MTT法检测羟基喜树碱对兔晶体上皮细胞生长的作用

目的：检测羟基喜树碱(Hydroxycamptothecine，HCPT)对体外培养的兔晶体上皮细胞（rabbit lens epithelial cells，RLECs）增殖的影响。方法： 取2～3代的RLECs在96孔板中培养24h后，用不同浓度的HCPT分别作用24及72h，用甲基噻唑基四唑（Methyl thiazolyl tetrazolium，MTT）测定法观察HCPT对RLECs增殖及贴壁的影响。结果：HCPT既能抑制RLECs的增殖，还可抑制RLECs的贴壁，24h的半数抑制量（IC50）为96.041μg/ml，72h的IC50为1.34μg/ml。 结论： 一定浓度的HCPT能有效抑制RLECs的生长。

应用噻唑蓝比色法进行大肠癌与胆囊癌细胞生长曲线的对比测定

目的探索大肠癌及胆囊癌细胞株的最佳体外药敏实验条件。方法应用MTT比色测定法进行细胞生长曲线的测定,以了解两种细胞的对数生长期(最佳实验干预期)、最佳培养接种浓度等。结果分裂增殖快的大肠癌174细胞株可选用630nm波长进行吸光度测定,分裂增殖慢的胆囊癌细胞株450nm波长更优。结论大肠癌174细胞株的最佳细胞接种浓度为1.5～5.0×104/ml,对数生长期为接种后的3～5天;胆囊癌细胞株的最佳细胞接种浓度为1.4～2.6×104/ml,对数生长期为接种后的4～7天。

草菇培养物中粗三萜和黄酮含量及抗氧化抗肿瘤活性研究

采用液体摇瓶法培养草菇菌丝体,并用不同有机溶剂对培养液及菌丝体中的代谢成分分别进行分离提取,获得了不同来源的次生代谢提取物。对各提取物的成分分析表明,石油醚相、乙酸乙酯相和乙醇相提取物中均含有粗三萜和黄酮类物质,但菌丝体提取物中粗三萜和黄酮含量明显高于培养液提取物中的含量。石油醚抽提菌丝体获得的提取物中粗三萜含量最高,达17%,而乙酸乙酯抽提菌丝体获得的提取物中黄酮含量最高,达9.31%。抗氧化活性检测结果显示,石油醚相、乙酸乙酯相、乙醇相中的代谢提取物均有较高的抗氧化活性,但乙酸乙酯相提取物的抗氧化活性明显高于石油醚相提取物,具最高抗氧化活性的提取物分别来自乙酸乙酯、乙醇对菌丝体的抽提物。MTT法检测各提取物对胃癌细胞增殖的抑制作用,结果显示各组分均有较高的抗肿瘤活性,且抗肿瘤活性与提取物浓度存在明显的量效关系。

羟基喜树碱抑制体外培养兔晶体上皮细胞的生长

为研究羟基喜树碱 (HCPT)对体外培养兔晶体上皮细胞 (RLECs)生长的作用 ,取 2～ 3代的RLECs在 96孔板中培养 2 4h后 ,用不同浓度的HCPT分别作用 2 4及 72h ,用甲基噻唑四唑 (Methylthiazolyltetrazolium ,MTT)比色测定法观察其对RLECs增殖的影响。结果显示HCPT能抑制RLECs的增殖 ,2 4h的半数抑制量 (ID50 )为 96 0 41mg/L ,72h的ID50 为 1 34mg/L ;且HCPT还可抑制RLECs的贴壁。

硒化壳寡糖对成骨细胞的作用

[目的]研究硒化壳寡糖对体外培养的成骨细胞MC3T3-E1的作用。[方法]将硒化壳寡糖分别以10、100、500、1 000、2 000μg/ml的浓度加入培养基中,通过MTT测定法观察其对体外培养的成骨细胞的作用。[结果]在试验设置的5个浓度梯度下,硒化壳寡糖均能促进成骨细胞增殖,且效果优于壳寡糖,其中500μg/ml为最适浓度。[结论]其机理还有待于进一步探索。

G-蛋白Rab3a对神经生长抑制因子(GIF)抑制神经元细胞生长作用的影响

为了深入研究Rab3a和神经生长抑制因子(GIF)的相互作用,在大鼠海马神经元细胞原代培养体系中,用MTT还原法定量研究了Rab3a对GIF神经生长活性的影响,发现Rab3a可以替代脑提取物而使GIF发挥神经生长抑制活性.接着又利用多克隆抗体方法研究了GIF与Rab3a的相互作用,结果说明Rab3a是GIF发挥神经生长抑制活性所必需的蛋白质,并且它们的相互作用受空间位置的因素影响较大.在随后对它们相互作用的机理和可能的生物学意义进行了讨论.

神经生长抑制因子在体外可抑制嗜铬细胞瘤株PC12

神经生长抑制因子(GIF)又名金属硫蛋白-Ⅲ, 是神经系统中第一个被鉴定的具有神经元生长抑制功能的蛋白. 采用MTT还原测定法测定了重组GIF对嗜铬细胞瘤株PC12和成神经细胞瘤株SY5Y生长的影响: 重组GIF在体外可抑制PC12的生长; 在浓度为100 mg/L时, 对PC12的抑制率约为25%; 而当浓度为300 mg/L时, 对PC12的抑制率达到约50%. 表明PC12可作为神经元模型来测定GIF的神经元生长抑制活性. GIF在体外不能抑制常用作神经细胞瘤株模型的SY5Y, 表明GIF并不具有广谱的抑制神经细胞瘤株的作用; GIF抑制PC12可能就是针对它所具有的胆碱能神经元的某些特性. 这对于揭示GIF的神经元生长抑制活性的作用机制有着重要意义.