MTT比色法抗肿瘤药物筛选实验条件和数据优化探索

MTT比色法是一种重要的体外抗肿瘤药物筛选方法。以PC-3细胞系为研究对象，对影响MTT比色法抗肿瘤药物筛选实验的主要因素-细胞密度、实验操作环节、OD值选取、以及数据的优化处理进行实验探讨。结果表明，当检测化合物6h．72h的抑制活性时，种细胞密度2000个／孔为宜。同时，采用本文所提的实验条件和数据处理办法，可以实现实验结果的准确可靠，3次测试偏差不超过10％。

姜黄素对人食管癌细胞株Eca-109增殖抑制和凋亡诱导的实验研究

目的研究姜黄素对人食管癌细胞增殖抑制作用及对细胞周期的影响。方法以四甲基偶氮唑蓝(MTT)试验测定细胞的生长抑制率,以流式细胞仪检测细胞周期分布。结果姜黄素对细胞的生长有明显的抑制作用,且呈浓度依赖性。结论姜黄素可抑制人食管癌细胞增殖,诱导失巢凋亡是其机制之一。

化毒补虚方含药血清对人肺腺癌细胞增殖及凋亡的实验研究

目的:观察不同浓度、不同时间化毒补虚方诱导肺腺癌细胞A549的抑制增殖作用及促进凋亡作用。方法:应用四氮唑蓝比色法(MTT法)检测化毒补虚方对人肺腺癌细胞增殖的影响,同时筛选出起有效抑制作用的浓度;并应用倒置显微镜观察细胞形态的变化及荧光显微镜、透射电子显微镜(TEM)观察细胞超微结构的变化。结果:MTT实验显示化毒补虚方抑制肺腺癌细胞增殖,其中50%浓度含药血清组对A549细胞抑制作用明显,在48 h达作用高峰;观察细胞形态及超微结构发现A549细胞形态发生明显改变,并可见凋亡小体。结论:化毒补虚方通过杀伤肺腺癌细胞、诱导细胞凋亡而发挥抗肿瘤作用。

臭牡丹地上部分抗肿瘤活性的筛选

目的:对臭牡丹地上部分所含的化合物进行抗肿瘤活性的筛选。方法:采用70%乙醇加热回流提取臭牡丹的地上部分,通过石油醚、二氯甲烷、正丁醇依次萃取和大孔吸附树脂、硅胶柱色谱进行分离纯化;采用液质联用技术对臭牡丹地上部分的粗分化合物进行了分析;采用MTT法对臭牡丹地上部分的不同萃取物质进行体外抗肿瘤活性的筛选;采用CCK8法检测毛蕊花糖苷和粗分物对A549细胞增殖的影响。结果:通过液质分析结果和文献比较,确定粗分物中是以毛蕊花糖苷为主的苯乙醇苷类化合物;95%乙醇洗脱部分的IC50为0.019mg/m L,二氯甲烷部分、25%乙醇及50%乙醇的IC50分别为0.039、0.180和0.181mg/m L,水部分的IC50不存在;毛蕊花糖苷的CC50值约为0.22mg/m L,粗分物A的CC50值约为1.3mg/m L。结论:MTT结果显示,95%乙醇部分抗肿瘤活性最好,其次为二氯甲烷,25%乙醇与50%乙醇第三,水部分基本没作用;CCK8结果显示,毛蕊花糖苷对A549细胞增殖有明显抑制作用,且具有浓度依赖性;粗分物A对A549细胞有低浓度促进、高浓度抑制的作用。

三种全蝎粉水提液不同活性部位的蛋白质含量测定及其抗肿瘤活性研究

目的:比较三种全蝎粉水提液各活性部位的蛋白质含量及其对肺癌细胞的抑制作用。方法:野生全蝎粉经过仿胃肠道的酶解液,发酵全蝎粉、野生全蝎粉的水提溶液,分别超滤、冻干,浓缩液用MTT法测定对肺癌细胞的抑制率。结果:三种全蝎粉水提液各活性部位对肺腺癌细胞的抑制率与空白对比差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论:不同方法处理的全蝎粉各活性部位均对肺癌细胞有抑制作用,且多为低浓度抑制率较高,小分子寡肽对肺癌细胞的抑制作用最好。

月华丸(胶囊)及其拆方对巨噬细胞增殖影响的研究

目的:研究月华丸(胶囊)对小鼠单核巨噬细胞(RAW264.7)活性的影响,为后续研究月华丸(胶囊)对耐多药结核分支杆菌感染细胞自噬的影响提供前期实验基础。方法:取对数生长期的RAW264.7细胞,用10%胎牛血清培养制成的细胞悬液加入96孔培养板中培养。分别采用终浓度为1.25g/m L、0.63g/m L、0.32g/m L、0.16g/m L、0.125g/m L、0.063g/m L、0.032g/m L、0.016g/m L不含阿胶的月华丸(胶囊)以及相同浓度梯度含阿胶的月华丸(胶囊)处理RAW264.7细胞,并设不加药的对照组。以4-甲偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞存活情况。结果:(1)不含阿胶的月华丸(胶囊)在1.25g/m L、0.63g/m L浓度时对RAW264.7细胞增殖抑制率明显升高,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),表明不含阿胶的月华丸(胶囊)高浓度对巨噬细胞的增殖有一定的抑制作用。(2)含阿胶的月华丸(胶囊)对RAW264.7细胞增殖率明显升高,各浓度组与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05),提示含阿胶的月华丸(胶囊)对巨噬细胞的增殖有明显促进作用。(3)浓度为0.32g/m L的含阿胶月华丸(胶囊)对RAW264.7细胞增殖率最高,为最佳促细胞增长药液浓度。结论:月华丸(胶囊)能提高巨噬细胞的活力,增强巨噬细胞的增殖。