四甲基偶氮唑盐法评价牙体修复性纳米羟基磷灰石复合材料的体外细胞毒性

背景:越来越多的新型材料被纳入口腔领域应用的视野,对生物材料进行生物相容性评价是进入临床试验前的重点研究内容。目的:通过体外细胞毒性实验评价自制牙体修复性纳米羟基磷灰石复合材料的生物相容性。方法:根据ISO标准,采用四甲基偶氮唑盐比色法行体外细胞毒性实验,阴性对照组为DMEM培养液,阳性对照组为含有0.1%苯酚的DMEM培养液,实验组为受试材料的浸提液。测试人牙龈成纤维细胞在牙体修复性纳米羟基磷灰石复合材料浸提液中培养1,3,5d的吸光度值,观察细胞形态变化,计算细胞相对增殖率,判断细胞毒性的级别。结果与结论:实验组体外细胞毒性实验吸光度值均与阴性对照组差异无显著性意义(P>0.05),与阳性对照组差异有显著性意义(P<0.01),自制牙体修复性纳米羟基磷灰石复合材料体外细胞毒性级别为0～1级,初步认为其具有良好的生物相容性。

四甲基偶氮唑盐比色法测定脑源性神经营养因子生物学活性的研究

目的:探索四甲基偶氮唑盐(methylthiazolyl tetrazolium,MTT)实验方法的最佳条件,并检测脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)的生物学活性。方法:根据MTT法的测定原理,采用三因素(细胞数量、MTT浓度、MTT染色时间)三水平的正交实验设计;并依据MTT的最优条件测定BDNF的生物活性。结果:MTT比色法检测SH-SY5Y细胞活性的最优条件为:每孔细胞数:(0.2×108个/L,100μl),MTT的染色时间(6小时),MTT的剂量(5g/L)。在ATRA诱导SH-SY5Y细胞产生TrkB受体后,随着BDNF浓度的增加,吸光值也增加,当BDNF浓度增加到50μg·L-1后,随着BDNF浓度的增加,吸光值增加并不显著。结论:建立了MTT比色法的最佳条件,并应用于BDNF细胞因子的活性检测中,在BDNF浓度为50μg·L^(-1)时。

四甲基偶氮唑盐法用于非小细胞肺癌药敏试验条件的筛选

目的筛选非小细胞肺癌药敏试验的条件。方法取25例非小细胞肺癌患者的瘤细胞，用四甲基偶氮唑盐（MTT）法观察9种化疗药物，在不同浓度、不同时间对瘤细胞的敏感性。结果9种化疗药物对瘤细胞的敏感性，有随着药物浓度的增加、作用时间的延长而增高的趋势，但每个药物都有各自的特点。结论非小细胞肺癌细胞MTT法药敏试验的浓度应为临床用药量的计算值，药物作用时间应以48h为宜。

四甲基偶氮唑盐比色法测定人外周血NK细胞活性的改进

四甲基偶氮唑盐比色法测定人外周血ＮＫ细胞活性的改进杨建英李红育徐以珍（甘肃省地方病防治研究所，兰州７３００３０）关键词效靶比例（Ｅ／Ｔ）四甲基偶氮唑盐自然杀伤细胞自然杀伤细胞（ＮＫ）活性检测已作为临床观测肿瘤、病毒感染、免疫功能异常等常用指标之一。检...

四甲基偶氮唑蓝比色法测定促肝细胞生长素对SMMC-7721细胞的作用

目的：建立一种用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法测定促肝细胞生长素对SMMC-7721细胞的促生长作用，以测定其生物活性的方法。方法：在体外采用MTT法，观察促肝细胞生长素在不同浓度（6．2～800．0mg·L^-1）及不同的培养时间（24，48，72h），对不同浓度SMMC-7721细胞（1．5～100．0）×10^3个·mL^-1生长的影响作用，并考察了此方法的重复性、与对人胃癌MGC-830及结肠癌HT-29细胞相比较的特异性及与法定^3H-TdR掺法比较的相关性。结果：MTT法测定结果表明，浓度为100mg·L^-1的促肝细胞生长素在培养时间为48h时。对细胞浓度为2．5×10^4个·mL^-1的SMMC-7721细胞促生长作用最明显（刺激指数SI值≥6．0），此方法重复性好，并对SMMC-7721细胞具有特异性，与^3H-TdR掺法比较测定的SI值差异无显著性。结论：MTT法适用于促肝细胞生长素的活性测定。

骨肉瘤化疗药物体外四甲基偶氮唑盐药敏的实验研究

目的 探讨卡铂 (CBP)和其它抗骨肉瘤基本药物对OS_732细胞株的抑制作用。方法 应用体外四甲基偶氮唑盐药敏试验 ,选用CBP、顺铂 (CDP)、阿霉素 (ADM)和氨甲喋呤 (MTX) ,参考临床所能达到的血浆最大理论浓度设定不同浓度梯度 ,观察它们对OS_732细胞株的抑制率。 结果 上述药物在体外均有一定的抑瘤作用 ,其中以CDP、CBP、CDP +ADM和CBP+ADM的抑制率较好 (平均值分别为82.86%、80.85%、81.92 %和82.30% ) ,4组间的差别无显著性意义 (P>0.05) ;ADM次之 (66.63% ) ;MTX最差 (30.57% ) ,与前5组比较差别均有显著性意义 (均P<0.01)。 结论 临床使用的几种抗骨肉瘤药物对OS_732细胞株均有一定的抑制作用 。

四甲基偶氮唑蓝法测定肠毒素C活性初步研究

目的：探讨四甲基偶氮唑蓝（MTT）法替代升白实验测定肠毒素C（SEC）活性。方法：采用小鼠脾T淋巴细胞增殖试验，用MTT法对20批样品进行脾T淋巴细胞增殖活性测定，在酶联免疫仪上检测吸光度，与空白组比值作为生物活性标准指数。结论：MTT法可靠性、重复性好，易操作，适合替代升白实验作为高聚生的生物活性检测方法。

应用四唑盐比色法对义齿软衬材料的细胞毒性评价

四唑盐比色法(MTT assay)是通过比色测定细胞数量和活性的新方法.其敏感性与细胞计数法、同位素标记法相似.本文采用该法检测了三种义齿软衬材料(可见光固化、室温固化及热固化义齿软衬材料)对细胞的毒性作用.结果表明,3种材料的50%浓度浸渍液的细胞毒性程度为1～0级,100%浓度浸渍液的细胞毒性程度为2～0级,显示出较低的细胞毒性.

HSS体外生物学活性测定的MTT比色法优化及改进(英文)

筛选测定HSS体外生物学活性的MTT比色法的最佳实验条件。分析比较不同条件下MTT显色反应的特点 ,确定适用于人肝癌细胞株SMMC772 1的最佳实验条件 ,并采用优化条件检测不同剂量下HSS的体外生物学活性。结果表明SMMC772 1细胞数量与MTT比色法的吸光度成正相关 ,线性良好。正交实验优化条件为 :5× 10 4 cells/ml细胞密度 ,6h后加入HSS ,最适浓度为 10 0 μg/ml,作用 3 6h后加入MTT溶液。MTT用量 5 0 μg ,孵育时间 6h ,DMSO溶解反应产物Formazan ,于5 70nm处测定吸光值。在优化条件下测定HSS体外生物学活性 ,灵敏度明显高于已发表的方法。一定剂量范围内 ,活性随剂量增加而增大 ,超过一定剂量后活性反而下降。应用优化的MTT比色法 ,以SMMC72 2 1细胞株 。

MTT、WST-8法测定细胞生长抑制率的结果比较

体外培养的乳腺癌细胞给予不同浓度的A p igen in处理,72h后分别用M TT、W ST-8法检测细胞生长抑制率。结果两种方法测定的乳腺癌细胞M CF-7生长抑制率结果相似,但W ST-8法步骤少,操作更为简便,值得推广。

MTT比色法检测人肿瘤细胞辐射敏感性的体外研究

目的探讨MTT比色法在人肿瘤细胞辐射敏感性检测中的价值。方法用1、2、4和8Gy的γ射线照射肝癌细胞(HepG2)、食管癌细胞(EC-9706)和乳腺癌细胞(MCF-7),观察存活分数(SF)和平均致死剂量(D0)。结果γ射线剂量为2、4、8Gy时,HepG2和EC-9706的SF均显著低于MCF-7(P<0·05、<0·01);D0值HepG2(2·36Gy)<EC-9706(2·70Gy)<MCF-7(3·95Gy)。HepG2辐射敏感性最高,MCF-7最低。结论MTT法检测人肿瘤细胞辐射敏感性简便、快捷且准确性较高,对指导临床个体化放疗有重要作用。

MTT法检测银杏叶注射液对人脑微血管内皮细胞增殖的影响

[目的]观察银杏叶注射液对体外培养的人脑微血管内皮细胞增殖的影响。[方法]体外培养人脑微血管内皮细胞(HBMEC),采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定不同浓度银杏叶注射液对HBMEC增殖的影响。[结果]与对照组相比较,银杏叶注射液浓度为70 mg/L时,对血管内皮细胞无促增殖作用;浓度为140、210、280、350 mg/L时均具有促进血管内皮细胞增殖的作用,但各组之间相比较无统计学意义。[结论]银杏叶注射液具有促进人脑微血管内皮细胞增殖的作用。

MTT比色法的改良及其在LAK细胞活性检测中的应用

目的 :改良四甲基偶氮唑盐 (MTT)比色法 ,并用来检测淋巴因子激化的杀伤细胞 (LAK细胞 )活性。方法 :在MTT代谢产物甲瓒DMSO溶解后的最佳吸光度测定及效靶细胞不同孵育时间的比较等方面进行研究。结果 :MTT代谢产物甲瓒DMSO溶解后的最佳吸光度为 5 10nm ,效靶细胞最佳孵育时间为 4h。结论 :改良的MTT比色法优于常规的MTT比色法。

改良MTT方法测定垂体细胞活性

运用MTT方法测定正常垂体细胞活性。对MTT溶液的组成、溶解剂的种类等因素进行筛选，建立了适合测定正常大鼠垂体细胞活性的改良MTT方法。

MTT法检测雷公藤内酯醇对晶状体上皮细胞增殖的影晌

目的:研究雷公藤内酯醇对体外培养的牛晶状体上皮细胞增殖的抑制作用。方法:取第4代对数生长期的牛晶状体上皮细胞培养24h后,加入重组人表皮生长因子(终浓度50μg/L)和不同浓度的雷公藤内酯醇(40,20,10μg/L),分别作用6,12,24,48,72h后,采用MTT法观察雷公藤内酯醇对牛晶状体上皮细胞增殖的影响。结果:不同浓度的雷公藤内酯醇,于不同时间作用在处于增殖状态的LECs,其增殖抑制率升高呈现明显的时间及剂量依赖性。结论:雷公藤内酯醇对晶状体上皮细胞增殖有明显的抑制作用在防止后囊混浊方面有广阔的前景。

食管癌术后MTT法肿瘤细胞药物敏感试验及临床意义

目的 探讨四甲基氮唑蓝 (MTT)法体外药物敏感试验对食管癌术后化疗的指导意义。 方法 采用MTT法对 70例食管鳞癌患者术后新鲜食管癌标本作体外细胞培养 ,采用常用的 5种化疗药物单独及联合应用 ,测定药物敏感度。 结果 不同肿瘤个体对同一药物、同一个体不同药物的敏感度均不同 ,单独用药者癌细胞对羟基喜树碱和丝裂霉素较敏感 ,联合用药者的总体敏感度明显高于单独用药者。 结论 MTT法体外药物敏感试验具有指导食管癌患者术后化疗的作用 ,减少了用药的盲目性 ,从而提高化疗疗效。