MM患者CD138^+中MTH1、NUDT2、NUDT5及NUDT21表达较CD138^-高(P<0.05)。荧光素酶报告显示TH588处理U266细胞后,与对照组相比,荧光强度值明显降低,且药物浓度越大,荧光强度值越低(r=-0.91);应用IL-6能使MTH1表达水平增高,荧光显微镜下观察,TH588处理U266细胞48 h后,细胞出现皱缩、变小以及形状不规则等表现,DAPI染色后,TH588处理过的细胞呈现细胞核缩小、染色不均、花瓣状和放射状等凋亡特征;流式细胞术分析结果显示,TH588处理U266细胞48 h后,存活细胞比例明显降低(P<0.05)。结论:MTH1在部分MM患者的CD138^+中高表达,U266细胞在IL-6的作用下可见MTH1表达增高,MTH1抑制剂TH588对MM U266细胞株具有明显地抑制增殖和诱导细胞凋亡的作用。

细胞信号转导抑制剂对日本血吸虫感染小鼠Th1/Th2免疫偏移的调控

目的 观察酪氨酸蛋白激酶 (TPK)、蛋白激酶 C(PKC)和磷酯酰肌醇 - 3-激酶 (PI- 3K)特异性抑制剂(Tyrphostin- 2 5、D- sphingosine和 Wortmannin)分别特异性抑制 TPK、PKC和 PI- 3K后 ,对小鼠脾 CD4 + T淋巴细胞经虫卵可溶性抗原 (SEA)诱生 IFN- γ和 IL- 4的表达水平及对 Th1/Th2免疫偏移的影响。 方法 分别于小鼠感染日本血吸虫后 0、4、8和 12周 ,用单克隆抗体分离脾 CD4 + T淋巴细胞体外培养 ,并进行细胞信号转导抑制试验 ,用 EL ISA夹心法和硝酸还原酶法分别测定小鼠脾 CD4 + T淋巴细胞体外培养上清 IFN-γ、IL - 4和一氧化氮 (NO)表达水平。 结果 Tyrphostin- 2 5对 IFN-γ和 IL - 4水平的抑制作用均非常显著 (P<0 .0 1) ,D- sphingosine主要影响 IL - 4的表达 (P<0 .0 1) ,而 Wortmannin则主要影响 IFN-γ的表达 (P<0 .0 1) ,对反映 Th1/Th2免疫平衡的 Th2分化指数分析表明 ,D-sphingosine可使 Th2免疫应答优势减弱 ,而 Wortmannin则可使 Th2免疫应答优势增强。对脾 CD4 + T淋巴细胞培养上清 NO水平检测结果显示 ,NO水平动态与 IFN-γ相一致 ,NO水平主要受 TPK抑制剂 Tyrphostin- 2 5和 PI- 3K抑制剂Wortmaninn的影响 ,结合该两种信号分子抑制剂对 Th1/Th2细胞因子表达水平的作用结果分析 ,

疏肝养心针刺法对选择性5-羟色胺再摄取抑制剂治疗抑郁症的增效作用及其对炎性细胞因子的影响研究

目的探讨疏肝养心针刺法对选择性5-羟色胺再摄取抑制剂(SSRIs)治疗抑郁症的增效作用以及其对血清5-羟色胺(5-HT)及辅助性T1细胞(Th1细胞)/辅助性T2细胞(Th2细胞)分泌的炎性细胞因子的影响。方法选取2013年1—12月杭州市第七人民医院精神科住院的抑郁症患者120例为研究对象,采用随机数字表法分为药物组60例和针药组60例,另选取同时期体检健康者60例为正常组。药物组和针药组患者分别于治疗前及治疗后1、2、4、6周评定蒙哥马利抑郁评定量表(MADRS)评分,治疗后1、2、4、6周评定抗抑郁药副反应量表(SERS)评分,评估临床疗效及不良反应情况,正常组、药物组和针药组分别于治疗前、治疗后6周检测血清5-HT及白介素(IL)-1β、IL-6、IL-4、IL-10水平。结果治疗前,药物组与针药组患者MADRS评分比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后1、2、4、6周,针药组MADRS评分较药物组降低(P<0.05)。治疗后1、2、4、6周,针药组SERS评分较药物组降低(P<0.05)。治疗前,药物组和针药组血清5-HT、IL-4、IL-10水平较正常组降低,IL-1β、IL-6水平较正常组升高(P<0.05);药物组与针药组血清5-HT、IL-1β、IL-6、IL-4、IL-10水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后,针药组血清5-HT、IL-4、IL-10水平较药物组升高,血清IL-6水平较药物组降低(P<0.05)。结论疏肝养心针刺法能够快速、有效地增强SSRIs治疗抑郁症的临床疗效、减轻其不良反应,并能有效调节血清5-HT及Th1细胞/Th2细胞分泌的炎性细胞因子的失衡。

γ分泌酶抑制剂DAPT对过敏性鼻炎小鼠模型的影响及作用机制

目的观察γ-分泌酶抑制剂(3,5-二氟苯乙酰基)-L-丙氨酰基-L-2-苯基甘氨酸叔丁酯[(3,5-difluorophenylacetyl)-L-alanyl-L-2-phenylglycine tert-butyl ester,DAPT]对过敏性鼻炎小鼠模型的影响并分析其作用机制,为过敏性鼻炎寻求新的药物治疗提供理论基础。方法 32只无特定病原体(specific pathogen free,SPF)级BALB/c小鼠随机等量分成4组,标准喂养1周后,于第1、5、9、12天对小鼠进行处理:对照组给予标准的磷酸盐缓冲溶液(phosphate buffer saline,PBS) 0. 4 ml腹腔注射,模型组给予卵清蛋白(ovalbumin,OVA)混悬液0. 4 ml腹腔注射;并于第13~20天对不同组小鼠进行滴鼻处理:对照组小鼠给予标准的PBS溶液滴鼻,模型组用含10%OVA的PBS溶液滴鼻,均10μl/侧每天;二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide,DMSO)组和DAPT组小鼠的给药时间、剂量及用药均同模型组,并于每次给药前30 min腹腔分别注射DMSO和DAPT混悬液0. 4 ml。四组小鼠均在最后一次滴鼻后12 h时处死并收集标本。通过症状观察、HE染色、酶联免疫吸附等观察DAPT对过敏性鼻炎小鼠的影响并分析其作用机制。结果 DAPT组小鼠临床症状评分(2. 18±0. 56)与对照组接近(1. 75±0. 23),均明显低于模型组(6. 89±1. 2),差异有统计学意义(P<0. 05)。与模型组(13. 78±3. 06、7. 89±1. 38)和DOSM组(13. 26±0. 21、7. 17±0. 86)相比,DAPT组小鼠挠比次数、打喷嚏次数明显减少,分别为5. 57±0. 53、3. 25±0. 86,差异有统计学意义(P<0. 05)。模型组小鼠鼻腔黏膜中大量炎性细胞浸润,腺体增生明显,而DAPT组小鼠鼻腔黏膜已开始修复,与模型组相比,炎性细胞明显减少,腺体增生和间质水肿也明显减轻。DAPT组小鼠IgE的表达量(6. 741 2±0. 52)、IL-4的表达量(11. 279 5±0. 49)明显低于模型组(12. 132 7±0. 5、16. 563 4±0. 64)和DMSO组(12. 073 8±1. 30、16. 262 1±0. 50. 29),差异均有统计学意义(P<0. 05),与对照组表达量相比(6. 007 7±0. 91、10. 5729±1. 76)差异无统计学意义(P>0. 05);而DAPT组小鼠IFN-γ的表达量(9. 965 7±1. 68)则明显高于模型组(2. 557 0±1. 95)和DMSO组(1. 904 5±0. 48),差异有统计学意义(P<0. 05),与对照组表达量相比(11. 650 8±2. 36)差异无统计学意义(P>0. 05)。结论γ-分泌酶抑制剂DAPT能有效缓解过敏性鼻炎小鼠的过敏症状,改善鼻黏膜病理损伤和降低血清特异性抗体IgE的浓度;DAPT有可能通过调节Th1/Th2的平衡,促进Th0细胞向Th1方向分化,影响过敏性鼻炎的发生发展,对过敏性鼻炎有潜在的治疗价值。

加味导赤散对复发性口腔溃疡患者Th1/Th2平衡的调节作用

复发性口腔溃疡（recurrent oral ulcers,ROU）也称复发性阿弗他溃疡（recurrent ahthous ulcer,RAU）,是口腔黏膜常见的溃疡类疾病。RAU的患病率一直很高但是其病因和发病机制至今尚未被完全阐明[1,2]。临床以口腔黏膜反复出现孤立、圆形或椭圆形的浅表溃疡,局部灼热疼痛为特征属于中医＂口疮＂之范畴。已有的研究表明ROU的发病与炎症、

MMP-3/TIMP-1、Th17/Treg在类风湿关节炎中的作用及其临床意义

多种研究表明,基质金属蛋白酶-3(matrix metalloproteinase,MMP-3)的高表达在类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)滑膜、软骨和软骨下骨的细胞外间质的降解中充当重要角色。金属蛋白酶组织抑制剂-1(tissue inhibitors of metalloproteinase1,TIMP-1)与MMP-3特异结合,抑制MMP-3的活性,MMP-3/TIMP-1平衡对RA的临床结局有着重要作用。新的研究发现,抑制Th17细胞分化,维持Treg细胞(regulatory T cell)活性,调节Th17/Treg平衡,可为治疗RA提供新的作用靶点。进一步研究发现,RA早期患者外周血MMP-3与白介素17(Interleukin17,IL-17)表达明显升高,两者呈正相关,Treg的下降可影响MMP-3/TIMP-1的平衡。本文将对MMP-3/TIMP-1和Th17/Treg在RA中的作用机制及其临床意义作一综述。

热蛋白质组学分析鉴定TH588的靶标蛋白

通过对活性小分子靶标蛋白的鉴定,可以建立活性小分子与细胞表型之间的联系,阐明活性小分子的功能和作用机理,对小分子药物的研发具有重要意义。热蛋白组学分析(thermal proteome profiling,TPP)是基于蛋白-配体结合可以增加蛋白热稳定性这一原理发展的鉴定活性小分子靶标蛋白的新技术,相较于其他小分子靶点鉴定方法,其最大的优点是不需要对活性小分子进行化学修饰,极大地拓宽了该方法的应用范围。TH588是7,8-二氢-8-氧鸟嘌呤三磷酸酶(MTH1)的抑制剂,通过抑制MTH1活性,增加肿瘤细胞DNA的氧化损伤,抑制肿瘤细胞的增殖。前期研究表明,TH588可发挥MTH1非依赖的抗肿瘤功能,因此鉴定TH588的脱靶靶标对理解TH588的作用机制并进行相关的分子结构改造至关重要。本研究通过鉴定TH588在细胞中的蛋白靶标,系统地介绍TPP技术的实施和优化;并对鉴定的28个TH588直接靶标和53个间接靶标进行生物信息学分析,为探究TH588抗肿瘤的作用机制提供实验依据。

钠-葡萄糖协同转运蛋白2抑制剂治疗原发性膜性肾病的疗效及其对Th1/Th2的影响

目的探讨钠-葡萄糖协同转运蛋白2抑制剂(SGLT2i)治疗原发性膜性肾病的疗效及其对Th1/Th2的影响。方法采用单中心随机对照研究,选取2022年1月至2023年12月在贵阳市第一人民医院肾穿刺活检或经抗磷脂酶A2受体抗体检测确诊原发性膜性肾病的初治患者48例。随机分为两组:血管紧张素Ⅱ受体阻滞剂(ARB)联合SGLT2i组(治疗组,口服厄贝沙坦300 mg/d和达格列净10 mg/d)、ARB组(对照组,口服厄贝沙坦300 mg/d),每组24例。收集患者的基本信息,以及肾功能、血脂、血糖、T淋巴细胞亚群Th1和Th2等实验室指标基线数值,并于治疗4周、8周、12周时复查,比较分析SGLT2i的疗效及其对Th1/Th2的影响。结果治疗组原发性膜性肾病患者的临床疗效总有效率高于对照组(95.93%比70.83%,P<0.05)。治疗组患者治疗4周、8周、12周时的24 h尿蛋白水平均低于对照组[(2081.24±977.51)mg比(2577.25±1286.44)mg,(1776.50±676.24)mg比(2163.25±620.44)mg,(812.44±383.25)mg比(1681.21±477.58)mg,P均<0.001]。治疗组患者治疗8周、12周时的血清白蛋白水平亦均高于对照组[(37.53±3.87)g/L比(32.52±3.69)g/L、(38.12±4.13)g/L比(33.26±4.01)g/L,P均<0.001],而治疗组患者治疗12周的总胆固醇水平低于对照组[(5.12±0.84)mmol/L比(6.41±0.62)mmol/L,P<0.001];治疗组患者治疗8周、12周的甘油三酯亦均低于对照组[(1.62±0.81)mmol/L比(2.01±0.53)mmol/L、(1.50±0.91)mmol/L比(1.99±0.74)mmol/L,P均<0.001]。此外,治疗组患者治疗12周时的Th1/Th2比值高于对照组[(1.01±0.31)比(0.38±0.19),P<0.001]。结论SGLT2i可以降低原发性膜性肾病患者的蛋白尿水平,改善血脂代谢,提高Th1/Th2比值。

DNA修复酶MTH1抑制剂研究进展

MTH1是一种DNA氧化损伤修复酶,主要负责"清理"核苷酸池中氧化损伤的脱氧核苷三磷酸(d NTPs),以防其掺入DNA复制中而造成碱基错配。研究表明,MTH1与肿瘤细胞的生存密切相关,而正常细胞的生长与存活则不依赖于MTH1。所以,以MTH1为靶点开展抗肿瘤新药研发,已逐渐受到人们的关注。抑制MTH1,为肿瘤治疗开辟了一条新途经。简介MTH1的结构和功能及其与肿瘤的关联,着重对近年来MTH1抑制剂的发现过程和研究进展作一综述,探究小分子MTH1抑制剂与MTH1蛋白的作用模式,为MTH1抑制剂的设计提供思路。

PARP-1抑制剂5-AIQ对实验性结肠炎小鼠Treg/Th17的调节作用

[目的]探讨聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1(PARP-1)抑制剂5-氨基异喹啉酮(5-AIQ)对葡聚糖硫酸钠(dextran sodium sulfate,DSS)诱导的实验性结肠炎小鼠Th17/Treg平衡的调节作用及其机制.[方法]将30只C57 BL/6 J小鼠随机分为3组:空白组、DSS组、5-AIQ组,每组10只;小鼠自由饮用质量浓度为30 g/L的DSS共7d,组建UC模型.空白组:正常饮水的同时给予0.9%氯化钠溶液,腹腔注射7 d;DSS组:造模同时给予0.9%氯化钠溶液,腹腔注射7 d;5-AIQ组:造模同时给予5-AIQ(1.5 mg/kg),腹腔注射7d.观察各组小鼠体质量、大便黏稠度及出血情况、计算结肠炎相关的疾病活动指数(disease activity index,DAI)和结肠组织病理评分,RT-PCR检测小鼠结肠组织中的炎症因子IL-10、IL-17、IL-21、IL-35,同时检测小鼠结肠组织中Th17和Tregs细胞分化相关转录因子RORγt、STAT3、Foxp3、Smad3表达.[结果]与DSS组相比,空白组和5-AIQ组中DAI降低(P<0.01);5-AIQ组结肠病理损伤明显改善;与空白组相比,DSS组IL-10、IL-35、Foxp3、Smad3蛋白下调,IL-17、IL-21、RORγt、STAT3蛋白上调;5-AIQ组与DSS组比较,IL-10、IL-35、Foxp3、Smad3蛋白上调,IL-17、IL-21、RORyt、STAT3蛋白下调,差异有统计学意义(P<0.01).[结论]PARP-1抑制剂5-AIQ可能通过调控实验性结肠炎小鼠Treg/Th17免疫平衡起到抑制肠道炎症,保护结肠黏膜的作用.

γ-分泌酶抑制剂通过调节Th1和Th2反应减轻过敏性肺炎

研究证实γ-分泌酶抑制剂（GS1）能有效阻断Notch信号通路，在T辅助性（Th）效应细胞的分化和功能调节中起重要作用，而且CD4^＋T细胞的一个亚群可能在哮喘的发生发展中起关键作用。最近韩国学者Kang JH等在该方面作了深入研究，研究发表于Am J Respir Crit Care Med上。

γ分泌酶抑制剂阻断Notch-Hes1信号通路对银屑病样皮炎小鼠γδT17细胞表达的影响

目的探讨γ分泌酶抑制剂阻断Notch-Hes1信号通路对银屑病样皮炎小鼠γδT17细胞表达的影响.方法将45只健康雄性SPF级BALB/c小鼠按照简单随机抽样法等分为对照组、模型组和干预组,模型组和干预组小鼠背部脱毛区均每日外涂5%咪喹莫特乳膏62.5 mg,干预组还在外用咪喹莫特后立即接受γ分泌酶抑制剂(DAPT)10 mg/kg腹腔注射,每日1次;对照组仅每日外涂等剂量白凡士林.共处理6d,采用银屑病皮损严重程度指数(PASI)评估皮损变化.第7天麻醉小鼠心脏取血,取脾脏及皮肤组织,制备单细胞悬液,比较计算各组小鼠脾指数,苏木精-伊红染色观察皮肤组织病理学改变.流式细胞仪检测脾脏及皮肤组织中γδT17细胞比例,实时定量反转录PCR检测脾细胞悬液中Hes1 mRNA表达水平,酶联免疫吸附实验检测血清中白细胞介素17A(IL-17A)含量.采用单因素方差分析和重复测量的方差分析比较各组间指标差异,Pearson相关分析评价不同指标间的相关性.结果末次处理24h后,肉眼观察显示,干预组小鼠银屑病样皮炎改变明显轻于模型组,PASI显著低于模型组,且表皮增厚及真皮炎细胞浸润程度明显轻于模型组.模型组小鼠脾指数(12.534±1.636)、脾脏(24.659%±4.603%)及皮肤组织γδT17细胞比例(22.127%±5.670%)、脾脏Hes1 mRNA表达水平(4.867±0.543)、血清IL-17A含量[(22.478±2.776)ng/L]均明显高于对照组(P<0.01);干预组上述指标分别为9.449±1.040、14.966%±5.770%、13.631%±5.946%、2.541±0.347、(18.639±1.816)ng/L,均显著低于模型组(P<0.01).模型组及干预组小鼠脾脏γδT17细胞比例与血清IL-17A含量均呈正相关(r值分别为0.56和0.53,均P<0.05),皮损γδT17细胞比例与PASI均呈正相关(r值分别为0.56和0.52,均P<0.05),脾脏Hes1 mRNA表达水平与γδT17细胞比例(r值分别为0.61和0.58)、血清IL-17A含量(r值分别为0.60和0.54)均呈正相关(P<0.05).结论γ分泌酶抑制剂阻断Notch-Hes1信号通路能够明显抑制银屑病样皮炎小鼠γδT17细胞的表达,减轻银屑病样皮炎损害.

吸入脂氧素A4对支气管哮喘小鼠气道炎症调节Th1／Th2失衡的影响

白三烯（leukotriene）在支气管哮喘（简称哮喘）的病理发展过程中扮演着重要角色，应用白三烯受体拮抗剂或5-脂氧化酶抑制剂治疗哮喘，已取得公认的疗效。近年来已证明，脂氧素（lipoxins）是人体内拮抗白二烯的大然生理性物质，对于气道高反应性及炎症反应有多方面抑制作用。静脉或口服脂氧素A4及其类似物可治疗哮喘，迄今尚未见吸入脂氧素A4治疗动物哮喘的报道。我们应用脂氧素A4吸入干预小鼠哮喘模型，现将结果报道如下。