MTT分析法、空斑减数法及CPE观察法评估药物体外抗病毒效果的比较与分析

目的:比较MTT分析法、空斑减数试验及细胞病变效应(CPE)观察3种方法在评估药物体外抗病毒效果分析中的优劣,为选择适宜的药物体外抗病毒效果的检测方法提供实验依据。方法:分别采用 CPE法、MTT分析法和空斑减数试验法评价大黄素于体外抗疱疹病毒 1 型、疱疹病毒 2 型和柯萨奇病毒增殖的效果,比较 3 种检测方法的结果,并分析该方法的实用性与利弊。结果:在抗疱疹病毒增殖的检测中,MTT法与空斑减数法所测结果具有显著性差异,空斑减数法比MTT法更准确,但对抗柯萨奇病毒增殖的检测,MTT法与空斑减数法无明显差异。结论:MTT法与 CPE法结合,可广泛用于对抗病毒药物的筛选,但对于疱疹病毒类非杀细胞病毒,使用空斑减数法较好。

MTT分析法检测重组成骨生长肽的活性

目的 对本研究室构建、表达的重组成骨生长肽 (rOGP)进行活性测定。方法 采用MTT分析法 ,PBS为阴性对照 ,骨宁注射液为阳性对照。结果 rOGP、骨宁注射液组OD550 值均明显高于PBS阴性对照组 ;rOGP组OD550 值又明显高于骨宁注射液组。结论 重组OGP具有促进成纤维细胞增殖活性 ,且效果明显优于目前临床常规药物骨宁注射液。

化疗药物体外药敏试验(MTT分析法)

目前,MTT分析法已被用于细胞系筛选新抗肿瘤药物,并正式用于临床.我们用MTT分析法对26例人肿瘤标本进行了化疗药物的体外药敏试验,探讨其临床应用的可能性.1 材料与方法1.1 主要试剂与仪器完全培养液 RPMI 1640培养液(美国GIBCO产品),含20%小牛血清(北京军事医学科学院),青霉素100u/ml,链霉素100μg/ml.清洗液Hanks液+青霉素、链霉素各500u/ml.消化液 0.25%胶原酶(Ⅰ型,sigma产品)+0.002%DNA酶(Fluka产品).

MTT比色分析法检测山羊白细胞介素-2方法的建立

以伴刀豆蛋白A(ConA)活化的山羊外周血单核细胞作为应答细胞 ,建立了检测山羊白细胞介素 2 (IL 2 )的MTT比色分析法。结果表明 ,以 3μg/mL的ConA浓度刺激 ,经过 36h活化所得的应答细胞活性最好 ;MTT的用量及作用时间分别以 2 0 μL( 5 0 μg/μL)及 4h为最佳 ;IL 2与活化细胞的作用时间以

改良MTT比色分析法测定乙型肝炎IL-2活性的研究

用改良MTT比色分析法,测定57例乙型肝炎患者末梢血淋巴细胞在PHA刺激下产生的白细胞介素2(IL-2)活性。各型乙型肝炎IL-2活性明显低于正常人,重症肝炎IL-2活性最低。结果提示:乙型肝炎细胞免疫功能紊乱。

检测狂犬疫苗细胞免疫反应的MTT比色分析法的建立和应用

<正> 细胞免疫是机体免疫反应的基础,在抗病毒感染中具有重要的地位,但目前对许多病毒感染和免疫后的细胞免疫状态报告较少,尤其是对狂犬疫苗接种后的反应在国内尚未见报告,淋巴细胞在疫苗免疫后的活性反应、动态变化及其作用等的资料仍不完整。细胞免疫的检查方法常用的是皮肤反应和体外试验,但这些方法手续繁杂,特异性不高,敏感度低,客观性差。近年来所用的~3H-Tdr掺入法测定淋巴细胞转化,提高了敏感性和客观性。

人骨巨细胞瘤化疗药物体外实验作用的分析

用体外培养的骨巨细胞瘤细胞系为研究对象，采用四氮唑蓝（ＭＴＴ）分析法着重观察了６种骨肿瘤的常用化疗药物：氨甲喋啶（ＭＴＸ）、阿霉素（ＡＤＲ）、顺铂（ＣＤＤＰ）、长春新碱（ＶＣＲ）、盐酸氮芥（ＮＭ）、丝裂霉素（ＭＭＣ）对骨巨细胞瘤的体外药物作用模式。结果发现ＭＴＸ呈坪型；ＡＤＲ呈双相指数型；ＣＤＤＰ呈阈值指数型；ＶＣＲ呈简单指数型；ＮＭ呈阈值指数型；ＭＭＣ呈简单指数型。除ＭＴＸ对其无作用外，其余都对其有一定的细胞毒作用。

一种测定细胞增殖和衰减的快速比色分析法

一种测定细胞增殖和衰减的快速比色分析法黄文栋，王亚凡（浙江大学生物科学与技术系，杭州３１００２７）（浙江省医学科学院）关键词ＭＴＴ比色分析测定细胞增殖和衰减常用来评估各种生化因子或药物的效用。测定方法通常采用同位素参入法或活细胞计数法，但前者必须用到...

MTT法在非小细胞肺癌优化治疗方案中的应用

目的:通过非小细胞肺癌体外原代细胞的培养,对其常用的化疗药物进行敏感性检测,探讨不同化疗药物之间的敏感性差异,筛选出最佳的化疗药物或联合化疗方案。方法:应用MTT显色分析法测定40例非小细胞肺癌实体瘤标本对9种化疗药物及其组成的联合化疗方案的敏感性或耐药性,并比较结果。结果:非小细胞肺癌化疗敏感性个体差异较大。联合化疗药物的敏感性明显优于单药,P=0.038。各药物平均抑制率由高到低的顺序依次为DDP+HCPT>DDP+VP16>HCPT>DDP+NVB>DDP+ADM+IFO>ADM>CTX+ADM+VCR>DDP>NVB>VP16>CBP>IFO>VP16+CBP>VCR>CTX。无论是单药组间比较,还是联合药物组间比较,其敏感性的差异均有显著差异,均P<0.01。结论:体外肿瘤细胞药敏试验对临床肿瘤化疗用药有很强的指导性,并能发现耐药病例。对非小细胞肺癌患者进行化疗时,应尽量选择联合用药方案。

一株具抗肿瘤活性的北极细菌的筛选及分子鉴定

在中国首次北极科学考察期间 ,从北极海域采集了水体 ,沉积物等样品 ,从中分离得到一批嗜冷细菌 ,采用MTT法对这些北极海洋细菌进行了细胞毒活性物质的筛选 ,得到一株具有细胞毒活性的菌株 .采用

无机硅壳类纳米颗粒对细胞的毒性检测

采用MTT分析方法结合激光共聚焦荧光显微成像系统研究了无机硅壳类纳米颗粒,包括无机二氧化硅纳米颗粒(SiNP)、二氧化硅壳荧光纳米颗粒(FSiNP)以及二氧化硅磁性纳米颗粒(MSiNP)对COS-7细胞、HNE1细胞和MCF-7细胞的毒性.研究结果表明:在有效浓度范围内,无机硅壳类纳米颗粒具有很好的生物相容性,对细胞的生长和代谢没有明显的影响,从而为无机二氧化硅纳米颗粒在生物医学中的应用提供了坚实的理论依据.

涎腺腺样囊性癌细胞对抗癌药物敏感性的研究

目的 检测涎腺腺样囊性癌对抗癌药物的敏感程度。方法 采用MTT法测试了 14种抗癌药物对SACC - 83、ACC - 2和ACC -M等 3个体外培养的涎腺腺样囊性癌细胞株的杀伤作用强度。结果 3种细胞株对14种药物的敏感性大体相似而又有差别 ,在抗代谢类抗肿瘤药物中 ,对MTX、DNR、ADM、5 -Fu、MMC的敏感性较强 ,在植物来源的抗癌药物中 ,对Taxol有明显的敏感性。

具抗肿瘤活性的海洋微生物菌株的初步筛选

本研究采用MTT法对海洋放线菌、细菌、霉菌及极地和大洋细菌进行细胞毒活性物质的筛选 ,结果有 1 0 %放线菌及一株极地细菌具有细胞毒活性 .此外利用DNA修复特性在E .coli 3 4 3 /591和E .coli 3 4 3 /63 6之间的差异性 ,对前面筛得的菌株进行DNA损伤的筛选 ,结果得到两株活性菌株 .采用荧光染色观察得到 3株具有诱导肿瘤细胞凋亡的菌株 ,这些具抗肿瘤活性的菌株可供进一步研究 .

栽培菊苣籽总黄酮的细胞毒性及清除羟自由基活性成分的识别

采用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2-H-tetrazolium bromide,MTT)法评价栽培菊苣籽总黄酮对小鼠巨噬细胞RAW264.7的毒性。从总抗氧化能力、清除2,2’-联氮-双-(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐自由基(2,2’-azino-bis-(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid)diammonium salt cation radical,ABTS+·)能力、清除O_2^-·能力以及抑制Fe^(2+)诱发的卵黄脂蛋白脂质过氧化能力4个方面评价栽培菊苣籽总黄酮的抗氧化活性,并与常见的抗氧化剂VC和叔丁基对苯二酚(tertbutylhydroquinone,TBHQ)作比较。之后采用高效液相色谱(high-performance liquid chromatography,HPLC)法对栽培菊苣籽总黄酮中清除·OH的活性成分进行了识别。MTT实验结果显示,菊苣籽总黄酮质量浓度为1 mg/mL时,对RAW264.7细胞具有一定的毒性,而当其质量浓度适当减小后,则基本无毒性。抗氧化实验结果表明:栽培菊苣籽总黄酮的总抗氧化活性和清除ABTS^+·的能力弱于VC和TBHQ,但在低质量浓度时,其总抗氧化活性与TBHQ非常接近;在清除O_2^-·方面,活性由强到弱为VC>菊苣籽总黄酮>TBHQ;在抑制卵黄脂蛋白脂质过氧化实验中,栽培菊苣籽总黄酮强于VC,但弱于TBHQ。HPLC法结果显示,绿原酸比洋蓟素具有更高的清除·OH的活性,且二者对·OH的清除率分别为66.42%和46.00%。

一种真菌菌丝体甲醇提取物—A7的抗肿瘤活性研究

目的 研究一种真菌菌丝体甲醇提取物— A7的抗肿瘤活性。方法 MTT法观察 A 7对人 BEL - 74 0 2肝癌细胞、HCT- 8结肠癌细胞、SPC- A- 1肺腺癌细胞、GL C- 82肺腺癌细胞和 EC- 10 9食管癌细胞的生长抑制作用 ;以小鼠移植性肿瘤 S1 80 模型 ,观察 A7的体内抗肿瘤作用。结果 A 7对前述癌细胞的半数抑制浓度 (IC50 )分别为 0 .8,1.7,4 .7,5 .0 ,7.6 μg/ m L,均小于 10 μg/ m L;动物实验表明 ,5 0 mg/ kg A7对 S1 80 实体肉瘤的抑制率达 4 6 .8%(P<0 .0 0 1)。结论 A7在体外和体内都具有一定的抗肿瘤活性。

辛伐他汀对成骨细胞增殖和矿化功能影响的实验研究

目的:研究辛伐他汀对原代培养大鼠颅骨成骨细胞增殖和矿化功能的影响。方法:酶消化法分离培养大鼠颅骨成骨细胞,分别用空白培养基、不同浓度辛伐他汀及不同浓度的rhBMP-2作用24 h后,MTT法测量药物对细胞增殖活性的影响,细胞接种到培养板连续培养7 d,von Kossa染色观察成骨细胞矿化结节,采集图像并转换处理后计算矿化结节面积的百分比。结果:辛伐他汀对成骨细胞增殖活力的增加呈剂量依赖方式,而且可使成骨细胞矿化面积百分比显著增加,与rhBMP-2的作用相当。结论:辛伐他汀可促进体外培养大鼠颅骨成骨细胞的增殖和矿化,从而发挥促进骨形成的作用。

白细胞介素21体外促进骨髓瘤细胞增殖的研究

目的体外研究白细胞介素21(IL-21)对骨髓瘤细胞增殖的促进作用。方法以IL-21及IL-6体外刺激来自于骨髓瘤患者的骨髓瘤细胞,RT-PCR分析IL-21受体(IL-21R)在骨髓瘤细胞中的表达,MTT分析IL-21及IL-6促进骨髓瘤细胞的增殖效应。结果RT-PCR分析表明骨髓瘤细胞表达IL-21R;MTT分析结果显示IL-21体外对11例患者中的7例骨髓瘤细胞具有促进作用,最大增殖率达154%,但其作用强度低于IL-6。结论IL-21具有促进骨髓瘤细胞增殖作用,其作用强度较IL-6弱。

重组人activin A对A549细胞增殖及凋亡的影响

背景与目的:活化素(activins)是转化生长因子TGF-β超家族成员。有研究表明,活化素可以诱导多种肿瘤细胞的凋亡。本研究旨在探讨重组人activin A对人肺腺癌细胞系A549增殖及凋亡的影响。方法:体外培养A549细胞,以不同浓度activin A处理A549细胞不同时间后,用MTT法检测其生长抑制情况;流式细胞仪及Annexin V-FITC试剂盒检测activin A对A549细胞凋亡的影响;Western blot检测活化素Ⅱ型受体(ActRⅡ和ActRⅡB)的表达情况。结果:activin A能抑制A549细胞增殖,且呈剂量和时间依赖性。流式细胞仪检测结果显示,activin A能促进A549细胞凋亡。Western blot结果显示,随着activin A浓度的增加,活化素Ⅱ型受体的表达量呈浓度依赖性增加。结论:activin A能在体外抑制A549细胞的增殖并诱导其凋亡。推测是通过诱导活化素Ⅱ型受体的表达,激活其下游一系列信号转导通路,从而发挥其生物学功能。

以虫草素为配体的钌多吡啶(Ⅱ)配合物的抗肿瘤活性研究

目的研究虫草素为配体的钌多吡啶(Ⅱ)配合物的抗肿瘤活性。方法以虫草素(3′-脱氧腺苷)为配体,合成了3种钌(Ⅱ)配合物[Ru(L)2(DOA)]Cl2(L=bpy,1;phen,2;dmbpy,3;DOA=3′-脱氧腺苷),采用MTT法和流式细胞术分析体外抗肿瘤活性。结果 MTT法结果表明配合物1,2和3对皮肤癌细胞A375生长表现出明显的抑制作用,且其抗肿瘤活性优于配体虫草素;流式细胞分析结果表明,配合物1是通过诱导肿瘤细胞凋亡抑制肿瘤细胞生长。结论以虫草素为配体的钌多吡啶配合物具有一定的抗肿瘤活性。