转移抑制基因MTSS1在结肠癌组织中的表达及其意义

目的探讨肿瘤转移抑制候选基因MTSS1在国人结肠癌发生发展中的作用及临床意义。方法应用组织芯片和免疫组织化学技术检测185例结肠癌组织及其对应癌旁组织中MTSS1的表达,并分析其与临床病理学特征之间的关系。结果 MTSS1在癌旁组织和癌组织中的表达率分别为100.0%和45.9%,MTSS1缺失表达与肿瘤的分化程度、淋巴结转移、疾病进展相关(P<0.05)。结论 MTSS1缺失表达是肿瘤发生的晚期事件,在肿瘤转移过程中发挥了重要作用。

MTSS1和Gli1蛋白在子宫内膜腺癌组织中的表达及意义

目的探讨MTSS1和Gli1蛋白在子宫内膜腺癌组织中的表达及临床意义。方法选取2010年5月—2015年7月我院妇产科收治的36例子宫内膜腺癌患者的病变内膜组织作为研究组,同时选取36例因子宫平滑肌瘤行全子宫切除术的患者的子宫内膜组织作为对照组,采用免疫组化法检测2组研究样本中MTSS1和Gli1蛋白的阳性表达情况。结果研究组患者的病变组织中MTSS1蛋白阳性表达率明显低于对照组患者子宫内膜组织(P<0.05);Gli1蛋白阳性表达率明显高于对照组患者子宫内膜组织(P<0.05)。结论 MTSS1蛋白在子宫内膜腺癌组织中低表达,Gli1蛋白在子宫内膜腺癌组织中高表达,两种蛋白可能与子宫内膜癌的发生、发展存在密切关系,有可能成为子宫内膜腺癌诊断及病情监测的辅助参考指标。

MTSS1在胃癌中的表达及临床意义

目的:探讨MTSS1在胃癌中的表达及其与临床病理关系。方法:用免疫组化方法及Western Blot方法检测MTSS1在胃癌及癌旁正常组织中的表达,并分析其与胃癌临床及病理参数的相关性。结果:通过对50例胃癌及癌旁正常组织的免疫组化染色表明,MTSS1在胃癌组织中39例呈阳性表达,但在正常组织中仅12例阳性表达。Western Blot结果显示50组肿瘤与正常组织的蛋白表达水平对比中有35组病例肿瘤中MTSS1表达水平明显高于正常组织。统计分析表明MTSS1在胃癌中的表达较正常组织明显增高(P=0.000),MTSS1的表达与胃癌的TNM分期、淋巴结转移、远处转移及肿瘤的浸润深度有关,而与患者的性别、年龄,肿瘤的部位、尺寸、分化程度无关。结论:MTSS1可能在胃癌的发生、发展中发挥着重要作用。

去神经支配大鼠海马内MTSS1的表达变化

目的:探讨切割穹窿海马伞去神经支配大鼠海马内转移抑制蛋白1(metastasis suppressor 1,MTSS1)的表达变化。方法:SD大鼠随机分成正常组和切割穹窿海马伞后1、3、5、7、14 d组,采用Real-time PCR和免疫荧光组织化学技术观察穹窿海马伞切割后海马内MTSS1 mRNA的表达变化和MTSS1阳性细胞的分布情况。结果:(1)Real-time PCR结果显示:海马内MTSS1 mRNA的相对表达量在切割后3 d开始升高(P<0.05),5 d达到最高水平(P<0.01),7 d恢复至正常水平;(2)免疫荧光组织化学染色结果显示:MTSS1阳性细胞主要表达于海马齿状回门区及颗粒下层中,切割后5 d MTSS1阳性细胞数开始增多(P<0.01),7 d继续增多并达到高峰(P<0.01),14 d时开始下降至正常水平。结论:结合本课题组以往的工作,上述结果提示切割穹窿海马伞后MTSS1的高表达可能与海马神经再生过程中神经干细胞向神经元的分化有关。

MTSS1在胃癌组织中的表达及对胃癌细胞增殖凋亡的作用研究

目的探讨肿瘤转移抑制候选基因(MTSS1)在胃癌组织中的表达水平及对胃癌细胞增殖凋亡的作用。方法 Western Blot检测胃癌组织及对应的癌旁组织中MTSS1蛋白表达水平。通过细胞转染的方法将过表达载体pEGFP-N1-MTSS1、空载体pEGFP-N1转染至胃癌细胞中,MTT法检测转染48 h的细胞增殖情况,流式细胞术检测转染48 h的细胞凋亡情况,Western Blot检测转染48 h细胞中Cleaved Caspase-3、HES1、NICD1、NICD2蛋白表达水平。胃癌细胞与NOTCH信号通路抑制剂S2188作用48 h后,检测细胞凋亡及细胞中Cleaved Caspase-3、HES1、NICD1、NICD2蛋白表达水平。结果胃癌组织中MTSS1蛋白水平明显低于癌旁组织(P=0.000);pEGFP-N1-MTSS1组细胞存活率明显低于pEGFP-N1组(P=0.000);pEGFP-N1-MTSS1组细胞凋亡率明显高于pEGFP-N1组(P=0.000);pEGFP-N1-MTSS1组细胞中Cleaved Caspase-3、HES1、NICD1、NICD2表达水平与pEGFP-N1组比较,差异均有统计学意义(P=0.000);NOTCH信号通路抑制剂S2188作用胃癌细胞48 h后,抑制剂组的细胞凋亡率明显高于对照组(P=0.000),两组的Cleaved Caspase-3、HES1、NICD1、NICD2蛋白表达水平比较,差异均有统计学意义(P=0.000)。结论 MTSS1在胃癌组织中表达下调。MTSS1能促进胃癌细胞凋亡,抑制胃癌细胞增殖,作用机制与NOTCH信号通路有关。

结肠癌组织MTSS1与SOX2在结肠癌组织中的表达及其与临床病理的关系

目的分析转移抑制因子1(MTSS-1)及胚胎干细胞关键蛋白(SOX2)在结肠癌组中表达及与临床病理关系。方法选取2016年1月~2017年6月秦皇岛市第一医院收治的80例结肠癌患者作为研究对象,采用二步法免疫组织化学方法检测患者的结肠癌组织中MTSS1及SOX2表达水平,并分析临床病理特征与MTSS1及SOX2表达的相关性。结果结肠癌组织中MTSS1及SOX2蛋白阳性表达率均显著低于癌旁毗连区,差异有统计学意义(P<0.01);不同分化程度、淋巴结转移、Dukes分期患者肿瘤组织中MTSS1及SOX2阳性表达率差异有统计学意义(P<0.01);分化程度是MTSS1阳性表达的危险性因素(P<0.05),分化程度及淋巴结转移是SOX2阳性表达的危险性因素(P<0.05)。结论结肠癌组织MTSS1与SOX2在结肠癌组织中的表达与分化程度密切相关,且淋巴结转移与SOX2表达显著相关。

MTSS1及Gli1在食管鳞癌组织中表达及其相关性

目的检测食管鳞癌组织中肿瘤转移抑制蛋白(MTSS)1及胶质瘤相关癌基因蛋白(Gli)1的表达水平,探讨MTSS1和Gli1的相关性。方法应用免疫组织化学SP法和原位杂交方法检测136例食管鳞癌组织及其相应的96例癌旁不典型增生组织和136例正常食管黏膜组织中MTSS1、Gli1蛋白及mRNA的表达水平。结果MTSS1蛋白和mRNA在食管鳞癌组织中的阳性表达率显著低于癌旁组织和正常食管黏膜组织,两两比较差异均有统计学意义(P<0.05)。Gli1蛋白和mRNA在食管癌组织中的阳性表达率显著高于癌旁不典型增生组织和正常食管黏膜组织,两两比较差异均有统计学意义(P<0.05)。有淋巴结转移组食管鳞癌组织中MTSS1蛋白及mRNA阳性表达率均显著低于无淋巴结转移组(P<0.05);有淋巴结转移组食管鳞癌组织中Gli1蛋白及mRNA阳性表达率均显著高于无淋巴结转移组(P<0.05);Gli1和MTSS1蛋白在食管鳞状上皮细胞癌组织中的表达呈负向相关(r=-0.422,P<0.05),Gli1和MTSS1 mRNA在食管鳞状上皮细胞癌组织中的表达亦呈负向相关(r=-0.389,P<0.05)。结论MTSS1的低表达及Gli1的高表达可能参与食管鳞癌发生、发展。MTSS1及Gli1在食管鳞状细胞癌组织中的表达呈负相关,提示MTSS1的异常表达可能受Gli1基因的调节。

MiR-96-5p靶向调控MTSS1表达对结肠癌细胞恶性生物学行为的影响

目的探讨miR-96-5p对人结肠癌细胞生物学行为的影响及其作用机制。方法应用miRNA转染技术,将miR-96-5p抑制物(miR-96-5p inhibitor)及microRNA无关序列(miR-NC)转染入结肠癌HCT116细胞中;采用免疫荧光及RT-PCR验证转染效率后,分别利用MTT、划痕实验、Transwell、凋亡实验检测miR-96-5p对结肠癌细胞的增殖、迁移、侵袭、凋亡能力的影响;采用裸鼠皮下成瘤实验检测miR-96-5p对人结肠癌细胞成瘤能力的影响;miRNA靶基因预测软件分析miR-96-5p潜在靶目标并利用双荧光素酶报告基因和Western blot实验进行验证。结果免疫荧光及RT-PCR结果提示miR-96-5p inhibitor显著下调miR-96-5p在HCT116细胞中的表达。MTT、划痕实验、Transwell及凋亡实验结果提示下调miR-96-5p表达显著抑制结肠癌细胞的增殖、迁移、侵袭能力并且促进细胞发生凋亡。裸鼠皮下成瘤实验提示过表达miR-96-5p能够促进结肠癌细胞成瘤能力,下调miR-96-5p的表达能够明显削弱其成瘤能力。miRNA靶基因预测软件分析提示MTSS1可能为miR-96-5p目标靶基因;双荧光素酶报告基因验证了miR-96-5p对MTSSI的靶向调控,且Western blot实验结果提示下调miR-96-5p可明显促进MTSS1蛋白在结肠癌细胞中的表达。结论下调miR-96-5p的表达可抑制结肠癌细胞的增殖、侵袭、迁移能力并促进细胞发生凋亡,这种作用可能通过对MTSS1的靶向调控来实现。

MTSS1在宫颈鳞癌细胞中的表达及临床意义

目的探讨转移抑制因子1(MTSS1)在宫颈鳞癌细胞中的表达,并分析MTSS1在该疾病发生发展中的作用。方法选择我院接受治疗的60例宫颈鳞癌患者作为研究对象,取手术切除的蜡块组织标本作为观察组,选择同期宫颈正常组织标本60例作为对照组。采用Real-time PCR法比较两组MTSS1 mRNA表达水平,免疫组织化学法比较两组MTSS1阳性蛋白表达。结果观察组MTSS1 mRNA表达的相对定量值高于对照组,差异具有统计学意义(P <0.05)。观察组MTSS1阳性表达率为61.67%,高于对照组的18.33%,差异具有统计学意义(P <0.05)。结论宫颈鳞癌中MTSS1阳性表达升高,该基因可能在宫颈鳞癌的发生发展中发挥重要作用。

MTSS1和Hpa在结肠癌中的表达及其临床意义

目的研究转移抑制基因MTSS1及乙酰肝素酶Hpa在结肠癌组织中的表达水平,并探讨两者与结肠癌临床病理特征的关系。方法应用免疫组化EnVision法检测60例原发性结肠癌组织中MTSS1及Hpa蛋白的表达。结果 MTSS1在结肠癌组织中阳性表达率为18.3%(11/60),在肿瘤分期、有无淋巴结转移差异具有统计学意义(P<0.05),在结肠癌肿瘤不同组织学分型的表达差异无统计学意义(P>0.05);Hpa在结肠癌组织中阳性表达率为55.0%(33/60),与肿瘤分期、有无淋巴结转移比较差异有统计学意义(P<0.05),在结肠癌肿瘤不同组织学分型的表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论 MTSS1及Hpa的表达与结肠癌的浸润、转移密切相关,联合检测MTSS1及Hpa的表达水平对判断结肠癌恶性程度和预后具有一定的参考价值。

MTSS1基因对骨肉瘤细胞增殖、迁移和侵袭的影响及机制研究

目的探讨MTSS1基因在骨肉瘤组织中的表达情况,对骨肉瘤细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响及其机制。方法qRT-PCR、Western blot和免疫组化染色分别检测骨肉瘤组织及其对应的癌旁组织样本中MTSS1的mRNA和蛋白表达水平。构建MTSS1表达载体在骨肉瘤细胞株MG63中过表达MTSS1,采用CCK-8法检测细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞凋亡情况;通过Transwell细胞迁移和侵袭实验分别检测对细胞迁移和侵袭能力的影响;检测MMP2和MMP9的表达情况<结果骨肉瘤组织中MTSS1mRNA和蛋白表达显著低于癌旁组织MTSS1高表达能够抑制MG63细胞的增殖,抑制细胞凋亡。MTSS1表达上调显著降低细胞的迁移和侵袭能力MG63细胞中过表达MTSS1可以降低MMP2和MMP9的表达。结论MTSS1基因在骨肉瘤中低表达,MTSS1能够降低MG63细胞的增殖并促进细胞凋亡,可能通过抑制MMP2和MMP9的表达调控骨肉瘤的侵袭和转移。

肿瘤转移抑制蛋白MTss1 shRNA慢病毒载体的构建与鉴定

肿瘤转移抑制蛋白MTss1在小脑浦肯野神经元发育中表达受到调控,然而功能并不清楚。拟通过RNAi的方法降低内源MTss1的表达,为MTss1在神经元中的功能研究建立基础。针对小鼠MTss1基因(Mtss1)的mRNA序列,设计合成三对shRNA序列,克降到pSuper-Retro-Puro质粒中,瞬间转染GFP-Mtss1持续表达的N1H 313细胞株,western blot结果表明三对shRNA序列均可有效抑制MTss1的表达。进一步从pSuper质粒上酶切含shRNA的片段,克隆到慢病毒载体pLVTHM中并与包装质粒和衣壳质粒共转293T细胞,收集含病毒的上清液,测定感染效率。结果表明成功构建抑制MTss1基因表达的shRNA慢病毒载体,为内源MTss1的功能研究提供基础。

MTSS1与SOX2在结肠癌中的表达及其对术后患者预后的影响

目的探讨肿瘤转移抑制蛋白-1(MTSS1)与性别决定区Y Box2蛋白(SOX2)在结肠癌中的表达及其对术后患者预后的影响。方法选取2015年1月—2016年1月秦皇岛市第一医院普外科收治的60例行结肠癌根治术治疗患者作为研究对象;采用免疫组化法检测肿瘤组织及癌旁组织中MTSS1与SOX2表达情况,比较其阳性表达率,分析MTSS1及SOX2阳性表达对患者预后质量的影响。结果结肠癌组织中MTSS1及SOX2表达阳性率均低于癌旁组织,且差异有统计学意义(χ~2=9. 799、21.645,P <0. 01);不同肿瘤分化程度、血管侵犯、淋巴结转移患者肿瘤组织中MTSSI及SOX2阳性表达率比较差异有统计学意义(MTSS1:χ~2=15.276、20.447、11.198,P<0.0];SOX2:χ~2=17.284、16.168、48.534,P <0.01);肿瘤分化程度、血管侵犯与淋巴结转移与MTSS1、SOX2阳性表达显著相关(β=1.745、1.792、1.288、1.981、1.784、1.899,P均<0.05); MTSS1及SOX2阳性表达患者生存率明显高于阴性表达患者,且差异有统计学意义(χ~2=6.623,P<0.05)。结论MTSS1及SOX2在结肠癌中阳性表达与患者预后质量密切相关,可用于评估患者预后质量。

miR-23a和MTSS1在弥漫大B细胞淋巴瘤中的表达及其临床意义

目的:探讨miR-23a和Mtss1在大B细胞淋巴瘤中的表达情况及其临床意义。方法:选取弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)患者淋巴结组织标本65例为观察组,同期RH患者组织标本35例为对照组,采取实时定量荧光PCR法和免疫组化SP法检测miR-23a和Mtss1在两组淋巴结组织中的表达情况,分析miR-23a和Mtss1表达与DLBCL患者临床病理参数的关系及对患者预后的影响。结果:在观察组淋巴结组织中,miR-23a表达水平高于对照组,MTSS1水平低于对照组,差异具有统计学意义(t=7.693、16.853,P<0.01);通过相关性分析发现,miR-23a和MTSS1表达量之间呈负相关关系,差异具有统计学意义(r=-0.512,P<0.01);miR-23a、MTSS1表达与DLBCL患者年龄、性别无相关性(P>0.05),与患者Ann Arbor分期、有无淋巴结转移、IPI评分明显相关(P<0.05);通过对DLBCL患者随访3年发现,miR-23a高表达患者生存率明显低于低表达患者,MTSS1阳性患者生存率明显高于阴性患者,差异具有统计学意义(χ2=5.180、4.842,P<0.05)。结论:miR-23a和MTSS1在DLBCL中的表达呈负相关关系,且与DLBCL的生存率有关,miR-23a可能是MTSS1的一个靶基因。

MTSS1蛋白在舌鳞状细胞癌中表达的相关性及其临床意义

目的研究转移抑制基因MTSS1在舌鳞状细胞癌(TSCC)组织中的表达与其临床特征的相关性。方法应用免疫组织化学Envision方法检测MTSS1在20例癌旁正常黏膜及80例TSCC中的表达情况,分析其与TSCC的临床及病理参数之间的关系。结果 MTSS1在癌旁正常黏膜中的阳性表达水平较TSCC中显著升高(P<0.05),TSCC中MTSS1的阳性表达水平在有淋巴结转移组与无淋巴结转移组比较明显降低(P<0.05),在临床分期较高组与临床分期较低组比较明显降低(P<0.01)。此外,MTSS1与MMP-9和Ki-67蛋白的表达水平呈显著相关性。结论 MTSS1与TSCC肿瘤细胞的侵袭、转移有关。其指标与TSCC的临床分期和疾病进展有一定关系。

MIM／MTSS1基因与肿瘤关系的研究现状

肿瘤转移抑制基因1（MIM）最早被认为是一种抑制肿瘤转移的基因。之后深入研究发现，该基因除了肿瘤方面的作用，更重要的是作为一种细胞骨架蛋白而存在。本文主要综述关于MIM／MTSS1在细胞骨架、肿瘤方面的作用以及潜在的作用机制。

MTSS1与乳腺癌的相关性研究

肿瘤转移抑制因子是只能抑制自发以及大体上可见的肿瘤转移,而对原发肿瘤无影响的一类基因。目前研究发现肿瘤转移抑制因子1(metastasis suppressor 1,MTSS1)基因在乳腺癌的发生与发展过程中发挥重要作用。但MTSS1在乳腺癌的发生发展中的作用机制研究还不是十分清楚,还需继续深入的研究。

MTSS1、Ezrin及Annexin Ⅱ在结直肠癌中的表达及其临床意义

目的:探讨结直肠癌组织中肿瘤转移抑制蛋白1(MTSS1)、埃兹蛋白(Ezrin)及膜联蛋白Ⅱ(AnnexinⅡ)的表达及其与肿瘤转移的关系。方法:应用组织芯片和免疫组织化学技术检测240例结直肠癌组织中MTSS1、Ezrin及AnnexinⅡ的蛋白表达,分析3种蛋白的表达与结直肠癌各种临床病理特征的关系及三者的相关性。结果:MTSS1在中高分化、Dukes A+B+C期结直肠癌的阳性表达率显著高于低分化、Dukes D期结直肠癌(均P<0.01);Ezrin在中高分化、Dukes A+B+C期结直肠癌的阳性表达率高于低分化、Dukes D期结直肠癌(P<0.01,P<0.05);AnnexinⅡ在中高分化、Dukes A+B+C期结直肠癌的阳性表达率高于低分化、Dukes D期结直肠癌(均P<0.05)。经Spearman相关分析,MTSS1和Ezrin、Ezrin和AnnexinⅡ、AnnexinⅡ和MTSS1在结直肠癌中的表达均呈明显正相关(r=0.259,P<0.01;r=0.405,P<0.01;r=0.215,P<0.01)。结论:MTSS1、Ezrin及AnnexinⅡ在结直肠癌组织中的异常表达与肿瘤的转移密切相关,联合检测可作为一组有效的结直肠癌诊疗指标之一。

miR-182下调MTSS1表达促进三阴性乳腺癌侵袭及转移

目的miR-182在三阴性乳腺癌组织中高表达,但促癌作用相关靶基因的调控机制尚未明确。文中旨在探讨miR-182/MTSSl信号通路在三阴性乳腺癌中的生物学功能及调控机制。方法收集30例三阴性乳腺癌组织和邻近的癌旁组织标本,检测miR-182及MTSS1的相对定量表达;开展细胞功能实验研究miR-182及MTSS1对细胞增殖和侵袭的影响;Targetscan软件预测miR-182与MTSS1潜在的结合位点,双荧光素酶报告基因实验验证MTSS1为其靶基因。在MCF-7细胞转染miR-182后,RT-PCR及Western blot方法检测靶基因MTSS1表达及蛋白水平变化,验证miR-182对MTSS1的靶向调控。结果 miR-182在三阴性乳腺癌组织中表达显著高于癌旁组织,差异有统计学意义[(5.618 ± 2.767)”s (1.315 ± 0.403),P=0.000];而MTSS1在癌组织中表达显著低于癌旁组织,差异有统计学意义(t=2.961,P=0.006)o过表达miR-182或沉默MTSS1表达可显著促进乳腺癌MCF-7细胞增殖与迁移,与对照组相比,差异具有显著统计学意义(P<0.01);抑制miR-182或过表达MTSS1可显著抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖及迁移,与对照组相比,差异具有显著统计学意义(P<0.01)。双荧光素酶报告基因实验验证,在MTSS1基因的1083-1089碱基序列为miR-182靶结合点;内源基因表达量结果表明,转染miR-182后MCF-7中MTSS1表达量较对照组明显降低,差异有统计学意义(t=-5.918,P=0.027)o 结论miR-182与MTSS1基因靶向结合,下调MTSS1表达,促进细胞增殖及迁移,参与三阴性乳腺癌生物学转移过程。