基于MTT比色和响应面法优化侧孢短芽孢杆菌最大活菌数培养条件

目的:探索获得侧孢短芽孢杆菌(Brevibacillus laterosporus)最大活菌数的最佳培养基成分及培养条件。方法:在建立MTT比色法与平板计数法的相关回归方程基础上,对获得最大活菌数的侧孢短芽孢杆菌最适培养基成分(碳源、氮源、无机盐)和培养条件(初始pH、温度、接种量、磷酸二氢钾)进行优化。结果:MTT比色法与平板计数法对活菌数测定结果表现出显著的线性关联(R^(2)>0.999);麦芽糖、氯化钙、初始pH、磷酸二氢钾为显著影响因子,最佳发酵条件为麦芽糖8.75 g/L,氯化钙0.17 g/L,初始pH 7.07、磷酸二氢钾3.73 g/L,此条件下活菌数为8.12×10^(8)CFU/mL,与理论活菌数(8.25×10^(8)CFU/mL)无显著差异。结论:基于MTT比色和响应面法优化侧孢短芽孢杆菌最大活菌数培养条件,优化后的活菌数较优化前提高了3.02倍。

阻力带MTT技术在ACL重建术后肌肉萎缩中疗效分析

阻力带MTT技术在ACL重建术后肌肉萎缩中的应用。方法 对收入的ACL重建术患者予以治疗研究,对照组接受常规术后管理,观察组联合阻力带MTT技术管理,对比患者肌肉萎缩防治效果。结果 较对照组,观察组的临床综合治疗有效率高且患者的并发症发生率较低;患者治疗后的自理、疼痛、肌力、平衡指标改善结果较好;患者的Lysholm膝关节指标显著改善,观察组结果优于对照组。结论 阻力带MTT技术可以辅助ACL重建术后改善机体功能,防治肌肉萎缩,增强膝关节功能,值得推广。

“开通玄府、养血柔筋”中药结合MTT医学训练式治疗对前交叉韧带重建术后康复疗效观察

目的:分析在前交叉韧带重建术后应用“开通玄府、养血柔筋”中药结合MTT医学训练式治疗的疗效。方法:纳入2021年1月~2023年6月漳州市中医院骨伤科收治的180例接受前交叉韧带重建术治疗的患者作为研究对象,应用随机数字表法分为对照组、MTT组和试验组各60例,分别行传统康复治疗、MTT医学训练式治疗和MTT医学训练式治疗+“开通玄府、养血柔筋”中药,比较三组康复治疗前后疼痛情况、膝关节主动关节活动度和肌肉力量情况、Tegner Lysholm膝关节评分。结果:康复治疗2周、4周、8周和16周后,三组疼痛VAS评分差异有统计学意义(P<0.05),其中试验组最低,其次为MTT组,对照组最高;三组膝关节主动关节活动度差异具有统计学意义(P<0.05),其中试验组最大,其次为MTT组,对照组最小。康复治疗16周后,三组慢速测试和快速测试两个模式下的膝关节屈伸肌峰力矩、平均功率、总功、主动肌与拮抗肌峰力矩比值差异有统计学意义(P<0.05),其中试验组慢速测试和快速测试两个模式下的膝关节屈伸肌峰力矩、平均功率和总功最大,其次为MTT组,对照组最小;试验组慢速测试和快速测试两个模式下的主动肌与拮抗肌峰力矩比值最小,其次为MTT组,对照组最大;三组Tegner Lysholm膝关节评分差异有统计学意义(P<0.05),其中试验组最高,其次为MTT组,最低为对照组。结论:“开通玄府、养血柔筋”中药结合MTT医学训练式治疗对前交叉韧带重建术后康复疗效提升明显,可更好地缓解患者疼痛症状,促进其膝关节主动关节活动度和肌肉力量的恢复。

MTT法用于中药成分细胞毒性和增殖检测的干扰因素及控制措施

3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)法具有操作简单和成本低廉等优点,被广泛应用于中药成分的细胞毒性和对细胞增殖影响等研究。然而,细胞的数量和密度、MTT浓度和作用时间等实验条件会干扰检测结果的准确性。另外,由于中药成分种类繁多而且化学结构复杂,可能导致吸收光谱漂移、形成近似检测波长的吸收峰及干扰细胞代谢的活性等,影响MTT检测结果的准确性。对近年的相关文献进行整理,归纳和分析了影响MTT实验的实验条件、优化措施和质量控制,归类了检测需要注意的某些中药成分,总结了替代MTT法的其他实验及MTT与其他实验的联合应用,对应用中存在的问题进行了探讨和展望,期望为MTT法在中药成分相关实验中的合理应用提供参考。

6-巯基-5-三唑并[4,3-b]-s-四嗪(MTT)的密度泛函理论研究

采用密度泛函理论(Density functional theory,DFT),在B3LYP/6-31g(d)(C,H,N,S),Ag原子采用LanL2d赝势基组水平上对甲醛(HCHO)与4-氨基-5肼基-3-巯基-1,2,4-三唑(4-amino-5-hydrazino-3-mercapto-1,2,4-triazole,AHMT)衍生化反应生的成产物6-巯基-5-三唑并[4,3-b]-s-四嗪(6-mercapto-5-triazolo[4,3-b]-s-tetrazine,MTT)及其银配合物进行结构优化,优化结果表明MTT的结构是一个近平面结构.通过对频率计算,获得MTT分子及其银配合物的拉曼光谱,对400-1800 cm^(-1)波段内的拉曼光谱特征峰进行了指认.同时讨论了MTT分子的表面静电势,分析可能发生化学反应的位点.并采用含时密度泛函理论(Time Dependent density functional theory,TDDFT)对MTT分子与Ag3配合物的激发态进行了计算分析,并使用电荷转移光谱对Ag配合物与MTT之间电荷转移关系进行了研究.该研究对MTT分子的光谱测定和电子性质提供了理论基础.

熥敷中药联合MTT体系训练对前交叉韧带术后康复的影响研究

目的:对比熥敷中药联合MTT体系训练与单独MTT体系训练及传统训练方法对膝关节前交叉韧带(ACL)损伤患者术后康复功能恢复的影响。方法:采取实验对比法,选取在江西省人民医院骨科行早期康复介入的60例ACL术后1d患者,随机分为A、B、C三组,每组20例。A组采用熥敷中药联合MTT体系训练,B组单独使用MTT体系训练,C组采用传统方法。比较三组膝关节关节活动度(ROM)、视觉模拟评分(VAS)及Lysholm膝关节功能评分。结果:治疗后,三组ROM、VAS评分、Lysholm评分均较治疗前有明显的改善,差异具有统计学意义(P<0.05)。其中,A、B、C组ROM无明显差异,A组、B组VAS评分低于C组,Lysholm评分A组>B组>C组。结论:采用熥敷中药联合MTT体系训练可更有效控制膝关节ACL重建术后患者的疼痛,提升膝关节屈伸活动度及膝关节的整体功能。

MTT法检测积雪草苷脂质体凝胶剂对B16F10小鼠黑色素细胞活性的影响

目的探讨积雪草苷脂质体凝胶剂对B16F10小鼠黑色素细胞活性的影响。方法体外培养B16F10细胞,以不同浓度积雪草苷、积雪草苷普通凝胶剂、积雪草苷脂质体凝胶剂进行孵育,以四甲基偶氮唑盐法(MTT法)测定各组细胞的活力。结果积雪草苷、积雪草苷普通凝胶剂和积雪草苷脂质体凝胶剂均显示出体外降低B16F10小鼠黑色素细胞活力的作用;积雪草脂质体凝胶剂降低B16F10小鼠黑色素细胞活力的作用明显高于同等药物浓度的积雪草苷普通凝胶剂和相当药物浓度的积雪草苷。结论脂质体凝胶剂剂型有利于药物发挥疗效,积雪草苷脂质体凝胶剂能降低B16F10小鼠黑色素细胞活性,有望应用于治疗皮肤黑色素瘤。

低剂量CT扫描的MTT、CBV、CBF及TTP值对AIS诊断及溶栓后出血转化的预测价值分析

目的:研究低剂量CT扫描测定局部脑血流量(Cerebral blood flow,CBF)、局部脑血容积(Regional cerebral blood volume,CBV)、血液通过组织的平均时间(Mean transit time,MTT)、达峰时间(Time to peak,TTP)对急性缺血性卒中(Acute Ischemic Stroke,AIS)患者病变的诊断及对溶栓后出血转化(Hemorrhagic transformation,HT)发生的预测效能。方法:选取2020年1月至2022年12月期间于本院治疗的120例AIS患者作为研究组。另选取同期进行头颅CT检查的其他患者120例作为对照组。所有研究组患者均采取溶栓治疗,并根据治疗后脑出血的情况,将研究组进一步分为HT组以及非HT组。两组均采用低剂量CT灌注检查,分析两组以及不同HT患者的MTT、CBV、CBF及TTP值之间的差异,研究MTT、CBV、CBF及TTP值对AIS患者病变的诊断及对溶栓后HT发生的预测效能。结果:观察组的MTT、TTP均明显高于对照组,CBV、CBF均明显低于对照组。HT组的MTT、TTP均明显高于非HT组,CBV、CBF均明显低于非HT组。通过联合诊断分析,MTT、CBV、CBF及TTP水平联合检测对AIS诊断以及HT发生的预测特异度明显高于单独检测。ROC曲线分析显示,MTT、CBV、CBF及TTP水平的对AIS诊断临界值分别为3.78,125,45.02,4.52;MTT、CBV、CBF及TTP水平对治疗后HT的诊断临界值为4.36,1.01,40.45,4.77。结论:低剂量CT扫描测定MTT、CBV、CBF及TTP值对AIS患者病变的诊断及对溶栓后HT发生具有较高预测价值。

MTT,在保健与康复领域大有作为

随着现代社会生活节奏的加快和人口老龄化趋势的加剧,康复医学在医学领域占据举足轻重的地位,其重要性与日俱增。德国MTT医学运动康复体系,这一以标准化、流程化、精准可控的运动治疗为核心的康复技术体系,正是基于严谨的循证医学而建立。它凭借科学性和实效性,在康复领域得到了广泛的认可和应用,充分展示了其在提升康复效果、改善患者生活质量方面的巨大价值。体育保健与康复专业作为培养运动康复人才的重要途径,其康复评定技术课程的设置与教学方法融入MTT医学运动康复体系对于培养高质量的运动康复人才具有重要意义。

MTT法在抗病毒药物筛选中的应用

目的 :采用MTT法评价清热消炎复方制剂体外抗柯萨奇病毒 (CVB3 )、呼吸道合胞病毒 (RSV)效果。方法 :待正常细胞长成单层 ,用病毒感染 ,培养一定时间后 ,根据不同病毒感染细胞出现细胞病变 (CPE)时间的不同 ,加入一定量的MTT液 ,然后测定OD570 值 ,计算病毒抑制率。结果 :MTT法较光镜CPE法更为客观 ,能以OD值变化反映药物对病毒的抑制程度 ,从而获得实验结果 ,且便于统计学处理。结论

SRB法与MTT法细胞计数应用比较

目的比较SRB(SulforhodamineB)法与MTT法细胞计数的灵敏性与稳定性。方法取4种不同类型细胞系指数生长期细胞,调整细胞密度为1×106,并按比例稀释为0.078-10×105细胞梯度。分别用SRB法与MTT法测量各细胞梯度吸光度(A),分析其与相应细胞数目的相关性。SRB法与MTT法各随机取100个A值,测量其在2、16、24h和7d后的A值,比较这两种方法的稳定性。结果SRB法与MTT法测定的A值与不同细胞系细胞数目均有极好的相关性;SRB法的测定结果几乎不随时间而变,而MTT法的测定结果受时间影响较大。结论SRB法相对于MTT法是进行大规模细胞计数与细胞生长曲线测定前途更加光明的实验方法。

MTT分析法、空斑减数法及CPE观察法评估药物体外抗病毒效果的比较与分析

目的:比较MTT分析法、空斑减数试验及细胞病变效应(CPE)观察3种方法在评估药物体外抗病毒效果分析中的优劣,为选择适宜的药物体外抗病毒效果的检测方法提供实验依据。方法:分别采用 CPE法、MTT分析法和空斑减数试验法评价大黄素于体外抗疱疹病毒 1 型、疱疹病毒 2 型和柯萨奇病毒增殖的效果,比较 3 种检测方法的结果,并分析该方法的实用性与利弊。结果:在抗疱疹病毒增殖的检测中,MTT法与空斑减数法所测结果具有显著性差异,空斑减数法比MTT法更准确,但对抗柯萨奇病毒增殖的检测,MTT法与空斑减数法无明显差异。结论:MTT法与 CPE法结合,可广泛用于对抗病毒药物的筛选,但对于疱疹病毒类非杀细胞病毒,使用空斑减数法较好。

MTT还原法检测NK细胞活性的方法学研究

对ＭＴＴ还原法用于检测ＮＫ细胞毒活性进行了方法学探讨，实验表明，在ＭＴＴ还原法中，用二甲亚砜代替异丙醇溶解存活的靶细胞，并选效靶细胞比例为１０：１，效应细胞浓度为１×１０＾６，孵育时间４ｈ，即能获得满意的结果。

SRB法和MTT法抗肿瘤药物筛选结果相关性研究

为了探索抗肿瘤药物体外筛选中磺酰罗丹明B(SRB)法和四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法实验结果的相互验证作用,作者以PC-3、BGC-823、Bcap-37细胞系为研究对象,利用SRB法和MTT比色法对供试化合物行体外抑制活性考察,并用SPSS12.0对两种筛选方法得到的实验结果进行差异性分析。结果表明,SRB法和MTT比色法实验结果相关性好,可以相互验证实验结果的准确性和可靠性。

MTT法体外药敏实验预测宫颈癌细胞药物敏感性的初步探讨

背景与目的:近年来,宫颈癌新辅助化疗逐渐受到重视,应用广泛,但不同个体对不同化疗药物敏感性不同。本研究通过宫颈癌体外药敏实验来预测肿瘤细胞对化疗药物的敏感性,为临床筛选对宫颈癌相对敏感的化疗药物提供参考依据。方法:采用MTT法测定9种药物对32例宫颈癌患者的原代培养癌细胞的抑制水平。结果:①宫颈癌细胞对9种药物的敏感性依次为:力扑素>泰素>卡铂>异环磷酰胺>鬼臼乙叉甙>氟尿嘧啶>顺铂>博来霉素>环磷酰胺,力扑素、泰素和卡铂对肿瘤细胞的平均抑制率(IR)较高,分别为56.56%、55.66%和46.81%,与其它药物相比,差异有显著性(P<0.05)。②对Ⅰb1期宫颈癌细胞,泰素、力扑素和卡铂IR值较其它药物高,分别为58.71%、53.00%和49.25%;对Ⅰb2期宫颈癌细胞,力扑素和泰素的IR值较其它药物高,分别为65.26%和50.06%。③对于宫颈中分化鳞癌细胞,泰素、力扑素和卡铂IR值较其它药物高,分别为52.01%、49.21%和40.24%;对低分化鳞癌细胞,力扑素、泰素和卡铂的IR值较其它药物高,分别为61.16%、60.62%和48.75%。结论:①MTT法作为一种应用广泛的药敏实验方法,对宫颈癌新辅助化疗筛选敏感药物、选择临床化疗方案有一定的参考价值。②力扑素、泰素和卡铂对宫颈癌细胞较其它药物敏感。

MTT法应用于肝癌化学免疫治疗敏感性研究

目的 探讨 MTT法应用于肝癌细胞化疗敏感性检测及化疗与免疫治疗的合理应用。方法 应用 MTT法检测肝癌细胞的化疗敏感性和化疗对肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)的毒性。结果 肝癌细胞和 TIL 细胞数增多与生成的甲 (form azan)的光密度 (OD)值呈线性正相关。 TIL 在体外对自体肝癌细胞显示高活性的细胞毒作用。肝癌细胞对化疗药物的敏感性存在较大的个体差异。化疗药物对 TIL的毒性作用大于对肝癌细胞的杀伤作用。结论 以 MTT法作肝癌细胞化疗敏感性检测 ,既可指导临床选用肿瘤敏感性化疗药物 ,又可避免盲目选用肿瘤非敏感性化疗药物对机体抗肿瘤免疫细胞的毒性 ;TIL

MTT法检测RAW264.7细胞活力及可能因素分析

目的通过MTT法检测RAW264.7细胞活力并绘制生长曲线,探讨MTT作用环节中的可能影响因素,优化实验方案。方法以对数生长期的RAW264.7细胞为实验对象,分别用正常培养和脱离血清培养法,记录在不同时间点的OD值。并在加入DMSO后,分别在6、12、24和48h及3、15和30d进行OD值测量。结果加入DMSO后不同时间点的MTT法检测结果,随着时间的延长,结果差异越来越大,超过3d后影响较大,与对照组比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。3d内,与对照组比较,差异没有统计学意义(P>0.05)。结论①验证、测量并绘制RAW264.7的生长曲线;②加盖后影响透光度,增大了OD值,影响了实验结果;③随着DMSO时间的延长以第3天为限,否则影响实验结果。

肿瘤病人白细胞、癌细胞MTT法体外抗癌药敏测定相关性探讨

用MTT法测定了78例癌症病人的癌细胞和外周血白细胞，对15种抗癌药物的药敏性。结果发现：妇瘤对十种抗癌药物，白细胞、癌细胞药敏阳性及抑制率都有差别，但无统计学意义，有很好的相关性。肺癌病人的情况大致与妇瘤病人一样。除了CTX对白细胞药敏率比癌细胞显著增高外，其它九种药物亦无统计学差异。结肠、直肠癌组的白细胞和癌细胞药敏性对部份药物有极大的差别，它们是5－FU、MMC、CTX、DDP，癌细胞药敏抑制率明显高于白细胞（P＜0．025、P＜0．001）。

MTT法在抗真菌药敏实验中的应用

目的:研究MTT法在抗真菌药敏实验中的应用。方法:采用美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)推荐方案测定两性霉素B和伊曲康唑对5种常见真菌(白色念珠菌、光滑念珠菌、季也蒙念珠菌、申克孢子丝菌和石膏样小孢子癣菌)的最低抑菌浓度(MIC),终点判定分别采用NC CLS推荐的直接观察法和MTT法,对两法进行比较。结果:MTT法与常规直接观察法进行MIC终点判定所得结果具有很好的一致性。MTT法测得的A值与接种菌量具有正相关性。两性霉素B与伊曲康唑对丝状真菌和念珠菌都具有很好的抑制作用,MTT法测得的A值随药物浓度的增加而显著降低。结论:MTT法较之常规直接观察法结果更为客观、准确,且可量化,因而可以很好的替代肉眼观察法来判定真菌药敏试验的终点。

MTT比色分析法快速测定肝癌细胞株对化疗药物敏感性的方法研究

选用了人肝癌ＳＭＭＣ－７７２１细胞株对ＭＴＴ比色分析法用于体外抗肝癌化疗药敏感试验中的几个变量进行了研究讨论。结果显示：ＭＴＴ甲服产物最大吸收波长为５７０ｎｍ；ＭＴＴ的用量以每孔２０μｌ（５ｍｇ／ｍｌ）为最宜；ＭＴＴ孵育６小时所得光吸收度（Ａ）值最高；甲产量与细胞密度有好的线性关系；四种化疗药（阿霉素，卡铂，５一氟尿嘧啶，丝裂霉素）的作用时间以７２～９６小时为最好，且药物对细胞株的抑制率随药物浓度的增加而增加。通过试验证明，ＭＴＴ法快速、简便、经济、灵敏，可作为肝癌体外药物敏感性的测试方法。